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siRNA干扰碱性成纤维细胞生长因子表达对肺腺癌A549增殖和克隆特性的影响
目的 利用小分子RNA干扰碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)表达,探讨其对肺腺癌细胞A549增殖和克隆能力的影响.方法 针对bFGF基因序列构建短发夹状siRNA真核表达载体,转染A549细胞,荧光显微镜下观察转染效率,采用Real Time-PCR检测观察bFGF-siRNA转染前后A549细胞bFGF mRNA表达变化,Western印迹法测OCT-4蛋白表达的变化.CCK-8比色实验及克隆形成实验分别观察A549细胞增殖和克隆能力的变化.结果 特异性bFGF-siRNA能有效降低A549细胞中bFGF的mRNA水平(P＜0.01),转染后A549细胞OCT-4表达下降(P＜0.05),增殖和克隆能力均明显降低(各P＜0.01).结论 靶向bFGF基因的短发夹状siRNA可以抑制bFGF表达;bFGF信号通路在在维持肺癌A549增殖和克隆特性、OCT-4表达上起重要作用.
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白藜芦醇抑制视网膜母细胞瘤株血管生成相关因子VEGFA、bFGF和Ang-2表达的机制
目的 探讨白藜芦醇(Res)对人视网膜母细胞瘤株SO-RB50血管生成相关因子内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和血管生成素2(Ang-2)表达的影响.方法 体外培养人视网膜母细胞瘤细胞SO-RB50细胞株,分别加入6.25、12.5、25、50、100 μmol/LRes,对照组加等量0.5％二甲亚砜(DMSO),孵育24、48 h后,MTT方法观察Res对细胞生长抑制作用;RT-PCR、Western印迹分别测定50 μmol/L Res处理48 h后VEGFA、bFGF和Ang-2 mRNA和蛋白的表达.结果 Res可显著抑制视网膜母细胞瘤细胞生长,且具有剂量和时间依赖性;Res作用后VEGFA、bFGF和Ang-2 mRNA和蛋白表达下降,与对照组间比较,差异均有统计学意义.结论 Res具有抗视网膜母细胞瘤血管生成的作用,其机制可能与下调血管生成相关因子VEGFA、bFGF和Ang-2表达有关.
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大肠腺癌组织中乙酰肝素酶及碱性成纤维细胞因子的表达
目的 探讨乙酰肝素酶(HPA) mRNA,HPA、碱性成纤维细胞因子(bFGF)蛋白的表达在大肠腺癌侵袭、转移过程中的临床病理意义.方法 应用免疫组化SP法检测70例大肠腺癌组织中HPA、bFGF两种蛋白的表达,应用原位杂交技术检测HPA mRNA的表达.结果 ①70例大肠腺癌组织中HPA mRNA及HPA、bFGF两种蛋白的阳性表达率分别为58.57％、62.86％、74.30％,高于癌旁正常组织中相应的阳性表达率(分别为13.33％、6.67％、20.00％)；②HPA mRNA及两种蛋白的表达在浸润至浆膜外组高于浆膜层以内浸润组,在淋巴结有转移组高于淋巴结无转移组(P＜0.05)；在不同DUKES分期(A期、B期、C+D期)组间比较,差异有显著性(P＜0.05)；③大肠腺癌组织中HPA mRNA的表达与HPA蛋白的表达具有较高的一致性；④大肠腺癌组织中HPA与bFGF的阳性表达呈正相关(r=0.262,P =0.028).结论 ①HPA mRNA和HPA、bFGF两种蛋白在大肠腺癌中表达增高,其过表达可能促进大肠腺癌的侵袭、转移；②大肠腺癌组织中HPA与bFGF的阳性表达呈正相关,提示两者在大肠腺癌的侵袭、转移中可能具有协同作用.
