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  • 肾络通对高糖诱导足细胞产生MMP9的调节作用

    作者:白亚玲;赵玉庸;黄海长;徐金升;许庆友;陈志强

    目的:探讨肾络通药物血清对高糖诱导足细胞分泌明胶酶、Ⅳ型胶原的影响及可能的作用机制.方法:小鼠足细胞分为高糖组、甘露醇对照组、正常糖对照组和肾络通药物血清组.应用明胶酶谱法观察各组细胞培养液上清明胶酶活性的动态变化,Western印迹法检测上清Ⅳ型胶原α5链蛋白水平.RT-PCR方法检测MMP9 mRNA的改变.结果:高糖组细胞培养上清MMP2的活性没有明显变化;MMP9活性于第2天开始升高,第3天达高峰;高糖组细胞培养上清Ⅳ型胶原α5链蛋白表达自第2天开始下降,第3天达低水平,细胞培养上清MMP9的活性与Ⅳ型胶原α5链蛋白的表达量呈负相关;高糖刺激足细胞2d MMP9 mRNA水平增加,5d降到基础水平;5%肾络通药物血清组第3天 MMP9 活性无明显升高,MMP2活性无明显变化;5%肾络通药物血清第2天MMP9mRNA水平无明显增加;5%肾络通药物血清组第3天培养上清Ⅳ型胶原α5链蛋白表达无明显下降.结论:肾络通可以抑制高糖诱导足细胞MMP9及Ⅳ型胶原α5链蛋白的异常改变.

  • 中药血清药理学在骨质疏松症实验研究中的运用进展

    作者:张戎;冯小辉

    骨质疏松症(OP)是一种与年龄相关、全身性的骨骼系统疾病,发病率随年龄的增加而显著增高。其主要特征是骨量减低和骨组织微结构退化,并导致骨强度减低、骨脆性增加以及骨折危险性增高[1]。OP发生的机制是骨吸收大于骨形成,在骨的重建过程中无法完全修复被吸收的骨质,使其骨量不断减少,骨质下降。因此,治疗OP的关键是促进成骨细胞(OB)的成骨过程,缓解破骨细胞(OC)的破骨过程。

  • 中药血清与肝星状细胞研究进展

    作者:杨春;李昌平

    肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的活化、增殖是肝纤维化形成和发展的中心环节.利用中药血清药理学研究方法发现,中药血清可干预肝纤维化形成和发展.综述了中药血清与肝星状细胞的研究进展,指出中药血清从抑制HSCs活化、HSCs增殖、HSCs收缩,促进HSCs凋亡等多靶点作用于肝星状细胞.可能是一种有效的抗肝纤维化治疗方法.

  • 荷瘤小鼠扶正抑瘤颗粒含药血清对H22细胞的凋亡、自由基含量和线粒体膜电位的影响

    作者:王学习;赵健雄;陈茹;白德成

    目的 观察荷瘤小鼠扶正抑瘤颗粒(FYG)含药血清对H22细胞的凋亡、自由基含量和线粒体膜电位的影响.方法 应用流式细胞仪检测FYG含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用激光共聚焦显微镜检测H22细胞DNA RNA、自由基含量和线粒体膜电位的变化.结果 FYG含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞DNA RNA和线粒体膜电位降低,自由基含量升高.结论 FYK含药血清引起H22细胞的凋亡可能与其影响H22细胞自由基含量和线粒体膜电位变化有关.

  • 心脑宁诱导增生VSMC凋亡及对相关基因表达的影响

    作者:孔祥明;梁炜

    目的:探讨活血化瘀中药血清体外诱导增生血管平滑肌细胞凋亡的作用及其分子机制.方法:采用流式细胞仪分析,DNA电泳分析检测细胞凋亡;应用Northen印迹检测bcl-2、c-myc基因表达活性.结果:经中药血清处理的血管平滑肌细胞(vascular smooth mucle cell,VSMC),可出现典型的凋亡特征,DNA电泳呈梯状图谱;流式细胞仪分析显示G0/G1期细胞阻滞现象,亚二倍体凋亡细胞增多,出现典型的凋亡峰,细胞凋亡率与中药血清浓度具有量效关系.杂交结果提示,20%中药血清可抑制抗凋亡基因bcl-2的表达,上调促凋亡基因c-myc的mRNA水平.结论:活血化瘀中药可通过影响凋亡相关基因bcl-2、c-myc的表达活性而诱导VSMC凋亡.

