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P120ctn在非霍奇金淋巴瘤中的表达及意义
为了探讨连环蛋白P120(P120 catenin,P120ctn)在非霍奇金淋巴瘤(NHL)中的表达及意义,采用免疫组织化学染色的方法对比分析了40例NHL和10例反应性增生(RH)淋巴结的外科活检石蜡包埋组织切片中P120ctn的表达情况.结果显示,在反应性增生淋巴结组织中未检测到P120ctn的表达;而在NHL中P120ctn的阳性检出率为55%(22/40),其中低度恶性及中高度恶性NHL组中的阳性检出率分别为16.7%(2/12)、71.4%(20/28),两组之间比较存在显著性差异(P＜0.001).另外,在肿瘤血管内皮细胞上也发现了p120ctn的阳性表达.结论:P120ctn的表达与NHL的恶性程度密切相关,提示P120ctn在淋巴瘤的恶性增殖过程中可能发挥着重要作用,这对淋巴瘤的诊断和治疗可能具有一定的意义.
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乳腺癌组织VEGF和p120表达及其临床意义的探讨
目的:观察血管内皮生长因子(VEGF)及连环蛋白p120在乳腺腺病和乳腺癌中的表达,探讨两者与乳腺癌临床病理特征的临床意义.方法:采用免疫组化SP法检测62例乳腺癌及26例乳腺腺病组织中VEGF和p120的表达情况.结果:乳腺癌组织中VEGF和p120的异常表达率分别为77.4％(48/62)和80.6％(50/62),与良性组相比差异有统计学意义,P=0.000.两者均与肿瘤病理分级和TNM分期相关,但均与肿瘤大小无相关.VEGF在有腋窝淋巴结转移 的癌组织中阳性率明显高于无淋巴结转移者,P=0.017,p120表达情况和淋巴结转移无关,P=0.072.两者在乳腺癌组织中的表达具有正相关性,P=0.011.结论:VEGF及p120在乳腺癌组织中异常表达,并与乳腺癌浸润转移关系密切,是乳腺癌发生发展的生物学指标之一,联合检测对评估预后及临床治疗有指导意义.
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连环蛋白p120的转位与肝癌细胞恶性行为的关系
目的探讨p120ctn磷酸化转位与肝癌细胞恶性行为的关系,以及p120ctn和β-连环蛋白在上皮钙黏蛋白介导细胞信号转导中的相互影响.方法用DNA转染技术、免疫印迹、免疫荧光显微镜、免疫沉淀等方法检测p120ctn的表达、转位以及酪氨酸磷酸化情况;同时检测细胞黏附和迁移能力以及增殖能力的改变.结果肝癌细胞经转染p120ctn同功蛋白3A后,p120ctn的表达增强,且主要表达于细胞与细胞连接处;当细胞经表皮生长因子(EGF)刺激后,p120ctn酪氨酸发生磷酸化,其在细胞内的分布发生了改变,表现为胞膜表达减弱,胞浆表达增强,出现核表达(即转位);细胞黏附能力降低,而迁移能力增强.此外,过表达p120ctn后,β-连环蛋白在细胞内的分布也发生了改变,表现为向核外转移,细胞增殖能力减弱.EGF刺激使细胞增殖能力增加.结论 p120ctn 在肝癌细胞黏附、迁移和增殖等细胞生物学行为中起重要作用,其磷酸化转位可能与这些生物学行为改变有关;p120ctn与β-连环蛋白在一定条件下存在某种竞争关系.