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“和血生络法”对PI3K/Akt信号转导通路的影响
目的 通过研究“和血生络方”对心肌梗死模型大鼠左室心肌组织AKT mRNA表达的影响,从信号转导通路角度探讨“和血生络法”促血管新生的作用机制.方法 选雄性Wistar大鼠,制作心肌梗死大鼠模型,随机分为消心痛组,和血生络高、低剂量组及模型组,同时建立假手术组,每组6只.药物治疗组分别给予和血生络水溶液(9.9,19.8 g·kg-1·d-1)及消心痛水溶液(2.7 mg.kg-1·d-1)每天灌胃1次,其他组给予等量蒸馏水,连续用药3 w后处死大鼠,取心脏组织检测AKT mRNA的表达.结果 模型组较假手术组大鼠显著增高(P＜0.05).和血生络高、低剂量组及消心痛组明显高于模型组(P＜0.05).和血生络高剂量组与消心痛组明显优于和血生络高低剂量组(P＜0.05).和血生络高剂量组明显优于消心痛组(P＜0.05).结论 PI3K/Akt信号通路在“和血生络法”促血管新生中起着重要作用.
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碱性成纤维细胞生长因子、cAMP反应元件结合蛋白和Bcl－2在卵巢上皮性恶性肿瘤中的表达及意义
目的：探讨碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、cAMP反应元件结合蛋白（CREB）和 Bcl－2蛋白在卵巢上皮性恶性肿瘤中的表达，分析三种蛋白与卵巢上皮性恶性肿瘤临床病理学特征的关系。方法采用免疫组化法检测82例上皮性卵巢癌，20例卵巢良性肿瘤，18例正常卵巢组织中bFGF、CREB和Bcl－2蛋白表达情况。分析bFGF、CREB和Bcl－2蛋白在卵巢癌以及卵巢良性肿瘤、卵巢正常组织中的差异表达及三种蛋白表达与临床病理参数的关系，采用Spearman相关分析法分析三种蛋白表达的相关性。结果①bFGF、CREB和Bcl－2在卵巢恶性肿瘤组织中表达明显高于卵巢良性肿瘤和正常卵巢组织（P＝0．000）。②bFGF、CREB和Bcl－2表达与肿瘤分期、淋巴结转移、大网膜转移及是否有腹水有显著相关性，在分期较高，有淋巴结转移、大网膜转移及有腹水者，bFGF、CREB和Bcl－2的表达明显增高，其中bFGF的表达与组织分化程度有关，但三者的表达年龄、肿瘤的组织学类型均无显著的相关性。③bFGF、CREB和Bcl－2三者的表达呈正相关，其中 bFGF和 CREB（r＝0．426，P＝0．000）、bFGF和 Bcl－2（r＝0．540，P＝0．000）、CREB和Bcl－2（r＝0．673，P＝0．000）。结论 bFGF、CREB和Bcl－2可能协同参与了卵巢癌的发生发展过程且在肿瘤的进展中起着重要的作用。
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外用中药对糖尿病足患者局部组织bFGF表达的影响
目的 观察外用中药治疗糖尿病足(DF)临床疗效,及对患者局部组织中成纤维细胞生长因子(bFGF)的影响.方法 中药组及西药组(各30例)均采用控制血糖、抗感染、改善血液循环等西医综合治疗措施,在此基础上中药组采用中药外用的换药方法,西药组采用西医常规换药方法.根据溃疡面情况每日换药一次或隔日换药一次,共治疗3个月后观察两组溃疡面的愈合情况及局部组织中的bFGF表达情况.结果 中药组30例的临床疗效、溃疡愈合情况和局部组织bFGF表达均高于西药组(P＜0.05,P＜0.01).结论 中药外用能够促进创面的修复;提高局部组织的抗感染能力;上调局部组织bFGF表达,临床治疗DF,可加速溃疡愈合,提高DF坏疽的治愈率,降低致残率,取得很好的疗效.
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碱性纤维母细胞生长因子与甲状腺肿瘤及Graves病关系的研究
目的 探讨碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)与甲状腺肿瘤及Graves病之间的关系.方法 应用肝素-琼脂糖层析法、SDS-PAGE电泳法、Western blot分析法和免疫组织化学方法对bFGF进行检测.结果 分子量为14 kD的bFGF与甲状腺肿瘤的发病有关,而分子量为14 kD及21 kD的bFGF与Graves病的发病有关.结论 14 kD bFGF的出现与甲状腺肿瘤细胞的bFGF基因异常表达有关,而14、21 kD bFGF的出现与Graves病的发病密切相关.甲状腺肿瘤与自身免疫性甲状腺疾病有共同的基因突变.
