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心肌细胞自噬对心力衰竭大鼠心功能的影响
目的 观察心力衰竭时自噬相关蛋白的表达以及抑制自噬对心力衰竭的影响,探讨自噬在心力衰竭发病过程中的作用.方法 实验分为对照组(control)、心力衰竭组(HF)和3甲基腺嘌呤(3MA)组.心力衰竭组采用腹主动脉缩窄术制备大鼠心力衰竭动物模型.3MA组给予心力衰竭大鼠自噬特异性抑制剂3MA 15 mg/kg,连续两周.采用心导管术检测大鼠左室舒张末压(LVEDP)、左室等容收缩期压力上升大速率+dp/dtmax、左室等容舒张期压力下降的大速率-dp/dtmax.用Western blot法检测心肌组织自噬相关蛋白beclin-1、cathepsin D的表达.结果 1)心力衰竭组LVEDP较对照组显著增加(P＜0.05),±dp/dtmax较对照组显著降低(P＜0.05).使用3MA组LVEDP较心力衰竭组显著降低(P＜0.01),±dp/dtmax较心力衰竭组显著增加(P＜0.01,P＜0.05).2)心力衰竭组心肌组织自噬相关蛋白beclin-1和cathepsin D表达较对照组显著增加(P＜0.05),而3MA组beclin-1、cathepsin D 的表达较心力衰竭组显著减少(P＜0.05).结论 心肌细胞自噬在心力衰竭发病过程中发挥着致病作用.
关键词： 自噬 心力衰竭 3甲基腺嘌呤 Beclin-1 cathepsin D -
E-cadherin和Cathepsin D的表达与乳腺癌侵袭和转移的关系
目的观察E-cadherin和Cathepsin D在乳腺导管癌组织中的表达,分析其与肿瘤侵袭、腋下淋巴结转移的关系.方法应用单克隆抗体的SABC免疫组织化学方法,观察79例乳腺导管癌组织标本中E-cadherin和CathepsinD的表达.结果E-cadherin在乳腺导管内癌与浸润性导管癌两组间及有无腋下淋巴结转移两组间均无显著差异(P＞0.05).Cathepsin D在癌间质的表达,导管内癌与浸润性导管癌两组间、腋下淋巴结有无转移两组间差异均显著(P＜0.01,P＜0.05);在癌细胞的表达,上述两组间均差异不显著(P＞0.05).结论Cathepsin D在乳腺导管癌间质中的表达与肿瘤的侵袭和淋巴结转移密切相关,可作为临床判定肿瘤恶性程度的参考指标.E-cadherin和Cathepsin D在乳腺导管癌癌细胞中的表达与肿瘤的侵袭和淋巴结转移均无密切相关性.
关键词： E-cadherin cathepsin D 乳腺癌 侵袭与转移 免疫组织化学 -
原发性非小细胞肺癌组织中Cathepsin D、PCNA的表达及其临床意义
目的 检测组织蛋白酶-D(Cathepsin D)和细胞核增殖抗原(PCNA)在原发性非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达,探讨二者在原发性NSCLC发生、发展中的作用及临床意义.方法 采用免疫组化EnVision二步法检测86例原发性NSCLC和25例癌旁正常肺组织中Cathepsin D、PCNA的表达.结果 Cathepsin D在原发性NSCLC组织中的阳性率显著高于正常肺组织(P =0.002),有淋巴结转移组Cathepsin D的表达显著高于无淋巴结转移组(P=0.001);PCNA在原发性NSCLC组织中的阳性率显著高于癌旁正常肺组织(P ＜0.001),PCNA的高表达与原发性NSCLC的肿瘤临床分期、淋巴结是否转移有关(P =0.031;P=0.033),与组织学分化程度明显有关(P ＜0.001).Cathepsin D和PCNA在原发性NSCLC组织中的阳性表达呈正相关(P=0.000,r=0.547).结论 Cathepsin D和PCNA在NSCLC组织中表达上调,可作为NSCLC研究的重要指标,并对其预后判断有重要意义.
