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T细胞免疫球蛋白黏液素3基因在急性白血病中的表达及其临床意义
目的 探讨T细胞免疫球蛋白黏液素3(Tim-3)基因在急性白血病患者和白血病细胞株中的表达情况,并分析其临床意义.方法 收集初治急性白血病患者65例和8株白血病细胞株,同时收集15名健康供体的骨髓作为健康对照,分离单个核细胞,提取DNA,应用实时荧光定量聚合酶链反应检测单个核细胞上Tim-3 mRNA相对表达量,比较不同类型白血病Tim-3 mRNA表达差异,分析急性白血病患者Tim-3 mRNA表达与临床特征的关系.结果 M3细胞株NB4及非M3细胞株Kasumi-1、HL60、SHI-1、THP-1、Jurkat、CCRF-CEM、Mutz-1 Tim-3 mRNA相对表达量分别为(4.51±0.62)×10-5、(79.22±2.91)×10-5、(41.14±3.01)×10-5、(27.70±3.50)×10-5、(60.47±4.97)×10-5、(10.44±1.77)×10-5、(42.80±2.95)×10-5、(11.68±1.96)×10-5.非M3细胞株Tim-3 mRNA表达水平均高于NB4细胞株(均P＜0.05).非M3型急性髓系白血病(AML)患者Tim-3 mRNA相对表达量为(27.64±13.35)×10-4,AML-M3患者为(4.81±2.30)×10-4,急性淋巴细胞白血病(ALL)为(32.09±23.42)×10-4.其在非M3型AML和ALL中的表达水平高于健康对照[(12.02±4.22)×10-4],差异有统计学意义(P＜0.05),非M3型AML和ALL患者的Tim-3 mRNA表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).在非M3型AML中,根据法、美、英协作组(FAB)分型,Tim-3 mRNA在AML-M4中的表达水平高于其他类型AML(P＜0.05).不同性别、年龄、骨髓原始细胞数、初诊白细胞数的急性白血病患者间Tim-3 mRNA表达水平差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 Tim-3 mRNA高表达于非M3型的急性白血病患者和细胞株,其表达水平与初治急性白血病患者的性别、年龄和原始细胞数无关.
关键词： T细胞免疫球蛋白黏液素3 白血病 急性 实时定量聚合酶链反应 临床特征 -
实时荧光定量聚合酶链反应动态监测慢性粒细胞白血病治疗后微小残留病的研究
目的 建立慢性粒细胞白血病(CML)实时荧光定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测方法,并研究应用此方法检测CML治疗后微小残留病(MRD)的意义.方法 应用RQ-PCR对80例CML患者初诊时和(或)治疗后的骨髓标本进行分析,检测bcr-abl融合基因的转录水平,回顾性分析临床资料,根据治疗方案不同分为异基因造血干细胞移植组(34例)、甲磺酸伊马替尼组(33例)、羟基脲组(13例),监测 CML患者治疗前后bcr-abl融合基因变化.结果 初诊CML患者bcr-abl阳性平均值为6847.67拷贝/万个细胞,加速期平均值为306 176.08拷贝/万个细胞；异基因造血干细胞移植组移植后1个月平均值为944.33拷贝/万个细胞,移植后6个月平均值2.37拷贝/万个细胞,移植后12个月平均值0.29拷贝/万个细胞,移植后24个月检测不到bcr-abl融合基因；甲磺酸伊马替尼组服用3个月后平均值3720.23拷贝/万个细胞,服用12个月＜0.10拷贝/万个细胞；羟基脲组用药0个月平均值7290.11拷贝/万个细胞,服用9个月后平均值3143.24拷贝/万个细胞.异基因造血干细胞移植组、甲磺酸伊马替尼组相同时间bcr-abl水平差异无统计学意义(t=1.74,P=0.17),羟基脲组与前两组间比较差异有统计学意义(t=3.74,P=0.01；t=2.97,P=0.02).疾病进展时可检测到bcr-abl转录水平的上升；加速期患者的转录本水平明显高于慢性期患者.结论 RQ-PCR作为CML治疗后MRD检测的方法,可以评价治疗效果,预测疾病复发,指导早期进行干预治疗.
关键词： 白血病 髓样 慢性 微小残留病 实时定量聚合酶链反应 -
bcr-abl mRNA检测在慢性粒细胞白血病诊治中的意义
目的 探讨bcr-abl mRNA在慢性粒细胞白血病(CML)诊断、治疗及微小残留病变监测中的意义.方法 采用实时定量聚合酶链反应(real-time PCR)方法检测324例CML患者518份标本的bcr-abl mRNA表达情况.结果 CML慢性期、加速期和急变期患者的bcr-abl mRNA定量结果逐渐增高,分别为12.6%、25.4%和57.2%(P<0.05).异基因造血干细胞移植后的bcr-abl mRNA定量结果随时间延长逐渐降低,一般在移植6个月后转阴,服用伊马替尼(商品名:格列卫)与异基因造血干细胞移植病程相似,但融合基因转阴所用时间较长.结论 real-time PCR检测bcr-abl mRNA对于诊断、评价疗效、监测微小残留病变以及预测疾病进展具有重要的临床应用价值.
关键词： 白血病 髓样 慢性 实时定量聚合酶链反应 bcr-abl mRNA -
实时荧光PCR检测EGFR基因在新疆卡波氏肉瘤中的表达
目的 检测EGFR基因在新疆卡波氏肉瘤(Kaposi's Sarcoma,KS)中的表达并分析其与KS发生发展的关系.方法 应用SYBR Green I作为荧光染料,以GAPDH作内参照,建立检测EGFR mRNA表达的实时荧光PCR反应体系,对经病理活检证实的7例KS肿瘤组织和瘤旁正常组织中EGFRmRNA的表达水平进行检测.结果 KS肿瘤组织中EGFR表达水平低于瘤旁正常组织(t=3.865,P<0.05),并且结果有统计学意义.KS肿瘤组织中EGFR的相对表达量为0.34±0.31,瘤旁组织中为1.24±0.78(P=0.008).结论 所建立的SYBR Green I实时定量PCR方法可以成功地检测EGFR基因的表达量.KS肿瘤组织中EGFR表达水平低于瘤旁正常组织,差异有统计学意义.
关键词： 卡波氏肉瘤 人类8型疱疹病毒 表皮生长因子受体 实时定量聚合酶链反应
