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Spurr树脂低黏度包埋剂在电镜制样中的应用
电镜制样由于步骤多,周期长,无论哪个环节有问题,都会影响效果,其中包埋剂是重要环节之一.目前普遍采用的Epon812环氧树脂包埋剂,由于易吸潮,尤其是夏季,很难制作出令人满意的超薄切片.Spurr树脂低黏度包埋剂,由于黏度低,渗透组织快,所需聚合时间短,大大缩短了制样周期.
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两种电镜包埋剂在制样中的联合使用
LR White是芳香族交联性丙烯酸,它具有聚合时间短,易切片,染色时间短,反差强等特点.但是使用LR White包埋剂制备的样品在电镜下观察显示有部分细胞成分的颗粒较为粗大.使用PDAP(苯二甲酸二丙烯酯)制备的样品其亚微结构细腻,但是聚合时间过长(60℃ 72h),硬度较大难切片,染色时间长,污染多,反差较弱等.因此,我们设计了用PDAP渗透然后用LR White包埋的实验,就如何排除LRWhite和PDAP两者的缺点而更好的利用它们的优点进行了研究.
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表面水分和不同种类的手套对于硅橡胶印模材聚合时间的影响
目的:本文研究了表面水分和不同种类的手套对于硅橡胶印膜材料聚合时间的影响.方法:使用3种手套:一次性聚乙烯塑料薄膜手套,灭菌橡胶医用手套(无粉),以及橡胶检查手套(预撒粉),分别在潮湿和干燥环境下手动混合DENT SILICONE-PLUS重体型硅橡咬印模材,并记录其硬化时间.结果:干燥情况下使用塑料薄膜手套时,橡胶印模材聚合时间短,平均2分10秒;乳胶材料和表面水分均可延长聚合时间,达到3～分钟时间;而预撒粉则可显著延长聚合时间,超过1小时.结论:临床运用硅橡胶制取印模时,建议使用一次性聚乙烯塑料薄膜手套在干燥环境下进行操作,预撒粉的橡胶检查手套必须更换,以避免操作失败.
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电镜树脂包埋液配方的选择与应用
用于透射电镜样品的包埋液,数年来一直延用几种固定的配方,即常用的812、国产树脂618、Spurr等等,各种包埋剂各有其优缺点.Spurr包埋剂:粘度低,浸透容易,包埋聚合时间短,硬度及韧性均很好,经免疫标记的样品,常用此液进行包埋.另外还可用于难以浸透、硬度高、致密性较高组织.但此包埋液价格昂贵,不宜作为常规的包埋液来使用.812包埋液:粘度低,韧性好,易切出较大的超薄切片,但组织包埋块易吸潮,不易保存 ,包埋液的价格也较高.国产树脂618:价格便宜,购买方便,组织块不易吸潮,保存方便,切割性能较好.但此包埋液粘度高,浸透速度缓慢,配制时不易搅拌均匀.根据以上常用的几种包埋液的优缺点,我室经数年的摸索,按自己的条件,重组了国产61 8树脂包埋液配方:618环氧树脂 5mlDDSA(十二碳烯基丁二酸酐) 2mlMNA(甲基内次甲基四氢邻苯二甲酸酐) 2.5mlDBP(苯二甲酸二丁酯) 1mlDMP-30(2-4-6-三(二甲氨基甲基)苯酚) 0.11ml该包埋液中的增塑剂DBP可根据季节的变化或组织的硬度进行适当的调整(冬季包埋时, DBP可增加至1.5ml,使包埋块的韧性增加).此配方的优点是:粘度降低,浸透力增强,聚合后的组织块颜色淡黄,硬度均等,韧性良好 ,切割性能较佳.经我室数年使用,对不易制片的眼球、耳蜗、皮肤、血管等组织,均取得了较好的超薄切片效果,现已成为我室的常规配方.
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国产β-淀粉样蛋白聚合寡聚体的方法及效果初探
目的 探讨国产人源性β-淀粉样蛋白(Aβ)聚合寡聚体的方法及其聚合效果.方法 Aβ40、Aβ42室温条件分别溶解于纯度≥99.0％的六氟异丙醇中,使Aβ浓度至1 mmol/L、20 min;高纯氮处理使六氟异丙醇完全挥发后,添加纯度≥99.5％的二甲基亚砜,使Aβ浓度至6 mmol/L,30℃水浴超声10 min;添加含0.05％十二烷基硫酸钠的磷酸盐缓冲液(0.02 mol/L,pH7.4),Aβ浓度至120 μmol/L;再用上述缓冲液分别稀释Aβ至40、80μmol/L,形成3种浓度梯度.37℃恒温摇床100 r/pmin行聚合反应2、12、24、48、72、96和120 h;SDS-PAGE,银染处理,分别考察上述条件的聚合效果.结果 3种浓度的Aβ40寡聚体聚合效果有很大差异:40 μmol/L聚合48、120 h,80 μmol/L聚合12 h有较明显的二十二聚体出现,120 μmol/L聚合≥12h,有四聚体至十聚体形成.但3种浓度Aβ40形成寡聚体又有一定相似性:均有大量的单体、二聚体、三聚体存在,随着聚合时间延长,寡聚体总量及高分子量寡聚体形成量并未明显增加.3种浓度的Aβ42聚合效果有明显区别:随着聚合浓度升高,十二聚体、二十一聚体的形成量逐渐下降,相同聚合时间内,随着浓度的升高,四聚体至十聚体形成量逐渐增加;但3种浓度的Aβ42聚合也有相似处:均存在大量的单体、二聚体、三聚体,随着聚合时间的延长,四聚体至十聚体形成量有增加趋势,此与Aβ40聚合效果有明显差异.结论 采用常用的方法均能使国产Aβ40 、Aβ42形成寡聚体;总体来讲,相对于聚合时间,聚合浓度对形成高分子量的Aβ寡聚体种类影响较大.
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常温聚合树脂在义齿制作中的应用
常温聚合树脂由于操作简单、聚合时间短、使用方便等优点,在修复临床上使用比较普遍.但目前,临床上使用的常温聚合树脂的种类比较单一,应用范围很有限.其实,常温聚合树脂的种类很多,用途也很广泛,如果能够正确合理使用,不仅能够提高工作效率,而且能够提高义齿的精度,解决临床上经常遇到的问题,实用性很强.
