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HCMV感染人神经胶质瘤细胞的光镜、电镜及免疫组化研究
本研究选用人神经胶质瘤细胞U251细胞株作为研究的靶细胞,以细胞形态学改变、细胞超微结构改变以及HCMV-LA的表达为指标,研究人类巨细胞病毒(HCMV)是否感染U251细胞,为进一步探讨HCMV致畸机制奠定基础.
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哇巴因诱发人神经胶质瘤U251细胞凋亡的机制
[目的]研究哇巴因抑制人神经胶质瘤细胞增殖并促进其凋亡的作用机制.[方法]通过MTT分析细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期,高内涵筛选和Western blotting法检测HIF-1α、Akt、mTOR等相关基因表达变化.[结果]MTT显示哇巴因抑制U251细胞24h的IC50值为3.3 μmol/L;流式细胞术显示哇巴因作用U251细胞出现S期阻滞;高内涵和Western blotting显示哇巴因通过下调神经胶质瘤细胞U251细胞中HIF-1 α 、Akt、mTOR和p-mTOR表达,同时上调p-Akt和Nrf2表达,抑制细胞增殖、诱导细胞凋亡.[结论]哇巴因可抑制人神经胶质瘤U251细胞增殖、诱导细胞凋亡,可能将成为一类新的化学治疗神经系统肿瘤的天然产物.
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黄莲提取液对人神经胶质瘤细胞体外增殖的影响及其作用机制
目的 探讨黄莲提取液对人神经胶质瘤细胞(C6)体外增殖的影响及其可能的作用机制.方法 用10、20、40、60μl/ml的黄连提取液分别作用C6细胞48 h后,倒置显微镜下观察C6细胞形态;作用24、48、72 h后,MTT法检测黄莲提取液对C6细胞体外增殖的影响.用40μl/ml的黄连提取液分别作用C6细胞0、20、40及60 min后,Western blot法分析C6细胞中Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.结果 倒置显微镜下观察可见,随着黄莲提取液浓度的升高,坏死细胞的数量逐渐增多;40μl/ml黄莲提取液作用48 h时的抑制率显著高于10及20μl/ml浓度组(P＜0.05),与60μl/ml浓度组差异无统计学意义(P＞0.05);C6细胞中Bax蛋白表达水平随黄莲提取液作用时间的延长而上升(P＜0.05),Bel-2蛋白表达水平随黄莲提取液作用时间的延长而下降(P＜0.05).结论 黄莲提取液对C6细胞的增殖具有显著的抑制作用,且可能是通过Bcl-2途径实现的.
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微波及γ射线单独或联合辐射对人神经胶质瘤细胞HSP70表达的影响
[目的]探讨微波及γ射线单独或联合照射对入神经胶质瘤细胞(SHG44细胞)热休克蛋白70(HSP70)表达的影响. [方法]SHG44细胞按是否接受y射线照射(5Gy)分为单独微波组(M组)和射线微波联合组(IM组);两组又均以接受微波强度不同(0、2、4、6mW/cm2)分为4个亚组,即M0、M2、M4、M6亚组和IM0、IM2、IM4、IM6亚组.用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,用western blot和RT-PCR方法检测HSP70的表达. [结果]与M0组相比,M4、M6、IM6组的细胞存活率均明显下降(P＜0.05或P＜0.01),尤以IM6组下降为甚;且IM6组的细胞存活率也低于单独y射线照射组(IM0组),P＜0.01.与M0组相比,各剂量M组的HSP70表达差异无统计学意义;经γ射线照射后,即各IM组的HSP70表达较M0组均明显下降(P＜0.01);而与IM0组相比,各IM组的HSP70表达差异无统计学意义(P＞0.05). [结论]本实验条件下,微波和γ射线单独或联合辐射均能降低细胞存活率;γ射线照射能抑制HSP70的表达,但微波不能引起HSP70表达的明显变化.
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CD40、血管内皮生长因子、S100阳性树突状细胞在胃腺癌中表达及临床意义
可溶性白细胞表面分化抗原CD40属于肿瘤坏死因子受体超家族成员,经研究证实CD40广泛表达于上皮性肿瘤,且与肿瘤的侵袭、转移等生物学行为密切相关.近期研究发现,CD40在胃癌中也呈现高表达.有学者发现在人多发性骨髓瘤细胞和人神经胶质瘤细胞中,CD40信号活化可诱导肿瘤细胞表达、分泌血管内皮生长因子(VEGF),从而调节肿瘤血管新生[1-2],但目前尚未见有关CD40与胃肿瘤微环境的研究报道.本研究以免疫组织化学法检测128例胃腺癌及相应癌旁组织中CD40、VEGF和S100阳性树突状细胞(DC)的表达水平,初步探讨其在胃癌发生发展中的意义.
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miRNA520h影响神经胶质瘤发生的初步研究
目的:综合分析胶质瘤标本中基因的表达,体外生物学作用的检测及对临床病例预后的长期随访,评价胶质瘤中miR-520h的生物学作用及其与NF-κB通路的关系.方法:选取46例Ⅱ到Ⅳ级胶质瘤标本,常规RTPCR检测前体microRNA(pri-miR-520h)的表达,免疫组织化学方法评估Ki-67指数；对46例患者的预后进行KPS评分及肿瘤复发与相关死亡率监测；用520h抑制剂转染U251胶质瘤细胞后缺氧培养,Western blotting检测p-NF-κB/p65等蛋白的表达水平.结果:miR-520h的RT-PCR分析及免疫组织化学结果显示,表达前体miR-520h(Pri(+))的病例Ki-67阳性率较低,而表达成熟miR-520h的病例Ki-67阳性率增加；长期随访结果显示,Pri(+)病例的KPS评分比Pri(-)病例显著增高；此外,高表达前体miR-520h (Pri(+))的病例预后较好,肿瘤复发和相关死亡率较低,说明pri-miR-520h(+)病例预后较好；Western blotting显示浓度为200 nmol/L的has-miR-520h抑制剂在缺氧条件下,促进U251胶质瘤细胞中p-NF-κB/p65的表达.结论:miR-520h在胶质瘤的发生中具有重要的作用,成熟miR-520h作为原癌miR,能诱导胶质瘤细胞的发生.
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黄莲提取液对人神经胶质瘤细胞(C6)的作用研究
目的 探讨黄莲提取物对人神经胶质瘤细胞体外增殖的影响和可能的作用机制.方法 用MTT方法检测黄莲提取物对HO-8190体外增殖的影响效果.结果 黄莲提取物48h、50μL/ml组抑制率显著高于其他组(P＜0.05).结论 黄莲提取物对C6增殖具有显著的抑制作用.
