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线纹香茶菜挥发油化学成分的GC-MS分析
线纹香茶菜Rabclosia lophanthoides(Buch.-Ham.)ex D.Don.Hara为唇形科香茶菜属植物,广泛分布于云南,四川,贵州,广西,广东等地.全草苦寒,具有清热利湿,凉血散瘀,驱虫等功效.用治急性黄疸型肝炎,急性胆囊炎,咽喉炎,妇科病等,尚可解草乌中毒[1].
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《中国药典》2010年版成方制剂中溪黄草基原的探讨
溪黄草为民间习用草药(俗称熊胆草、黄汁草、手擦黄等),主产于长江以南的江西、广东、广西、福建等省区,因喜生山谷溪旁潮湿处,新鲜叶片揉搓有棕黄色液汁而得名.<中国药典>2010年版附录Ⅲ[1]中首次收载溪黄草,来源为唇形科植物线纹香茶菜Isodon striatus(Benth.) Kudo或溪黄草Isodon sorra(Maxim.)Kudo(sorra疑为serra之误)的干燥地上部分.
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RP-HPLC法同时测定线纹香茶菜不同生长部位中三萜酸成分
目的 建立反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定线纹香茶菜全草、根、茎和叶中坡模酸、山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸和熊果酸5种三萜酸的含有量.方法 线纹香茶菜95％乙醇提取液的分析在Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm)上进行,流动相为甲醇-2.0％乙酸水溶液(88∶12,V/V),体积流量1.0 mL/min,检测波长210 nm,柱温25℃.结果 坡模酸、山楂酸、科罗索酸、齐墩果酸和熊果酸进样量分别在0.552～41.4 mg/L(r=0.999 5),0.540～ 40.5 mg/L(r=0.999 6),0.824 ～ 61.8 mg/L(r=0.999 9),2.444 ～ 183.3 mg/L(r=0.999 7)和3.172 ～ 237.9 mg/L(r=0.999 7)范围内线性关系良好,加样回收率分别为98.1％、98.0％、96.3％、99.7％、99.0％.RSD (n=6)均小于2.2％.结论 线纹香茶菜样品不同部位中,5种三萜酸类成分含有量高低依次为叶＞全草＞茎＞根.
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溪黄草考证及性状鉴别法的验证
目的 对溪黄草进行考证,并对药材溪黄草及植物溪黄草的性状鉴别法进行验证.方法 对药材溪黄草及植物溪黄草两种植物的新鲜及干燥枝叶的性状鉴定方法进行验证.结果 药材溪黄草原植物线纹香茶菜Isodon striatus(Benth.) Kudo及变种纤花香茶菜Isodon Iophanthoides var.graciliflora(Benth.) Hara与植物溪黄草Isodon serra(Maxim.)Kudo有显著差别,前二者具有传统溪黄草黄汁及红腺点特征,而后者无黄汁及无红腺点,容易鉴别.结论 药材溪黄草和植物溪黄草采用此性状鉴定方法很容易鉴别出来,植物溪黄草是否可作为药材溪黄草使用值得商榷.此法简单直观,经济易行,有一定的使用价值.
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溪黄草药材的基原考证
溪黄草俗称熊胆草、血风草、黄汁草、香茶菜、手擦黄等,主产于长江以南的湖南、湖北、四川、云南、江西、广东、广西、福建等省区.因喜生山谷溪旁潮湿处,新鲜叶片揉搓有棕黄色液汁而得名[1-3].其在广东临床应用普遍,并开发出多种以之为原料的保健品及中成药,如消炎利胆片、复方胆通等.由于Isodon serra植物的中文名溪黄草与线纹香茶菜的药用名溪黄草相同,在某些地方亦作溪黄草使用,是溪黄草药材的混淆品[1-3];故需正本清源,以保障溪黄草药材及其制剂的安全与疗效.
