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胡桃醌诱导HeLa细胞凋亡的机制
目的 探讨胡桃醌对宫颈癌HeLa细胞促凋亡作用的机制,及其相关的信号转导通路.方法 选取处于对数生长期的HeLa细胞将其分为空白对照组和30μmol/L胡桃醌组.采用MTT法观察胡桃醌对不同时间点HeLa细胞的抑制作用;Hoechst 33258试剂盒,流式细胞仪测定胡桃醌对不同时间点HeLa细胞凋亡的影响;Westernblotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和Caspase-3,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/Akt通路中AKt及pAkt的表达.结果 MTT实验显示,与对照组比较,各时间点HeLa细胞具有抑制作用,且差异显著均有统计学意义(P ＜0.05,P＜0.01);Hoechst 33258检测表明,30μmol/L胡桃醌处理细胞4,8,12h后可出现明显的细胞核典型凋亡细胞形态;细胞凋亡检测表明,30mol/L胡桃醌培养不同时间后,与对照组相比早期凋亡率明显增高;Western blotting检测显示,与正常对照组相比,30μmol/L胡桃醌处理细胞12h后,HeLa细胞Bcl-2,pAkt蛋白的表达明显降低,而Bax、Cleave-Caspase-3,Akt蛋白表达明显升高.结论 胡桃醌通过抑制PI3K/Akt通路,进而促进HeLa细胞凋亡.
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望江南葸醌类成分的提取及抗肝癌活性研究
目的:研究望江南蒽醌类成分的提取工艺及抗肝癌活性.方法:以植物望江南为研究对象,设计了望江南蒽醌类成分的提取工艺,并采用CCK-8法观察了望江南蒽醌类各化合物体外对肝癌细胞(HepG2)的可能作用.Hoechst.33258染色实验观察了胡萝卜苷、芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸对HepG2细胞凋亡的影响.结果:本文的提取工艺对望江南种子进行提取,结果分离并鉴定了7个化合物,分别为:β-谷甾醇(1)、胡萝卜苷(2)、大黄素甲醚吡喃葡糖苷(3)、大黄素甲醚(4)、芦荟大黄素(5)、大黄酚(6)、大黄酸(7).其中,化合物1、2、3、5、7为首次从望江南中分离得到.胡萝卜苷、大黄素甲醚、芦荟大黄素、大黄酚、大黄酸等望江南中蒽醌类化合物均对肝癌HepG2的具有抑制作用.不同望江南蒽醌类化合物对HepG2细胞的抑制率是不同的.大黄酸药物干预组HepG2细胞凋亡比较明显,部分细胞核浓染呈亮蓝色,出现凋亡小体.结论:望江南可能具有良好的体外抗肝癌作用,作为天然抗肿瘤植物,具有很好的发展前景和开发利用价值.
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金钗石斛生物总碱对β淀粉样蛋白25-35片段所致PC12细胞损伤的保护作用
目的 研究金钗石斛生物总碱(Dendrobium nobile Lindl.alkaloids,DNLA)对β淀粉样蛋白25-35(amyloid beta 25-35,Aβ25-35)诱导的PC12细胞损伤的影响.方法 经老化处理的Aβ25-35(20 μmol/L)建立PC12细胞损伤模型(即模型组),溶媒对照组给予溶剂二甲基亚砜(1‰DMSO)培养,不同浓度DNLA(0.25或2.5 mg/L)预处理细胞后,MTT法分别检测8、12、24和48 h细胞的存活率,光镜下观察细胞形态的变化,Hoechst 33258荧光染色检测细胞凋亡.结果 与溶媒对照组相比,单用Aβ25-35处理(模型组)细胞存活率显著降低(P＜0.05),部分细胞皱缩、变圆、脱落,Hoechst 33258染色显示细胞核固缩、碎裂,出现凋亡;而DNLA 0.25 mg/L预处理24、48 h或2.5 mg/L预处理12、24、48 h后,细胞存活率高于模型组(P＜0.05),细胞连接较紧密,外形较规则,Hoechst 33258荧光染色显示细胞核呈圆形、透亮,凋亡明显减轻.结论 DNLA对Aβ25-35所致PC12细胞损伤具有保护作用.