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连环蛋白p120 shRNA重组慢病毒载体构建及鉴定
目的 构建连环蛋白p120特异性shRNA重组慢病毒载体,感染胰腺癌PANC-1细胞,鉴定干扰效果.方法 针对p120ctn mRNA设计合成3对shRNA序列,连接人酶切线性化的慢病毒载体pGCSIL-GFP,PCR鉴定及测序正确后与构建成功的含p120ctn基因的载体pGC-FU-p120ctn-3FLAG共转染293T细胞,蛋白质印迹分析筛选有效shRNA序列,包装慢病毒,测定病毒滴度.重组慢病毒感染胰腺癌PANC-1细胞,实时定量PCR及蛋白质印迹分析鉴定干扰效果.结果 PCR及测序证实成功构建出p120ctn-shRNA-LV慢病毒载体,病毒滴度达到3×10 9TU/ml.重组慢病毒感染PANC-1细胞后,实时定量PCR提示PANC-1细胞p120ctn mRNA表达下降82.6%(P<0.05),蛋白质印迹分析提示p120ctn蛋白表达较转染前显著下降.结论 成功构建出p120ctn基因shRNA慢病毒载体,为进一步研究p120ctn在胰腺癌浸润及转移中的作用奠定了基础.
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连环蛋白p120在人胰腺癌组织中的表达及其意义
目的:了解胰腺癌组织中连环蛋白p120(p120ctn)及E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达情况,分析它们与胰腺癌临床病理特征及预后的关系.方法:采用免疫组化技术检测53例胰腺癌及癌旁胰腺组织的p120ctn、E-cadherin和CD34表达情况,结合临床资料利用SPSS软件行统计学分析.结果:53例胰腺癌组织中,连环蛋白p120主要表现为胞膜表达减弱或消失,或细胞质表达,异常表达率为34/53(64.1%),显著高于癌旁胰腺组织(7/53),差异有统计学意义(P<0.05).E-cadherin在胰腺癌中异常表达率为30/53(56.6%),高于癌旁组织(9/53),差异有统计学意义(P<0.05).p120ctn的异常表达与E-cadherin异常表达呈正相关(r=0.457,P<0.05).p120ctn异常表达组微血管密度(MVD)值明显高于正常表达组(49.29±6.86 vs 13.80±2.92,P<0.05).p120ctn的异常表达与胰腺癌组织的分化程度、淋巴结转移及TNM分期呈明显相关(P<0.05).p120ctn异常表达组患者中位生存时间[(12.9±2.5)个月]明显低于正常表达组[(25.0±5.7)个月](P<0.05).结论:p120ctn在胰腺癌中存在异常表达,其异常表达不仅与E-cadherin、CD34表达有关,且与肿瘤分化程度、淋巴结转移及TNM分期密切相关,并影响患者的预后.p120ctn可能是潜在的评价胰腺癌预后的指标和治疗靶点.
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连环蛋白家族成员P120ctn的作用及相关机制
连环蛋白P120可在细胞连接处与E-钙黏蛋白结合形成连环蛋白-钙黏蛋白复合体,调控钙黏蛋白介导的细胞黏附作用;在胞质内可与Rho家族GTP酶相互作用调节细胞骨架的运动;在细胞核内可与核转录因子NF-κB和转录抑制因子Kaiso结合,影响炎性反应和细胞增殖.P120对细胞黏附、细胞动力、炎性反应和细胞增殖的影响使其与损伤修复和肿瘤的发生、发展密切相关.深入研究P120的作用及其相关机制对于进一步研究损伤后修复及肿瘤预防和治疗具有深远的意义.
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人脐静脉内皮细胞损伤后迁移能力的变化与血管内皮钙黏蛋白和连环蛋白p120的关系
目的 初步探讨人脐静脉内皮细胞(HUVEC)损伤之后迁移能力的变化与血管内皮钙黏蛋白(VE-cad)和连环蛋白p120(p120ctn)的关系.方法 DMEM培养基培养HUVEC,将HUVEC分为对照组和损伤组.Transwell实验检测HUVEC迁移能力的变化.Western blot测定p120ctn与VE-cad蛋白表达水平.免疫荧光实验检测VEcad的定位表达变化.免疫共沉淀法检测p120ctn与VE-cad的相互结合.结果 Transwell实验发现HUVEC经损伤刺激6、8h后迁移能力强(P＜0.05).Western blot结果显示HUVEC损伤6、8h后p120ctn及VE-cad表达水平明显上调.免疫荧光实验显示HUVEC经损伤刺激后,VE-cad的定位由细胞膜转到细胞浆.免疫共沉淀证实pl20ctn可以与VE-cad相互结合.结论 HUVEC损伤刺激后迁移能力增强,其机制可能与升高的p120ctn将VEcad由细胞膜携带入细胞浆导致VE-cad膜表达缺失有关.