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脑缺血再灌流模型大鼠血脑屏障对bFGF通透的研究
目的探讨脑缺血再灌注模型大鼠血脑屏障是否对高分子量的多肽-碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)通透.方法采用大脑中动脉腔内阻塞模型,股静脉滴注125Ⅰ-bFGF,对大脑冠状冰冻切片进行放射自显影,图象分析测定光密度.结果正常对照大鼠脑冠状切片放射自显影结果显示脑轮廓影,且为全脑均匀分布;模型鼠除了显示脑轮廓影外,可见缺血病灶侧影像较健侧及正常鼠浓集.光密度测定结果显示模型鼠病灶侧与其健侧及正常鼠同侧的光密度值差异显著(t=3.54,P＜0.05;F=39.6,P＜0.05).结论125Ⅰ-bFGF经股静脉滴注后,能通过脑缺血再灌流模型大鼠血脑屏障并浓集于缺血脑区.
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全脑缺血再灌注后迟发性神经元坏死与细胞因子bFGF的相关性研究
目的探讨细胞因子bFGF在迟发性神经元坏死时表达的动态变化及对中枢神经系统起到的保护与修复作用.方法采用了HE染色、尼氏染色、透射电镜、免疫组化及RT-PCR等技术.结果常规光镜及电镜观察均显示再灌注1～7 d额叶皮层及海马有不同程度的神经元变性、坏死.免疫组化学结果及RT-PCR检测均显示皮层与海马区缺血组织bFGF在缺血再灌注后呈明显阳性表达.结论在脑缺血损伤.尤其是在发生迟发性神经元坏死时bFGF可呈现明显强于正常脑组织的表达且贯穿于缺血再灌注全过程中.bFGF在发生迟发性种经元坏死时,对中枢神经系统均有保护和修复作用.
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bFGF及其受体在脑星形细胞瘤中的表达及意义
目的检测碱性纤维母细胞生长因子(bFGF)及其受体(bFGF-R)在脑星形细胞瘤中的表达,并探讨其意义.方法应用bFGF、bFGF-R、增殖细胞核抗原(PCNA)的抗血清对26例人脑星形细胞瘤进行了免疫组织化学染色.结果 (1)在星形细胞瘤中,bFGF、bFGF-R及PCNA均有表达,高级别星形细胞瘤中bFGF、bFGF-R及PCNA的表达均高于低级别者(P<0.01).(2)bFGF分别与bFGF-R和PCNA在星形细胞瘤中的表达阳性率之间呈正相关关系,相关系数rs 分别为0.67和0.52(P<0.01).结论初步揭示了脑星形细胞瘤中bFGF的来源和表达特点,证明bFGF在肿瘤恶变过程中可能发挥重要作用.
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脑缺血再灌流后bFGF基因的表达及MK-801的影响
目的研究脑缺血再灌流后bFGF基因表达的意义及其机制.方法采用原位杂交和免疫组化的方法,观察大鼠脑缺血再灌流后bFGF基因的表达及MK-801对它们的影响.结果缺血2h再灌流1h可见bFGF表达增高(P<0.05),bFGFmRNA表达于12h达高峰,bFGF蛋白于24h达高峰;MK-801组与缺血组相比,于再灌流6h～48hbFGF表达减弱(P<0.05).结论局灶性脑缺血再灌流可诱导bFGF表达,MK-801则能抑制脑缺血后bFGF的表达.
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脑出血大鼠脑内bFGF蛋白和mRNA的表达
目的探讨脑出血大鼠脑内bFGF蛋白和mRNA表达的规律,从而为脑出血后神经功能的修复提供理论依据.方法用VII型胶原酶诱导大鼠脑出血模型、行为学计分、免疫组化及表达的光密度图像分析、Northern blot及光密度扫描.结果在行为学计分方面,脑出血大鼠在出血7d时有明显降低,免疫组化结果显示,bFGF蛋白在脑内表达广泛,主要位于海马,皮质有少量表达.吸光度扫描结果显示,脑出血大鼠脑内bFGF蛋白和mRNA的表达在3d时达到高峰,7d时逐渐减弱.结论随着脑出血大鼠脑内bFGF蛋白和mRNA表达的增强,其行为学得到改善,这可能是神经功能修复的主要机制之一.
