首页 > 文献资料
-
微卫星稳定性的遗传调控
微卫星DNA(microsatellite DNA)是指广泛存在于真核生物基因组中的简单串联重复序列,以2～6个核苷酸为重复单位.微卫星代表基因组内不稳定的区域,比非重复DNA序列的突变频率高得多.微卫星不稳定性(microsatellite instability,MSI)是由于错配修复基因突变而引起的简单重复序列的改变,常表现为重复单位数量的增加或减少.这种不稳定性具重要意义:第一,不稳定性导致多态的等位基因,用于人和其它较高等真核生物的遗传作图研究.第二,基因内或基因附近简单重复序列长度的变化,能改变这些基因的表达或功能[1],在人类,许多遗传疾病反映出简单重复序列的扩增[2].第三,序列不稳定性的增加,可用以诊断某些具DNA错配修复缺陷的肿瘤.本文综述序列不稳定性的机制及序列稳定性的调控及其与人类疾病的联系.
-
构建体外错配修复功能分析模型及其在人类结直肠癌细胞株及肿瘤组织中的应用
目的构建体外错配修复(mismatch repair,MMR)功能分析模型,应用于人类结直肠癌细胞株及肿瘤组织,分析其整体的MMR功能状态;并与微卫星稳定性(microsatellite stability,MSS)检测结果比较,评价这两种检测方法在结直肠癌基础研究和临床诊断治疗中的价值.方法以噬菌体M13mp2为材料,以lacZα为报告基因,构建含有单碱基错配及双碱基缺失的异源双链DNA分子;以其为待修复模板和细胞株TK6(作为MMR功能完整表型)共同组成体外MMR功能分析模型.提取结肠癌细胞株Lovo及1例遗传性非腺瘤病性结直肠癌(hereditary non-polyposis colorectal cancer,HNPCC),1例散发性直肠癌(sporadic rectal cancer,SRC)肿瘤组织的总蛋白,经大T抗原依赖性SV-40 DNA复制证实其生物学活性保持良好后与构建成功的异源双链DNA共同作用,通过作用前后噬斑的变化,计算修复效率,从而了解其错配修复系统功能状态.采用国际FHNPCC合作小组推荐的5个位点分析细胞及病人正常及肿瘤组织的微卫星稳定性.结果TK6细胞株微卫星稳定,对双碱基缺失del(2)的修复效率超过60%,对单碱基错配G·G的修复效率超过50%;而Lovo细胞株微卫星不稳,对双碱基缺失del(2)的修复效率低于20%,对单碱基错配G·G的修复效率低于10%.1例HNPCC病人肿瘤组织的修复效率与Lovo相比差异无显著性,其MMR功能丧失,其微卫星高度不稳(MSI-H).1例散发性直肠癌病人肿瘤组织修复效率与Lovo相比差异有显著性,仍具有MMR功能,其微卫星稳定(MSS).结论体外错配修复功能分析模型可以直接评价待测样本MMR系统的功能状态,敏感性高,结果可靠,对家族史不明确的结直肠癌病人的诊断和分类具有重要的意义;但操作复杂,费时较长.微卫星检测结果与功能分析相吻合,说明国际合作组织推荐的5个位点具有良好的检测敏感性,且技术成熟,方便快捷,适用于临床诊断与治疗.两者协同作用,对结直肠癌发病机制的研究,分类标准的制定并指导临床诊断和治疗都有深远的意义.
关键词： 错配修复 功能分析 微卫星稳定性 遗传性非腺瘤性结直肠癌 -
结直肠癌微卫星不稳定状态与MTHFR基因多态性及临床病理特征的相关性
目的 检测结直肠癌标本中微卫星稳定性及亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性,并探讨两者的相关性.方法 用限制酶内切法检测52例结直肠癌标本的MTHFR基因的多态性,应用毛细管电泳法检测微卫星稳定与否,统计MTHFR多态性、微卫星稳定性与临床病理特征的关系及两者的相关性.结果 微卫星不稳定的结直肠癌共14例(26.92％),与结直肠癌患者年龄(x2=0.051,P＞0.05)、性别(x2=0.083,P＞0.05)和肿瘤分期(x2=0.259,P＞0.05)无相关性,而与肿瘤分化程度(x2=6.361,P＜0.05)和远处转移与否(x2=4.798,P＜0.05)相关.MTHFR CC型29例,CT +TT型23例,两组间结直肠癌患者年龄、性别、肿瘤分化程度、肿瘤分期和有无远处转移差异均无统计学意义(P＞0.05).MTHFR C677T多态与微卫星不稳定性呈正相关性.结论 MTHFR C677T多态与结直肠癌微卫星不稳定性有统计学相关性,但具体机制尚需要进一步研究.
-
结直肠癌免疫治疗现状及进展
结直肠癌免疫检查点抑制剂治疗,正处在"MSI时代",因为微卫星不稳定性(MSI)或错配修复基因状态(MMR)是目前佳的疗效预测指标.基于MSI状态,可以根据对免疫治疗的疗效将结直肠癌患者分为两个群体:"优势人群"——MSI-H/dMMR型肠癌(简称MSI-H型肠癌);"无效人群"——MSS/pMMR型肠癌(简称MSS型肠癌).对于前者,免疫治疗不论是单药抗PD-1单抗(帕博利珠单抗或纳武利尤单抗)还是联合抗CTLA-4单抗(伊匹木单抗)的双抗免疫疗法,均取得了良好的效果,联合治疗疗效优于单药治疗,但毒性也增加;另一方面,在优势人群中免疫治疗不断开疆拓土,从晚期疾病的后线治疗 、一线治疗,到早期疾病的新辅助治疗,均展现出疗效.所以,对于MSI-H型肠癌,免疫治疗将会成为重要的治疗组成部分.反之,MSS型肠癌真正属于"无效人群",不管免疫单药或联合治疗,还是免疫治疗联合化疗及抗血管生成治疗 、联合MEK抑制剂等的努力均告失败;该群体治疗的革命性进展有赖于肿瘤免疫基础研究的突破.因此,对于MSS型肠癌,除非是临床研究,目前不推荐常规使用免疫治疗.
