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供体特异性输血诱导CD8+CD28-调节性T细胞在肝移植急性排斥反应中的作用
目的 通过供体特异性输血(DST)诱导机体产生抗原特异性CD8+CD28-调节性T细胞(CD8+CD28-Tr),评价其对大鼠肝移植急性排斥反应的抑制作用.方法 采用DST在正常BrownNorway(BN)大鼠体内诱导针对LEW抗原的CD8+CD28-Tr,体外验证其免疫抑制活性之后将其输注给LEW→BN肝移植急性排斥模型受体,观察输注后大鼠的生存时间和肝脏病理学表现.采用SPSS11.0软件进行Log-Rank检验,比较大鼠生存率的差异.结果 DST可在正常BN大鼠体内诱导大量CD8+CD28-Tr产生,其在体外具有免疫抑制活性,体内输注可缓解大鼠肝移植急性排斥反应(LEw→BN).结论 DST可以在正常大鼠体内诱导大量CD8+CD28-Tr产生,其体内输注可以抑制大鼠肝移植急性排斥反应,DST可能有望成为体内诱导特异性CD8+CD28-Tr的途径之一.
关键词： 肝移植 CD8+CD28-调节性T细胞 供体特异性输血 急性排斥反应 -
供体特异性输血与嵌合体发生及肾移植急性排斥反应的关系
目的:研究供体特异性输血(DST)患者末梢血中嵌合体的发生及其与肾移植急性排斥反应的关系.方法:肾移植患者60例,分为:A组,未行DST的尸体肾移植35例(2 or 3 HLA-mismatched);B组,未行DST的活体肾移植3例,HLA配型各位点无错配;C组,术前行DST的活体肾移植22例(1 or 2 HLA-mismatched),利用PCR-SSP法检测患者末梢血中的HLA-DRB1基因.结果:A组12例(34.3%)、B组3例(100%)、C组19例(86.3%)发现了供体的HLA-DRB1基因,证实有嵌合体发生.在34例有嵌合体发生的病例中14例(41.2%)、26例无嵌合体存在的病例中有10例(38.5%)发生过急性排斥反应,但两组间比较差异无显著性(P＞0.05),同时排斥反应发生的频率、次数比较差异也无显著性(P＞0.05).另外,C组病例中嵌合体现象消失,PCR-SSP检测转为阴性时未见排斥反应病例发生.结论:DST有利于促进嵌合体的形成,嵌合体现象与急性排斥反应间无相关性,不能以嵌合体现象的有无作为诊断急性排斥反应的依据.
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血浆TNF-α变化对大鼠肝移植术后排斥反应的诊断作用
目的:测定原位肝移植大鼠术后血浆肿瘤坏死因子α(TNF-α)的浓度变化,探讨其在原位肝移植急性排斥反应中的作用.方法:利用酶联免疫检测法测定血浆TNF-α浓度,同时观察移植肝和胸腺病理形态变化.结果:①在SD→Wistar未处理组,术后7 d内血浆TNF-α浓度几乎呈线性增加,但是在SD→Wistar+DST处理组和Wistar→Wistar组,TNF-α浓度仅有轻度增加,第7天时达到峰值,随后逐渐下降.②在SD→Wistar未处理组,术后第12天移植肝出现典型的排斥反应表现,即肝细胞坏死、门静脉炎性浸润、中央静脉内皮细胞炎症和胆管损伤,在SD→Wistar+DST处理组和Wistar→Wistar组,仅有轻度的胆管上皮增生.③在急性排斥反应期间,SD→Wistar未处理组的胸腺皮质和髓质内的胸腺细胞呈稀疏状分布,在SD→Wistar+DST处理组和Wistar→Wistar组,未观察到胸腺组织有明显的变化.结论:TNF-α在肝移植排斥反应中发挥了重要作用,术后连续监测其浓度变化有一定的预测和早期诊断作用.
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供体特异性输血在亲体肾移植的初步分析
目的 探讨供体特异性输血对亲体肾移植患者围手术期并发症和术后人肾存活率的影响.方法 将我院2005-2007年收治的52例亲体肾移植患者按是否进行供体特异性输血分为供体输血组和对照组,供体输血组于术前3 d采集全血200～400 ml,术中用于受者;对照组术中随机使用库存血.对比分析两实验组在肾移植后移植肾的功能(血肌酐测定)、急性排斥反应发生率、移植肾功能延迟恢复(delayed graft function,DGF)发生率.结果 供体输血组和对照组在供肾GFR、HLA配型、供者和受者年龄方面无显著差异(P＞0.05).供体输血组术中输供体全血(334±56.4)ml,随机输注浓缩红细胞(238±105)ml;对照组输注浓缩红细胞(698±243)ml.供体输血组与对照组术后1周血肌酐水平无显著差异(P＞0.05),术后急性排斥反应和DGF发生率低于对照组(分别为3.57%、16.67%).结论 供体特异性输血可明显减少移植术中库存非亲体血使用量,减少术后急性排斥和DGF发生率,有效提高了移植受者围手术期的成功率.
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大鼠肝移植排斥反应期一氧化氮合酶的动力学变化
目的探讨供体特异性输血(DST)预处理后大鼠同种肝移植物一氧化氮合酶(NOS)的动力学变化.方法观察同基因肝移植(Ⅰ组)、同种肝移植(Ⅱ组)、DST预处理的同种肝移植(Ⅲ组)术后NOS的表型及亚硝酸盐/硝酸盐、细胞因子的动态变化.结果Ⅱ组血中亚硝酸盐/硝酸盐、INF-γ、TNF-α浓度明显增高.免疫组化显示,Ⅱ组移植物中macNOS+及ED1+、ED2+细胞数明显增多.Northern blot分析,Ⅲ组移植物中IL-10和TGF-Β mRNA呈高水平表达;Ⅱ组移植物的iNOS和IL-12 mRNA水平明显高于其他组.结论 DST预处理的移植物处于免疫无应答状态,NOS被抑制与TH2及TH3类细胞因子高表达有关.
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大鼠小肠移植模型的技术改进
目的 建立一种更为简便、稳定、存活率高的大鼠小肠移植模型.方法 供、受体手术均双人操作,整体切取供体节段小肠,术中原位冷灌注,4 ℃ UW液保存;受体采用显微外科技术行带供体小肠的腹主动脉补片与受体腹主动脉端侧吻合,术中经受体左肾静脉行供体特异性输血,利用Cuff套管技术将供体的门静脉与受体的左肾静脉端端吻合.移植肠近端结扎,远端外置.结果 建立小肠移植模型60次,动脉、静脉吻合时间分别为(20±5)min和(2±1)min.52只存活超过3 d,存活率为86.7%,平均存活(16±9.4)d,长存活时间为45 d.结论 科学统筹、供体特异性输血和血管吻合技术的改良能建立更为可靠的大鼠小肠移植模型,为进一步的研究奠定了基础.