关键词： NSCLC cathepsin D PCNA 免疫组化 -
Bcl-xL可能介导组织蛋白酶D相关的K562细胞凋亡
组织蛋白酶(cathepsin)D在氨基葡萄糖硫酸盐(glucosamine sulfate,GS)诱导的慢性髓系白血病K562细胞凋亡过程中为激活线粒体途径的可能的中介分子.为了探讨Bcl-xL在氨基葡萄糖硫酸盐诱导慢性髓系白血病K562细胞凋亡中的可能作用,在倒置显微镜下动态观察细胞生长变化,采用瑞氏-姬姆萨染色观察细胞加药前后的形态学改变,间接免疫荧光法观察GS诱导K562细胞凋亡过程中cathepsin D和细胞色素(cytochrome)C的转位情况,Western blot检测K562细胞凋亡过程中Bcl-xL、Bax、Bid蛋白的表达变化.结果表明:5 mmol/L氨基葡萄糖硫酸盐作用于K562细胞72小时后,细胞增殖受到明显抑制,胞浆出现空泡化;荧光显微镜显示cathepsinD和cytochrome C的荧光信号由颗粒状趋向弥散;Bcl-xL蛋白在GS加药组中表达减低,甚至消失,但在抑胃酶肽(pepstat1n)A预处理后的加药组中表达没有明显改变,Bax和Bid蛋白表达在凋亡前后没有明显变化.结论:Bcl-xL蛋白在GS诱导白血病K562细胞凋亡过程中可能介导cathepsin D与线粒体途径之间的联系.
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结直肠癌肝转移患者尿蛋白Cathepsin D的检测和意义
目的:本文旨在寻找一种更经济的方式来监测结直肠癌肝转移,我们尝试使用硝酸纤维素膜富集结直肠癌肝转移患者和结直肠癌患者尿蛋白,并在尿蛋白中检测Cathepsin D是否可以作为结直肠癌肝转移尿蛋白标志分子.方法:收集结直肠癌肝转移患者及结直肠癌患者随机中段尿,经抽滤法将尿蛋白富集在硝酸纤维素膜上.用蛋白免疫印迹方法检测硝酸纤维素膜上洗脱下来的尿蛋白中的Cathepsin D含量,并通过尿肌酐校正尿蛋白中的Cathepsin D含量.结果:硝酸纤维素膜可以富集到质量较好的尿蛋白,并可用于后续研究.与健康对照和结直肠癌患者相比,Cathepsin D在结直肠癌肝转移患者尿蛋白中表达升高.经尿肌酐校正后,结直肠癌肝转移患者样本中CathepsinD含量显著高于健康对照和结直肠癌患者样本(P＜0.01).结论:硝酸纤维素膜富集法可以快速富集到高质量的尿蛋白.经尿肌酐校正后,结直肠癌肝转移患者尿蛋白中Cathepsin D含量显著高于健康个体和结直肠癌患者,提示Cathepsin D可能是潜在的结直肠癌肝转移标志物.
关键词： 结直肠癌肝转移 尿液标志物 cathepsin D -
甾体激素与乳腺癌细胞外基质蛋白酶
乳腺癌为甾体激素依赖性肿瘤,内分泌治疗是临床有效的辅助治疗手段之一,而乳腺癌的预后与复发及转移密切相关,细胞外基质蛋白酶降解细胞外基质是乳腺癌复发与转移的关键.研究甾体激素对乳腺癌细胞外基质蛋白酶的调节有利于更好的指导临床治疗和判断预后.