关键词： 脑出血 大鼠 bFGF 免疫组化 Northern blot -
Survivin和bFGF基因在膀胱移行细胞癌组织中的表达及意义
目的:探讨Survivin和bFGF基因在膀胱移行上皮细胞癌(BTCC)中的表达及临床意义.方法:采用免疫组化S-P法,检测46例BTCC和10例正常膀胱组织中Survivin和bFGF基因的表达.结果:Survivin和bFGF基因在正常膀胱移行上皮细胞中不表达,两种基因在正常膀胱移行上皮细胞和BTCC中的表达之间差异有统计学意义(P<0.01);两种基因的阳性表达水平与BTCC中的病理分级、临床分期正相关(P<0.05);两种基因在BTCC中的表达水平之间正相关(P<0.01);两种蛋白在BTCC 中的表达水平与BTCC的复发率正相关(P<0.01);两种蛋白在BTCC中的表达水平与BTCC无病生存率正相关(P<0.05).结论:Survivin和bFGF异常表达在BTCC发生、发展、转移、复发等过程中起着重要作用.联合检测能更好地判断BTCC的预后和制定合理治疗方案.
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三七皂甙对冠脉支架植入术后Ps、PDGF-BB、bFGF水平的影响
目的:观察三七皂甙对冠脉支架植入术后患者血清中p-选择素(Ps)、BB型血小板源性生长因子(PDGF-BB)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)浓度的影响.方法:44例冠脉支架植入术成功的患者,随机分为西药常规治疗(对照组)22例和西药常规加路路通(三七皂甙)治疗(试验)组22例,对患者术前及术后1d、术后1个月分别采肘静脉血4ml测血清中Ps、PDGF-BB、bFGF浓度水平.结果:试验组术后1个月较术后1dPs、PDGF-BB、bFGF明显改变,具有显著性差异(P＜0 05),术后1个月试验组与对照组比较Ps、PDGF-BB、bFGF均具有显著性差异(P＜0.05).结论:三七皂甙可明显降低冠脉支架植入术后患者血清中Ps、PDGF-BB、bFGF浓度水平,减少血小板激活及促血管平滑肌细胞增生的生长因子释放,从而减轻再狭窄的发生.
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浅谈中药壁虎的抗肿瘤作用
目的:对中药壁虎的抗肿瘤作用进行分析探讨,为今后的临床研究和治疗提供可靠的参考依据.方法:抽取75只移植瘤小鼠S180肉瘤模型,将其分成壁虎高、中、低组、环磷酰组和对照组,每组15只,分别给予壁虎13.5g/kg、9.0g/kg、4.5g/kg灌胃、CTX(100mg/kg)腹腔注射、生理盐水灌胃,14天后对比分析各组小鼠的各项观察指标.结果:壁虎高、中、低组的抑瘤率分别为46.67%、53.33%、40.00%,小鼠S180肉瘤组织VEGF、bFGF表达水平均显著高于对照组(P<0.05),肉瘤细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05),但低于CTX组(P<0.05).结论:中药壁虎中含有疗效显著的抗肿瘤成分,其可以抑制VEGF、bFGF表达,促进肉瘤细胞凋亡,值得关注.
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重组牛碱性成纤维细胞生长因子国家标准品的研制
目的建立效价测定用的重组牛碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)国家标准品.方法按WHO有关要求制备标准品,分装、冻干后进行检定,以bFGF国际标准品为标准进行协作标定.结果经检测外观、无菌实验合格,水分为0.99%,于-20、4和25℃条件下放置23个月其生物活性稳定.该标准品经3家实验室协作标定,共23次测定,平均效价为6971 IU/支.实验均数的95%可信区间为6266～7753 IU/支,单次实验的95%参考值范围为3394-10965 IU/支,平均可信限率为10.995%.结论该批重组牛bFGF国家标准品各项指标均符合要求,可作为国家标准品使用,效价定为7000IU/支,批号为01/96.
