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  • 前列腺特异性膜抗原新型剪接变异体PSM-E在外周血的定量表达

    作者:瞿虎;陈羽;丘少鹏;毛晓鹏;郭胜杰

    [目的]检测分析前列腺特异性膜抗原(PSMA)及其新型剪接变异体(PSM-E)在前列腺癌(PCA)及良性前列腺增生(BPH)患者外周血中的表达,探讨其意义.[方法]通过实时荧光定量PCR方法对PSM-E、PSMA在前列腺癌(53例)和前列腺增生(79例)两组患者外周血中定量表达,分析其差异.[结果]PSM-E相对表达量在PCA组(-8.22±0.32)高于BPH组(-9.99±0.41),P<0.001;PSMA相对表达量在PCA组(-12.51±0.31)高于BPH组(-13.72±0.48),差异有统计学意义,P<0.05;PCA组和BPH组内PSMA与PSM-E相对表达量有相关性(r=0.36,P<0.05;r=0.65,P<0.01),与血清PSA均不相关.[结论]外周血定量检测PSM-E表达差异可用于区分良性前列腺增生和前列腺癌;与PSMA相比PSM-E表达量更高,其检测的灵敏度更高,PSM-E诊断前列腺癌的敏感性和特异性更好.

  • 分析PSM-E和PSMA在预测前列腺癌生化复发中的价值

    作者:张俊隆;陈羽;丘少鹏;严亮

    目的:分析前列腺特异性膜抗原(PSMA)及其新型剪接变异体(PSM-E)在预测前列腺癌患者生化复发上的作用。方法选取行前列腺癌根治术,影像学资料未提示转移而Gleason评分>7分的局限性前列腺癌患者15例,荧光定量PCR检测PSM-E和PSMA在术前外周血及切出肿瘤组织中的RNA表达,分析外周血及组织中PSM-E和PSMA相对表达的差异。术后随访患者前列腺特异性抗原(PSA)的变化。结果 PSM-E和PSMA在前列腺癌组织中表达高于外周血,差异具有统计学意义(P<0.01)。在前列腺癌组织中,PSM-E的表达明显低于PSMA;在前列腺癌患者的外周血中,PSM-E的表达明显高于PSMA,差异具有统计学意义(P<0.01)。外周血PSM-E和PSMA表达阳性的患者术后生化复发率为66.7%(8/12),远处转移率为25.0%(3/12),均高于表达阴性的患者(0.0%,0/3),3例远处转移者表现为骨转移。结论在前列腺癌患者中,外周血检测PSM-E与PSMA均能地作为预测前列腺癌生化复发的指标。

  • 膀胱移行细胞癌中survivin及其剪接变异体survivin-2B和survivin-ΔEx3的表达及意义

    作者:郭凯;刘春晓;郑少波;徐亚文;许凯

    目的:研究survivin及其剪接变异体survivin-2B和survivin-ΔEx3在膀胱移行细胞癌中的表达,探讨其临床意义.方法:应用免疫组化及实时荧光定量PCR检测膀胱移行细胞癌、癌旁和正常膀胱组织survivin、survivin-2B和survivin-ΔEx3表达.结果:Survivin、survivin-2B和survivin-ΔEx3在膀胱移行细胞癌中均表达,与对照组差异有统计学意义.随着病理分级、临床分期升高,survivin和survivin-ΔEx3表达升高(P<0.05),且两者正相关(0<r<1,P<0.05);而survivin-2B的表达则降低(P<0.05).结论:Survivin、survivin-2B和survivin-ΔEx3可能在膀胱移行细胞癌的发生发展中起不同作用,为膀胱移行细胞癌的诊断治疗提供新的思路.

  • 缺第4外显子的IL-7剪接变异体的表达、纯化与活性研究

    作者:陈鉴华;严思;李小波;金小宝;朱家勇;潘德顺

    目的 构建、表达和纯化缺乏第4外显子的IL-7剪接变异体IL-7δ4(interleukin-7 splice variant lacking exon4,IL-7δ4),并对其生物活性进行初步研究.方法 将TA克隆成功的IL-7δ4基因克隆至pET-21b载体中,构建pET-21b-IL-7δ4的原核表达载体,阳性克隆经测序正确后转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,进行IL-7δ4重组蛋白的表达、复性、纯化、Western blot法鉴定,分析其对外周血单核细胞凋亡蛋白BCL-2表达及凋亡的影响.结果 成功构建重组原核表达质粒pET-21b-IL-7δ4,表达蛋白的相对分子质量为12 400,与预期大小一致;复性效率较高(约65%),纯化后获得的蛋白纯度大于95%,Western blot证实其为rhIL-7δ4;与对照组比较,rhIL-7δ4能明显诱导外周血单核细胞凋亡蛋白BCL-2的表达,并抑制其凋亡(P<0.01).结论 成功表达高纯度且具有生物活性的rhIL-7δ4复性蛋白,它能明显上调外周血单核细胞凋亡蛋白BCL-2的表达,起抑制PBMCs凋亡作用.

  • G蛋白β3基因多态性与人类疾病

    作者:胡健;李晓辉

    人类G蛋白β3亚单位基因(GNB3)位于染色体12p13,长约7.5kb,由11个外显子和10个内含子组成(编码蛋白区涉及其中9个外显子).在GNB3基因整个序列中,存在多个多态性位点,包括A(-350)G、A(657)T、G(814)A、C(825)T、C(1429)T等.其中围绕C(825)T的研究报道多.825C位于GNB3基因外显子10,其C-->T转换导致外显子9中498~620位的核苷酸被删除,成为一个功能性剪接变异体GNB3-s.细胞水平上,C(825)T多态性与Gi介导的信号传导的改变有关,C-->T转换导致跨膜信号传导和离子转运活性(如H+-Na+交换)增强,从而在多种人类疾病中均可能起着重要作用.

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