关键词： 乳腺肿瘤 甾体激素MMPs PAS cathepsin D -
去铁敏干预蛛网膜下腔出血后溶酶体组织蛋白酶表达研究
目的:探讨大鼠蛛网膜下腔出血(SAH,Subarachnoid Hemorrhage)早期脑损伤中溶酶体组织蛋白酶B(CathepsinB)、溶酶体组织蛋白酶D(Cathepsin D)的表达变化及去铁敏(DFO)对其的影响.方法:将24只SD大鼠随机分为四组:正常对照组(6只),SAH模型组(6只),安慰剂组(6只),DFO药物组(6只),视交叉前池注血法(APC)制作大鼠SAH模型,免疫组化分别检测CathepsinD、CathepsinB的蛋白表达,干湿法测定48 h脑含水量.结果:与正常组比较,SAH模型组大鼠48 h后CathepsinD、Cathepsin B的蛋白表达明显增强,水肿指数增高,DFO药物组大鼠48h后Cathepsin D、Cathepsin B的蛋白表达较SAH组明显减低,水肿指数减低.结论:Cathepsin D、Cathepsin B在大鼠蛛网膜下腔出血后表达增强,DFO能减少其表达并对早期脑损伤有保护作用,溶酶体可能参与了蛛网膜下腔出血早期脑损伤的过程,稳定溶酶体膜,减少Cathepsin B/D的释放可能为SAH后早期脑损伤提供新的治疗途径.
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氨基葡萄糖硫酸盐诱导凋亡中Cathepsin D与Bcl-xL的细胞内共定位研究
目的:探讨氨基葡萄糖硫酸盐(Glucosamine Sulfate,GS)诱导K562细胞凋亡中溶酶体Cathepsin D释放后与Bcl-xL的细胞内共定位关系.方法:采用5.0 mmol.L-1 GS诱导K562细胞凋亡,通过HE染色和流式细胞仪检测细胞凋亡,应用免疫荧光染色结合激光共聚焦显微镜观察5.0 mmol.L-1 GS诱导凋亡前后Cathepsin D与Bcl-xL的细胞内共定位关系.结果:GS诱导K562细胞72小时后出现细胞凋亡的形态改变,流式细胞仪检测表明细胞出现凋亡,诱导凋亡后的Cathepsin D与Bcl-xL的细胞内共定位信号增强.结论:GS诱导K562细胞凋亡后Cathepsin D与Bcl-xL存在细胞内共定位关系,具备一定相互作用的空间基础.
关键词： 氨基葡萄糖硫酸盐 凋亡 cathepsin D Bcl-xl 共定位 -
Cathepsin D在胃癌组织中的表达及其临床意义
目的探讨Cathepsin D在早、中晚期胃癌中的表达及其临床意义.方法应用免疫组织化学(ABC法)对70例胃癌标本进行Cathepsin D蛋白的检测.结果早期胃癌Cathepsin D表达率为60%(12/20),中晚期无淋巴结转移胃癌为65%(13/20),中晚期有淋巴结转移胃癌为86.67%(26/30),后两者在表达率上有显著性差异(P＜0.05).结论Cathepsin D的表达水平可作为胃癌预后的判断指标之一.
关键词： 胃癌 cathepsin D 免疫组织化学 -
溶酶体水解酶Cathepsin D的细胞生物学功能
Cathepsin是一类广泛存在于真核细胞中的蛋白酶类,目前已经发现的Cathepsin家族成员有近20种.大部分的Cathepsin家族成员定位于溶酶体类酸性囊泡,同时依赖酸性pH环境发挥酶催化活性.该家族成员根据酶活性中心的不同氨基酸残基以及催化底物差异,可以分为:(1)半胱氨酸组织蛋白酶,包括Cathepsin B,Cathepsin C,Cathepsin H,Cathepsin F,Cathepsin K,Cathepsin L,Cathepsin O,Cathepsin S,Cathepsin V,Cathepsin X,Cathepsin W;(2)天冬氨酸组织蛋白酶,包括Cathepsin D,Cathepsin E;(3)丝氨酸组织蛋白酶,包括Cathepsin A,Cathepsin G.其中,Cathepsin D属于天冬氨酸蛋白酶的胃蛋白酶家族,占溶酶体内蛋白酶的11％,占全脑酸性蛋白酶的90％,是Cathepsin家族中重要一员[1-2].由于Cathepsin D能够在多种生理或病理过程中发挥重要作用,近年来日益受到关注.