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不同针刺时机促进急性脑损伤大鼠神经功能康复的动态研究
目的:研究针刺促进大鼠急性脑损伤后神经功能康复的时间效应及作用机制.方法:40只SD大鼠随机分为四组:①对照组;②损伤组;③针刺1组:脑损伤后1h进行针刺治疗;④针刺2组:脑损伤后3天进行针刺治疗.于伤前、伤后1～7d、10d、14d记录神经功能状况.结果:针刺1组行走试验、平衡试验均优于其他组(P<0.01).针刺可减轻脑损伤后组织病理变化,影响脑内bFGF的动态变化过程.结论:脑损伤早期应用针灸治疗可明显促进大鼠急性脑损伤后的神经功能康复,其作用的发挥与内源性脑保护因子有关.
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寒、热方剂对醋酸涂抹型胃溃疡寒、热证模型大鼠血清VEGF、胃组织bFGF含量的影响
目的:探讨醋酸涂抹型胃溃疡寒、热证模型的形成机制及寒、热方剂对该模型的作用机理及其方证相应的客观规律.方法:采用寒、热因素结合醋酸涂抹法建立大鼠胃溃疡寒、热证模型,采用酶联免疫法检测受试大鼠血清VEGF、胃组织bFGF的含量.结果:醋酸涂抹型胃溃疡各模型组血清VEGF、胃组织bFGF含量均显著升高,与空白组比较有显著性差异(P <0.05或P<0.01),在VEGF上尤以热因素表达明显,与寒醋和模醋比较差异显著(P<0.05);大黄黄连泻心汤、理中丸可分别显著升高热证组、寒证组VEGF,bFGF含量(P <0.05或P<0.01).结论:通过"方证相应"理论验证了"病证结合"胃溃疡寒、热证模型的可行性,大黄黄连泻心汤对热性胃溃疡、理中丸对寒性胃溃疡的治疗作用,可通过大鼠血清VEGF、胃组织bFGF含量的升高而实现.
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自拟冠通复脉方对气虚血瘀型不稳定型心绞痛介入术后VEGF和bFGF表达的影响
目的:探讨自拟冠通复脉方对气虚血瘀型不稳定型心绞痛介入术后VEGF和bFGF表达的影响.方法:选择符合纳入标准的82例气虚血瘀型不稳定型心绞痛介入术后患者为研究对象,按照随机数字表法分为对照组(41例)和观察组(41例),对照组给予西医常规治疗,观察组给予自拟冠通复脉方口服治疗,2周后观察两组患者的临床疗效、心率变异性和安全性,胸闷、心悸气短、神疲、形寒肢冷、面色苍白等中医证候积分,采用Elisa法检测血清血管内皮生长因子(VEGF)和碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)水平.结果:观察组患者的有效率92.68％,明显高于对照组75.61％,差异具有统计学意义(x2 =4.479,P=0.034).观察组患者的胸闷、心悸气短、神疲、形寒肢冷、面色苍白中医证候积分均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).观察组患者的心率变异性参数SDNN、SDANN和PNN50显著高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).观察组患者的VEGF和bFGF表达水平显著高于对照组,差异具有统计学意义(P＜0.05).两组患者的肝肾功能指标AST、ALT、BUN、Ccr比较,差异无统计学意义(P＞0.05).结论:自拟冠通复脉方治疗气虚血瘀型不稳定型心绞痛介入术后临床疗效较好,可降低中医证候积分,改善心率变异指标,提高VEGF和bFGF表达水平,且安全性较好,值得临床推广应用.
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灵芪胶囊对H22荷瘤小鼠bFGF蛋白表达的影响
目的:研究灵芪胶囊对肿瘤的抑制作用.方法:以S-P免疫组化方法检测荷瘤小鼠肿瘤组织内血管生成因子bFGF的表达情况的变化,研究灵芪胶囊对肿瘤血管生成的影响.结果:灵芪胶囊能够下调血管生长因子bFGF的表达从而达到抑制肿瘤血管生成的作用.结论:灵芪胶囊能够通过影响血管生成相关因子的表达,抑制肿瘤血管生成,并推断为抗肿瘤作用的基础之一.