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秋水仙碱对线纹香茶菜生长及有效成分含量的影响
目的 研究不同浓度的秋水仙碱溶液对线纹香茶菜植株性状、生物产量及有效成分含量的影响.方法 分别用0.05％,0.1％,0.2％的秋水仙碱溶液对线纹香茶菜植株处理5天和8天,停药后让其自然生长,一个月后测量植株的高度和重量,叶形指数,以及有效成分迷迭香酸的含量.结果 0.1％秋水仙碱处理8天和5天,是线纹香荼菜的株高、株重、叶形指数大的试验组;而0.05％秋水仙碱处理8天和0.1％秋水仙碱处理5天的线纹香茶菜中迷迭香酸的含量高.结论 低浓度的秋水仙碱溶液处理能提高线纹香荼菜的株高、株重和叶形指数,而有效成分含量则与秋水仙碱作用的浓度和作用时间有关.
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应用RAPD技术对溪黄草基原植物分类鉴定
目的:用分子标记技术对中药溪黄草的基原植物分类鉴定.方法:用离心柱法提取5种溪黄草基原植物基因组DNA,用85个10 bp的寡核苷酸随机引物进行PCR(聚合酶链式反应),将扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳,分析电泳图谱.结果:从85条随机引物中筛选出了12条多态性较好的引物,其中7个引物的扩增图谱表现较好的多态性,且重复性较好.结论:RAPD技术可以成功鉴定溪黄草药材基原.
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线纹香茶菜和溪黄草的鉴别
目的 通过对线纹香茶菜和溪黄草做性状、显微和薄层等方面的鉴别,以将两者区别开来.方法 采用入薄层色谱法进行鉴别.结果 取石油醚提液,以苯–乙酸乙酯(19:1)为展开剂,于硅胶G板上展开,在日光下检视线纹香茶菜有2个黄色斑点,而溪黄草无斑点.用乙酸乙酯萃取,以三氯甲烷–丁酮–甲醇–甲酸为展开剂,于硅胶G板上展开,晾干,喷以2%三氯化铁乙醇溶液,两者主斑点无明显区别.结论 无论是性状、显微,还是薄层色谱法,都能有效地鉴别线纹香茶菜和溪黄草.
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溪黄草和线纹香茶菜的ISSR反应体系的建立与优化
目的 构建溪黄草与线纹香茶菜的简单重复序列区间(inter-simple sequence repeat,ISSR)反应体系,为溪黄草药材种质资源的遗传多样性分析奠定基础.方法 通过设定溪黄草ISSR-PCR的各反应因子的不同梯度,对反应条件进行优化,建立适合溪黄草与线纹香茶菜的ISSR反应体系;以溪黄草DNA为模板,用该体系对100条引物进行初筛,用线纹香茶菜进行复筛,并用23个溪黄草、16个线纹香茶菜单株样品验证体系稳定性.结果 建立了溪黄草和线绞香茶菜ISSR佳反应体系(25 μL):2×Taq Master Mix 12.5 μL(Mg2+浓度4mmol·L-1,dNTP浓度0.4 mmol·L-1)、引物0.6 μmol·L-1、模板DNA 10 ng.结论 建立的溪黄草和线纹香茶菜的ISSR反应体系稳定可靠、标记位点清晰、检测多态性能力强,可较好地应用于溪黄草与线纹香茶菜的ISSR遗传多样性分析的研究.
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线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷的含量动态变化研究
目的：建立同时测定线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷含量的方法，以确定线纹香茶菜的佳采摘期。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱为Diamonsil C18，流动相为甲醇-0.1％磷酸溶液（梯度洗脱），流速为0.8 ml/min，检测波长为334 nm，柱温为25℃，进样量为15μl。结果：咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷检测的质量浓度线性范围分别为0.23～5.68、0.31～7.76、0.45～11.30μg/ml（r＝0.9999、0.9998、0.9999）；精密度、稳定性、重复性试验的RSD＜2.0％；加样回收率分别为95.1％～98.9％、97.4％～101.3％、95.5％～98.8％，RSD分别为1.8％、1.7％、1.4％（n＝6）。采收于每年4－5月、7－8月的线纹香茶菜中上述3种成分含量高。结论：该方法简便、准确、重复性好，可用于同时测定线纹香茶菜中咖啡酸、新西兰牡荆苷2、异夏佛塔苷的含量；线纹香茶菜的佳采摘期为每年4－5月、7－8月。
