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弓形虫动物转种条件的研究
弓形虫病是一种人兽共患寄生虫病,人群与动物的弓形虫感染率很高.有关弓形虫在实验动物体内传代、虫株分离以及致病力等方面的研究虽有报道[1~3],但鼠龄、接种途径对感染小鼠生存时间的影响,以及感染时间与收虫数量的关系的报道甚少.为了全面了解弓形虫动物转种的影响因素,本文用胰蛋白酶消化与不消化法收集的弓形虫速殖子、不同虫数经不同途径接种,以及感染不同龄鼠,观察了感染小鼠的存活时间及不同感染时间收虫量的动态变化,为弓形虫生物学、免疫学和分子生物学的研究奠定基础.
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猪流感诊断技术研究进展
猪流感(swine influenza,SI)是由猪流感病毒(swine influenza virus,SIV)引起的猪的一种急性、热性和高度传染性呼吸道疾病,不仅引起病猪高热、食欲减退、咳嗽、流产及出栏时间延迟等,而且极易引起猪呼吸与繁殖障碍综合征病毒、猪伪狂犬病病毒和传染性胸膜肺炎放线杆菌等病原的继发或混合感染[1],对养猪业危害极大.更重要的是,猪呼吸道上皮细胞表面同时存在人流感病毒受体SA-α-2,6Gal和禽流感病毒(AIV)受体SA- α-2,3Gal, 这样猪既可感染人流感病毒又可感染AIV,从而成为人-禽流感病毒重组的理想"混合器"[2].Ito等证实AIV连续在猪体内传代,可产生人流感病毒样特性[2].因此,关于流感病毒在猪群中流行状况的资料可对人群中新的流感毒株的监测提供重要的预警信息.
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应用活性炭保存钩端螺旋体的实验观察
钩端螺旋体的保存方法有许多种,用动物体内传代法,操作麻烦,易感染,按常规方法保存时间较短,一般 15天传代一次,超过这时间,易于死亡,频繁传代,费时费力,也增加钩端螺旋体菌种污染的机会.为寻求一种简便而保存时间较长的方法,本文应用活性炭试验封闭法,效果理想,现报告如下.
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建立移植型肺癌动物模型的新方法和进展
在众多的肺癌模型研究中,尤其是移植型肺癌模型,是将人肺癌细胞移植到动物体内传代生长,其移植的肿瘤细胞形态学特征,染色体数量,同工酶水平等仍保持不变,对临床常用抗癌药物敏感性也大致相同,所以常用来做疾病定向性筛选,抗癌药物的筛选.同时还具有移植肿瘤细胞生长迅速,倍增时间短,耗费低等优点.
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通过体内传代和流式分选建立稳定转染MUC1 VNTR的B16细胞株
目的 获得具有较好致瘤性、在动物体内保留表达外源基因MUC1 VNT R(mucin 1,variable number tandem repeats)能力的稳定转染细胞株B16-GFP-MUC1,供MUC1靶向药物研究中体内抑瘤实验所用到的肿瘤模型.方法 用脂质体转染的方法和有限稀释法获得单克隆细胞株;将该细胞株进行体内传代后,流式分选GFP阳性细胞群,并对分选后细胞用有限稀释法进行单克隆化.用流式细胞仪和共聚焦荧光显微镜观察各时期细胞克隆的GFP表达情况 .结果 脂质体转染方法得到的在G418压力选择下存在的细胞B16-1,其G FP阳性细胞比率高为80%左右;致瘤性较差,75 d内仅87.5%小鼠出瘤;体外的稳定性观察中,在无抗生素的培养液中观察5周,其阳性率降至20%左右;经过体内接种后仅有10%左右的肿瘤细胞保留了外源基因的表达.而经过体内传代和流式分选后得到的单克隆细胞群B16-39,其GFP阳性细胞比率>90%;致瘤性为20 d内100%小鼠出瘤;体外培养8周,GFP阳性的细胞比率>90%; 体内剥离后的肿瘤细胞的GFP阳性细胞比率均>90%.结论 对于用于体内动物模型的稳定转染细胞,通过体内传代,流式分选并单克隆化,是获得致瘤性好,体内体外较为稳定的稳定转染细胞株的一个可行方案.