首页 > 文献资料
-
细胞外基质蛋白SRPX2促进HUVECs血管生成能力
目的：评价细胞外基质蛋白含sushi重复蛋白X连锁2（SRPX2）对人脐静脉内皮细胞（HUVECs）血管生成能力的影响。方法分别用重组pcDNA3．1－SRPX2及空载质粒转染HEK293T细胞后收集条件培养基，培养HUVECs，实验分转染组、阴性对照组和空白对照组。 CCK－8试剂盒检测细胞增殖；Transwell迁移实验和划痕实验观察细胞的迁移能力；Matrigel基质胶体外管腔形成实验观察HUVECs管腔形成能力。结果3组间细胞增殖能力无明显差异。转染组管腔样结构分支点数为（97±4）个／视野，明显多于阴性对照组（57±3）和空白对照组（54±3）个／视野（P＜0．05）。转染组划痕6和12 h细胞迁移距离均明显大于阴性对照组和空白对照组，分别为（90±6）、（37±7）和（36±4）μm，（135±5）、（65±8）和（63±4）μm（P＜0．05）。 Transwell迁移实验中，转染组16 h迁移过膜细胞数为（549±10）个／视野，明显高于阴性对照组（334±11）和空白对照组（329±12）个／视野（P＜0．05）。结论 SRPX2可通过促进HUVECs的迁移及在Matrigel表面的管腔形成能力，增强其血管生成能力。
-
SRPX2通过巨噬细胞促进人脐静脉内皮细胞血管生成能力的作用
目的:探究含sushi重复蛋白X连锁2蛋白(sushi repeat-containing protein X-linked 2,SR-PX2)是否可通过巨噬细胞对血管生成产生影响及其可能的机制.方法:用shRNA-SRPX2及shRNA空载体转染HCT116细胞,并收集以上两种细胞和空白HCT116的细胞培养基作条件培养基,用3种条件培养基作用于人源单核细胞(THP-1)诱导的巨噬细胞,而后巨噬细胞与人脐静脉内皮细胞(HUVEC)共培养,并以Transwell迁移实验检测HUVEC迁移能力,以Matrigel基质胶管腔形成实验检测管腔形成能力.用Western blot检测巨噬细胞中局部黏着斑激酶(FAK)的表达水平.结果:在Transwell迁移实验中,HCT116敲降SRPX2基因的条件培养基与巨噬细胞作用,并与HUVEC共培养后,HUVEC迁移细胞数明显减少(P<0.01).而在Matrigel管腔形成实验中,HCT116敲降组形成的管腔的交叉点数、成网数、节点数也有所减少(P<0.05).FAK蛋白检测发现,SRPX2重组蛋白作用后的巨噬细胞总FAK表达量和FAK蛋白磷酸化水平有所增高.结论:SRPX2可能通过FAK相关通路影响巨噬细胞,进而间接影响血管内皮细胞的血管生成能力.
-
细胞外基质蛋白SRPX2对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响
目的 检测细胞外基质(ECM)SRPX2蛋白在结肠癌组织中的表达,观察上调SRPX2表达对结肠癌SW480细胞的影响.方法 采用免疫组织化学方法在结肠癌组织芯片中检测SRPX2的表达;采用pCDNA 3.1-SRPX2质粒转染SW480细胞,应用噻唑蓝(MTT)法检测24、48、72 hSW480细胞的增殖能力,Transwell侵袭和迁移实验检测转染后SW480细胞的侵袭、迁移能力.结果 免疫组织化学检测结果示SRPX2在结肠癌中表达较癌旁组织明显增强(P＜0.01);MTT检测示48 h及72 h SRPX2转染组细胞增殖水平明显增加(P＜0.05);Transwell法检测,SRPX2转染组结肠癌细胞迁移及侵袭能力明显增强(P＜0.01).结论 SRPX2在结肠癌组织中表达增强,并可增强结肠癌细胞的增殖、侵袭及迁移能力,可能起到促癌作用.