关键词： cathepsin D 细胞生物学 述评 -
非小细胞肺癌组织中caveolin-1和cathepsin D的表达及其与MVD的相关性
目的 探讨caveolin-1和cathepsin D蛋白在非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)中的表达及其与微血管密度(microvessel density,MVD)及临床病理特征之间的关系.方法 用免疫组织化学法检测caveolin-1和cathepsin D在86例NSCLC和20例癌旁肺组织中的表达,以及CD34在NSCLC中的表达,并对MVD计数.结果 caveolin-1在NSCLC组织中表达率显著低于癌旁肺组织(P=0.000)；而cathepsin D在NSCLC组织中表达率显著高于癌旁肺组织(P=0.024).caveolin-1和cathepsin D的表达均与TNM分期(P1=0.001;P2=0.008)和淋巴结转移有关(P1=0.032；P2=0.001).caveolin-1和cathepsin D阳性病例的MVD值明显高于阴性病例(P=0.000).caveolin-1 与cathepsinD在NSCLC中呈正相关(r=0.307;P=0.004).结论 caveolin-1在肺癌中具有双重作用；caveolin-1、cathepsinD高表达可能刺激间质内微血管密度增高,共同促进肺癌的侵袭和转移.
关键词： 肺肿瘤 Caveolin-1 cathepsin D 微血管密度 -
大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡及Fas和Cathepsin D的表达
目的 探讨大鼠急性脊髓损伤后神经细胞凋亡及Fas 、Cathepsin D的表达.方法 78只成年健康Sprague-Dawley( SD)大鼠,使用改良Allen氏法制作急性脊髓损伤模型,采用HE染色、原位末端脱氧核糖核酸转移酶介导DUTP标记法(TUNEL)对损伤脊髓组织进行标记；免疫组化方法测定Fas 、Cathepsin D的表达变化.结果 正常组、假手术组TUNEL、Fas、Cathepsin D阳性细胞较少见,损伤组TUNEL阳性细胞8h'明显增多,3d达到高峰,7d明显降低.Fas阳性表达的细胞也在8h开始增高,3d达到高峰,7d下降.Cathepsin D阳性细胞数则在脊髓损伤后3d明显增多,5d达高峰,至观察时间点结束,未有明显衰减.结论 Fas、Cathepsin D均参与了脊髓继发性损伤的调节.
关键词： 脊髓损伤 细胞凋亡 cathepsin D Fas -
乳腺恶性肿瘤组织中组织蛋白酶D的表达与临床病理相关性
目的探讨组织蛋白酶D(cathepsin D)在乳腺肿瘤组织中的表达及临床病理相关性.方法采用免疫组化SP法检测78例乳腺恶性肿瘤及17例乳腺良性病变石蜡包埋标本Cathepsin D表达.结果 Cathepsin D在乳腺恶性肿瘤细胞及成纤维细胞胞浆中呈不同程度灶状或散在的棕黄色颗粒,阳性表达率52.56%.Cathepsin D表达与患者淋巴结状态(AN)显著相关(P＜0.05),而与年龄、病理类型、组织学分级、雌激素受体(ER)、肿瘤大小等无关(P＞0.05).生存分析资料显示Cathepsin D(+)、(-)两组5年复发率分别为56.76%及25.81%,相对复发危险度(RRR)u=3.77(P＜0.05).Kaplan-Meier生存曲线示Cathepsin D阳性组5年累积无复发生存期(RFS)显著短于阴性组,(χ2=4.1091,P＞0.05).淋巴结阴性时,Cathepsin D(+)患者累积DFS明显短于(-)组(χ2=6.2137,P＜0.01),淋巴结阳性时,Cathepsin D(+)、(-)累积DFS无显著差异(χ2=2.8422,P＞0.05).结论①Cathepsin D在乳腺癌发展初期即异常表达,其表达与肿瘤分化、恶性进展及ER无关.②Cathepsin D表达与淋巴结状态相关,异常表达常反映出肿瘤浸润性生长及转移能力.③Cathepsin D的阳性表达常提示预后不良,尤其在淋巴结阴性患者预后判断上更有意义.
关键词： 乳腺癌 cathepsin D 临床病理参数