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P120ctn在ER、PR阴性乳腺癌中的表达及其意义
目的:检测雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)阴性乳腺癌组织中连环蛋白P120(P120ctn)的表达,分析其与临床病理因素的关系.方法:采用免疫组织化学染色的方法对比分析了52例ER、PR阴性乳腺癌组织和23例癌旁正常乳腺组织及21例乳腺纤维腺瘤组织中P120ctn的表达.结果:52例ER、PR阴性乳腺癌组织中有32例P120ctn(61.53%)膜表达弱阳性或阴性表达,29例(52.76%)胞质表达阳性,总异常表达35例(67.30%).21例乳腺纤维腺瘤组织中膜表达弱阳性6例(28.57%),胞质无表达.23例癌旁正常乳腺组织仅有2例为膜表达弱阳性(8.69%),其余均为胞膜正常表达.三者比较差异有显著性.29例组织分级Ⅰ～Ⅱ和23例组织分级Ⅲ中P120ctn的异常表达率分别为48.27% vs 78.26%(P ＜ 0.05);30例有淋巴结转移和22例无淋巴结转移的癌组织P120ctn的异常表达率分别为76.66% vs 40.90% (P ＜ 0.05);17例临床分期Ⅰ～Ⅱ和35例临床分期Ⅲ～Ⅳ组织中P120ctn的异常表达率分别为58.82% vs 65.71%(P ＞ 0.05).P120ctn的异常表达与ER、PR阴性乳腺癌的组织学分级、淋巴结转移密切相关(P ＜ 0.05),与临床分期无关(P ＞ 0.05).结论:P120ctn在 ER、PR阴性乳腺癌的异常表达明显,可作为评估预后的一项有价值指标.
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正常肝组织和肝细胞系、肝癌组织及细胞系中连环蛋白P120的表达
目的探讨正常肝细胞、肝癌细胞、正常肝组织和肝癌组织中连环蛋白P120(P120ctn)的表达及其在细胞内的分布,揭示连环蛋白与肝癌间的关系.方法采用RT-PCR、免疫荧光标记(激光共聚焦显微镜)和免疫组织化学分析,分别对正常肝细胞、肝癌细胞、正常肝组织和肝癌组织中P120ctn进行检测.结果 RT-PCR检测结果显示,上述细胞和组织中均可检测到P120ctn同工蛋白1A和3A mRNA表达;免疫荧光标记和免疫组化检测结果显示,在正常肝细胞和正常肝组织中,P120ctn分布在细胞与细胞连接处和细胞膜上,而肝癌细胞和肝癌组织中P120ctn的分布发生了转位,胞膜表达减弱或消失,胞浆表达增强,出现核内转位.结论 P120ctn表达异常与肝癌的发生有一定关系,提示肝癌发生时肝细胞的信号转导功能和粘附功能发生异常.
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连环蛋白P120在肝细胞癌中的表达及其意义
目的 检测肝细胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中连环蛋白P120(P120 catenin,P120ctn)的表达,分析其与临床病理特点之间的关系.方法 用免疫组化技术检测58例HCC、17例癌旁肝硬化及8例正常肝组织中P120ctn的表达.结果 58例HCC组织中有34例P120ctn(58.6%)膜表达弱阳性或缺失,30例(51.7%)胞质表达,异常表达总比例为65.5%(38/58);17例癌旁肝硬化组织中有6例(35.3%)膜表达弱阳性,8例(47.1%)胞质表达,异常表达总比例为47.1%(8/17);8例正常肝组织全部表现为胞膜正常表达,无胞质表达.P120ctn的异常表达与HCC的包膜形成、淋巴浸润、有无卫星灶、肿瘤分化等相关(P＜0.05),而与性别、年龄、瘤体积大小、分期等无关(P＞0.05).结论 HCC中存在较高比例的P120ctn异常表达,主要表现为胞膜表达缺失伴胞质异常染色,P120ctn可以作为预测HCC转移潜能和预后状况的有价值的指标.