  • 补肾益髓中药含药血清诱导BMSC骨向分化作用机制的实验研究

    作者:邓悦宁;周达岸;陈丹

    目的:探讨补肾益髓中药血清对骨质疏松症大鼠BMSC骨向分化的调控机制.方法:分离培养大鼠BMSC,实验随机分为6组即空白组、血清组、血清+TGF组、血清+BMP组、TGF+ BMP组、综合诱导组,检测补肾中药含药血清对BMP-2、TGF-β1、Smad4、Cbfal mRNA表达,探讨补肾益髓中药含药血清在诱导BMSC骨向分化过程中可能的作用机制.结果:综合诱导组能明显促进ALP、Coll、BGP、TGF-β1、、BMP-2的表达量;血清+TGF、TGF+ BMP、血清+BMP联合使用有一定的协同作用.各诱导在促进BMSC向OB分化过程中,通过上调TGF-β超家族/Smads信号传导通路中Smad4以及Cbfa1 mRNA水平,对骨向分化起到了启动和促进作用.结论:各诱导组在诱导BMSC骨向分化的过程中,上调Smad4、Cbfa1 mRNA水平可能是诱导各组促进BMSC骨向分化的作用机制之一.

  • 平肝潜阳方含药血清中天麻素水平测定及其对血管平滑肌细胞活性的影响

    作者:李湘平;罗艳红;钟广伟;尹桃;相玲丽;李炜;陈国林

    背景:平肝潜阳方为中药复方制剂,化学成分复杂,直接测定血清中药物含量,比较困难.天麻是平肝潜阳方的君药之一,且其为成苷类衍生物,水平容易测定.目的:通过检测血清中天麻素水平了解平肝潜阳方在体内的药物浓度,探讨制备含药血清的具体方法,并观察平肝潜阳方含药血清对血管平滑肌细胞活性的影响.方法:大鼠予以平肝潜阳方浸膏2 g/d给药3 d或7 d,分别于3 d或7 d内于每天8:00和16:00各灌药1 g,与第4或第8天8:00灌药2 g,于后给药前及给药后0.5,1,2,3,5 h心脏内采血.高效液相色谱测定大鼠体内天麻素水平;在血管平滑肌细胞的培养液中分别添加不同浓度灭活处理的含药血清,加药培养后24 h采用MTT法观察细胞活性的抑制率.结果与结论:平肝潜阳方浸膏3 d与7 d给药大鼠,均在后一次给药后1 h达到高血药浓度,但3 d给药血药浓度迅速下降,而7 d给药可维持较长时间的血药浓度平台;天麻素在0.045-5.6 mg/L范围内呈线性,r=0.999 2,精密度RSD日内为1.86%,加样回收率为93.88%.不同浓度含药血清对血管平滑肌细胞的生长均有抑制作用,但以5%浓度含药血清对血管平滑肌细胞的生长抑制率大(P<0.01),其中7 d给药组的抑制率明显高于3 d给药组(P<0.01).因此,平肝潜阳方含药血清的制备应选取连续给药7 d后末次给药1 h后为佳采血时间点,含药血清能够抑制血管平滑肌细胞的活性.

  • 中药血清实验研究概况

    作者:周维一;陆启滨

    文章综述了近10年来中药血清实验方法优势和作用机制的研究概况.中药血清实验方法的优势在于避免得出错误结论,克服干扰因素,利于阐明机理等;中药血清作用机制的研究包括对血中有效成分的分析,对细胞增殖、分化、凋亡的影响,以及对基因的影响等.指出中药血清实验研究是目前中药药物有效成分及其作用机制研究的一种较为理想的半体内实验研究方法.

    关键词: 中药血清 实验研究
  • 浅论含药血清的药理作用强度与体内给药量效、时效的关系

    作者:刘青妍

    目的:探讨含药血清的药理作用强度与体内给药量效、时效的关系.方法:将我院实验室的健康大鼠分成四组,为其分别按照45mg/kg、90mg/kg、180mg/kg、360mg/kg的比例取适量的双参通冠方剂进行实验.在用药后的30min、60min、90min及120min获取这些健康大鼠的药物血清,将获取的药物血清进行心肌细胞的培养.然后,使用DMEM培养基对心肌细胞进行培养,并对其进行LDH值的检测.据此分析含药血清的药理作用强度与体内给药量效、时效的关系.结果:实验结束后,4种不同剂量的药物血清均能有效地抑制缺氧复氧心肌细胞LDH的释放,其抑制率各不相同,与空白血清相比差异具有显著性(P<0.05).当给药剂量从45mg/kg逐渐增加至360mg/kg时,药物血清对LDH释放的抑制率有逐渐减弱的趋势.在用药后90min所得的药物血清对LDH释放的抑制作用与空白血清相比差异具有显著性(P<0.05).结论:体内给药剂量与药物血清的药理效应之间不是线性关系,用药后佳的取血时间需要进行进一步的临床实验可知.

