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BID蛋白促细胞凋亡增殖失衡作用与IgA肾病患者病情的关系
目的 探讨IgA肾病(IgAN)不同病变程度肾组织中BID蛋白的表达与细胞凋亡、增殖的关系.方法 免疫组化法检测肾组织PCNA、BID蛋白和FN,用原位末端标记法(TUNEL)结合光镜形态学检测细胞凋亡情况.结果 随IgAN病变程度加莺,BID蛋白、PCNA、凋亡细胞及FN表达逐渐增强(P<0.05),Ⅳ级强(PCNA:Ⅲ、Ⅳ相当);肾小球内BID蛋白与凋亡细胞比值、PCNA、FN表达,肾小球硬化率及尿蛋白排泄量正相关,与eGFR负相关(P<0.01).结论 BID蛋白可通过促进细胞凋亡增殖失平衡促进IgAN病程进展,可能为判断预后的一项重要病理指标.
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Bid 蛋白在骨关节病关节软骨细胞中的表达及意义
目的 研究促凋亡蛋白Bid在正常关节软骨细胞和骨关节病时关节软骨细胞中的表达,探索Bid蛋白在骨关节病发病中的作用.方法 取20例髋关节骨关节病行关节置换的关节软骨标本和10例正常关节软骨标本,应用免疫组织化学方法检测Bid蛋白在软骨细胞中的表达.结果 Bid蛋白表达阳性率在骨关节病关节软骨细胞中较正常关节软骨细胞高,两者有显著性差异.结论 Bid蛋白可能通过参与调控关节软骨细胞凋亡,在骨关节病发病中起作用.
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Bid蛋白在瘢痕疙瘩中的高表达及其意义
目的 检测促凋亡分子Bid蛋白在瘢痕疙瘩中的表达,研究其与瘢痕疙瘩发生的关系. 方法 用免疫组织化学法和免疫印迹法(western blotting)分别检测12例瘢痕疙瘩与12例正常皮肤组织中Bid蛋白的表达,定量分析Bid蛋白在瘢痕疙瘩中的表达. 结果①Bid蛋白在瘢痕疙瘩和正常皮肤组织的角质细胞、成纤维细胞、炎症细胞以及血管内皮细胞、毛囊、汗腺、皮脂腺等细胞的胞质及部分胞核中表达.②表皮中Bid蛋白表达量两种组织差异无显著性(P＞0.05);凋亡启动的细胞数量正常皮肤(1738.33±348.89/mm2)高于瘢痕疙瘩(891.67±395.00/mm2)(t＝-5.565,P=0.000).在真皮中的Bid蛋白阳性成纤维细胞数,瘢痕疙瘩(911.67±323.61/mm2)高于正常皮肤(220.00±80.00/mm2)(t=7.188,P=0.000).免疫印迹法实验结果进一步证实Bid蛋白含量瘢痕疙瘩(0.46±0.08)高于正常皮肤(0.02±0.01)(t=18.905,P=0.000).结论①正常皮肤表皮凋亡启动的细胞多于瘢痕疙瘩;②Bid蛋白在瘢痕疙瘩真皮组织中表达增高.
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Bid蛋白在内质网和线粒体相关的凋亡过程中的作用
目的 研究Bid蛋白在内质网和线粒体相关的凋亡过程中的作用.方法 以高三尖杉酯碱(HHT)诱导人骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系MUTZ-1细胞凋亡,用流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR及Western blot法检测线粒体和内质网凋亡途径的相关基因及蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察用药前后钙离子浓度和线粒体膜电位的改变以及凋亡相关蛋白Bid的转位.结果 0.05μg/ml HHT作用后4 h胞质内Ca2+浓度增高,12 h达高峰,其后开始下降.HHT作用后线粒体膜电位持续下降.内质网应激相关因子基因及蛋白表达增强,12 h达到高峰,其后开始下降.激光共聚焦显微镜观察发现Bid蛋白用药前位于内质网,用药12 h后转位至线粒体.结论 HHT可以诱导MDS细胞凋亡,内质网和线粒体相关的凋亡途径在其中发挥了重要的作用,Bid蛋白可能是两种凋亡途径的交叉点.
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HL-60及其耐药细胞之间线粒体膜及线粒体中Bid差异研究
目的研究线粒体膜及线粒体中Bid参与肿瘤耐药的机制.方法采用紫外分光光度仪和流式细胞仪检测Ca2+诱导下HL-60及其耐药细胞HL-60/E6线粒体膜通透改变孔道开放和线粒体膜电位的变化,Western blot检测线粒体中Bid表达.结果Ca2+诱导下HL-60/E6细胞线粒体膜电位下降幅度和膜通透改变孔道开放程度明显低于HL-60细胞.药物AMD作用后线粒体中Bid表达呈时间依赖性,而且在不同时间,HL-60/E6细胞线粒体中Bid表达均明显低于HL-60细胞.结论HL-60/E6细胞耐药与Ca2+诱导下线粒体膜电位下降幅度及膜通透改变孔道开放程度的降低有关,还与线粒体上Bid表达降低有关.
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利用FRET技术实时检测Bid蛋白在TNF-α诱导PC12细胞凋亡过程中的作用
目的 在活细胞中实时检测TNF-α诱导PC12细胞凋亡过程中Bid蛋白的作用并探讨PC12细胞凋亡的信号通路.方法 利用基于荧光共振能量转移(fluorescence resonance energy transfer,FRET)原理设计的荧光探针pFRET-Bid( YFP-Bid-CFP)转染PC12细胞后,在激光共聚焦显微镜下实时检测Bid蛋白的切割情况,并采用专用软件进行数据分析.结果 TNF-α诱导细胞凋亡的过程中,在短时间内(3 h)就凋亡的细胞中观测不到bid的切割,而在8h后凋亡的细胞中却观测到了hid的切割.结论 通过分析实验结果推测不同时间凋亡的细胞经过的信号通路是不同的,一个是不通过线粒体的较快途径,一个是需要通过线粒体的较慢途径.