  • 中药含药血清在体外抗肿瘤研究中的应用

    作者:韩凤娟

    研究中药含药血清抗肿瘤研究进展,分别从促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤细胞端粒酶活性、抑制肿瘤细胞增殖、协同细胞毒化疗等方面进行分析,并简要说明目前研究中存在的问题.

  • 扶正抑瘤颗粒对小鼠移植性肿瘤细胞间通讯的影响

    作者:王学习;赵健雄;陈茹;程卫东;白德成

    目的:观察扶正抑瘤颗粒(红芪、当归、墓头回、莪术)含药血清对荷瘤小鼠H22细胞的凋亡和肿瘤细胞间通讯的影响.方法:Annexin V/PI双染法检测FYK含药血清对H22细胞凋亡情况的影响;应用共聚焦激光显微镜检测H22细胞RNA、DNA、[Ca2+]、细胞间通讯状况.结果:扶正抑瘤颗粒含药血清可引起H22细胞的凋亡,细胞RNA、DNA含量降低,[Ca2+]升高,细胞间通讯状况得到改善.结论:扶正抑瘤颗粒含药血清抑制H22细胞的增殖,并提高肿瘤细胞[Ca2+],阻止肿瘤细胞分裂.

  • 中药血清促进成骨细胞增殖和分化的实验研究进展

    作者:袁俊;林燕萍

    近年来,运用体外成骨细胞培养和中药血清干预实验,研究和发现骨质疏松治疗药物的报道已屡见不鲜.该法与传统的将中药粗提物直接加入反应体系中的方法相比具有明显的优势:在某种程度上克服了中药本身的理化性质不确定因素对实验结果的干扰,而且相对接近药物在体内的生物转化的真实过程,能在一定程度上揭示中药和复方在体内代谢过程中的转化和转变,有助于中药真正有效部位、活性成分的发现,能客观地阐明中药的药效和作用机理.

  • 中药血清对骨组织细胞OPG/RANKL系统的影响

    作者:郭世明;林燕萍

    骨质疏松症(osteoporosis,OP)是威胁中老年人健康的一种常见的疾病,国内外对骨质疏松症的研究都非常重视.骨质疏松症由骨代谢失衡引起,成骨细胞和破骨细胞都是骨代谢过程中的重要核心细胞,成骨细胞不仅参与骨形成,而且还参与破骨细胞性骨吸收的调节,近年来不少学者从细胞分子生物学角度开展了中医药对骨组织细胞影响的实验研究,为中医药防治骨质疏松症提供了分子生物学理论依据.其中运用体外骨组织细胞培养和中药血清干预实验是常用的方法之一,以下就有关研究综述如下.

  • 龙鳖血清对不同来源间充质干细胞生物特性的影响

    作者:杨仁轩;黄永明;刘万鹏;徐伟龙;朱兴阳

    目的:观察龙鳖血清对不同来源干细胞生物特性的影响.方法:从滑液和骨髓中分离培养间充质干细胞(MSCs),以龙鳖血清干预MSCs,观察不同来源MSCs的标记物和炎症因子的表达情况,以及向软骨细胞分化能力的影响.结果:不同来源MSCs培养后的细胞形态及标记物表达无差别,原代SF-MSC表达IL-1β、TNF-α和TGF-β1明显高于原代、传代BM-MSC及传代SF-MSC(P<0.01),龙鳖血清可明显抑制SF-MSC分泌炎症因子(P<0.01),而对BM-MSC分泌炎症因子无明显影响;原代SF-MSC表达的胶原蛋白1、2和3均低于原代和传代的BM-MSC(P<0.05),龙鳖血清可明显诱导原代SF-MSC和BM-MSC向成软骨细胞表达(P<0.05).结论:龙鳖血清对SF-MSC和BM-MSC均有抑制细胞因子释放,诱导SF-MSC和BM-MSC向软骨分化的能力,这对中药在防治骨关节炎机理研究中具有重要的指导意义.

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