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口腔链球菌摄取生物素与口内白色念珠菌生长的关系
为了探讨口腔细菌生态平衡机制,本文检测了4株口腔链球菌(S. salivarius, S. sanguis, S.mutans和S. mitior)和白色念珠菌生长对生物素的依赖性.结果显示白色念珠菌和口腔链球菌的生长绝对依赖生物素,前者大半数生长需要生物素约10 pmol/L,其大生长率所需生物素约为100 pmol/L;而后者大半数生长需生物素为5～25 pmol/L.正常人血清和唾液中生物素含量约为212～294 pmol/L.生物素饥饿状态下的白色念珠菌和口腔链球菌,以及唾液离心沉淀物(绝大多数为细菌)摄取生物素具温度依赖性,而代谢抑制剂(叠氮化合物、氰化物和醋酸碘)和某些抗生素(杆菌肽、短杆菌肽、万古霉素和二性霉素)具选择性抑制效应,提示生物素的摄取和跨膜转运是一依赖能量的主动过程.用唾液沉淀物和口腔链球菌吸收培养基中的生物素或与白色念珠菌共培养,显著抑制白色念珠菌的生长.这些实验提供证据显示口腔优势菌可能通过竞争生物素等营养成份,抑制白色念珠菌生长,以维持口腔微生物之生态平衡.进一步实验显示处于饥饿状态的白色念珠菌摄取生物素具可饱和性和特异性.从饱和曲线算出主动摄取生物素的半数大初速率(1/2 Vmax)所需生物浓度,即Km值为(0.79±0.11) μmol/L(平均数±标准差,n=8);叠氮钠(5 mmol/L)处理后,其Km值增到(2.39±0.64) μmol/L(平均数±标准差,n=3).生物素之结构同源分子,如脱硫生物素、生物胞素、甲基酯生物素和对硝基苯酯生物素等竞争性抑制其主动摄取生物素,但是2-亚氨基生物素却完全无抑制作用.在生物素摄取充足的白色念珠菌(在含20 nmol/L生物素培养基中生长),生物素主要通过简单的弥散方式进入菌体内.由于血清中的生物素含量在pmol/L到几个nmol/L之间,白色念珠菌在体内可能主要通过主动摄取生物素机制满足其营养代谢需求.这些实验研究结果可能为发展抗白色念珠菌感染新举措提供某种理论基础.
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猖獗龋患者的病因和口腔微生物种类分析：1例报告
目的：分析患者口腔全微生物种类，对猖獗龋患者提出细菌学预防与治疗手段。方法抽血查免疫全套和血常规，获取全菌斑（A）、龋损（Q）、唾液（T）、黏膜（N）样本经原代涂片镜检，并传代分离培养后采用形态学、梅里埃鉴定仪、16S rDNA序列进化分析鉴定微生物种类；进一步采用Q-PCR分析变异链球菌的含量，DGGE分析微生物组成和结构。结果血液免疫全套基本正常，但IgE、中性分叶核细胞增高。原代样本涂片发现唾液中有大量极长链的细菌，经培养发现唾液中总菌含量高，龋损样本中溶血菌含量高，变异链球菌在全菌斑中多。梅里埃和测序鉴定出33株细菌，全菌斑中分离出多种链球菌和韦德纤毛菌、龋损菌斑中多次分离到变异链球菌、具核梭杆菌和苏黎世链球菌，唾液样本中分离出多种乳杆菌。qPCR发现变异链球菌含量明显增高；变性梯度凝胶电泳（DGGE）显示该患者细菌多样性明显降低，但丰度明显增强；条带切胶测序检出多种纤毛菌。结论患者免疫功能基本正常，血液检测呈现感染血象，病因疑与细菌感染有关。可能由于唾液减少导致变异链球菌、多种纤毛菌等致病微生物过度繁殖、细菌多样性减少而引起生态失衡。
关键词： 猖獗龋 口腔微生物 梅里埃生化鉴定 16S rDNA序列进化分析 -
钛合金铸造基托义齿在修复中的效果观察
目的:观察钛合金铸造基托义齿在修复中的效果.方法:用钛合金及钴铬合金铸造基托修复上颌肯氏Ⅰ类或Ⅱ类缺失患者各32例.检测患者戴义齿前、戴义齿1个月、戴义齿3个月承托区黏膜面可培养菌总量的变化及义齿承托区黏膜的炎症情况.结果:钴铬合金基托承托区口腔黏膜可培养细菌总量戴牙3个月与1个月、与备牙前相比显著增高(P<0.001);钛合金基托承托区口腔黏膜可培养细菌总量在各时期差异均无显著性(P>0.05);和钛合金基托相比,钴铬合金基托对应承托区黏膜可培养细菌总量在戴牙3个月明显增高,差异有显著性(P<0.001).钴铬合金基托承托区黏膜义齿性口炎发生率在戴牙3个月比戴牙1个月、备牙前显著增高(P<0.05);钛合金基托承托区黏膜义齿性口炎发生率在各时期都无显著差异(P>0.05);与钛合金基托相比,钴铬合金基托承托区黏膜义齿性口炎发生率高,特别在戴牙3个月时增高明显(P<0.05).结论:戴用义齿后,与纯钛基托相比.钴铬合金更易促使口腔承托区黏膜细菌的积累;义齿性口炎的发生率随着时间的延长而增高,与纯钛基托相比.钴铬合金基托更易发生义齿性口炎.
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健康儿童口腔微生物的定植
人体是一个由真核细胞和共生在体内的微生物群落共同构成的超级生物体.口腔,作为微生物进入身体的门户,其微生物群落的正常确立及平衡维持对口腔局部及全身系统的健康都有非常重要的作用.在母体内,婴儿就开始不断发生人与人或人与环境之间的紧密接触,从而与微生物之间建立密切联系.不同的生产方式,不同的喂养方式均能影响微生物在新生儿口腔中的定植.在乳牙列期,乳牙萌出为微生物的定植提供了新的生态位点,口腔微生物的构成随之发生变化.随着恒牙的萌出,口腔环境进一步变化,微生物的定植也发生变化直至成熟,即微生物定植种类更加丰富,牙周致病菌的定植也显著增加.
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现代分子技术在口腔微生物生态学研究中的应用
细菌感染是口腔疾病的主要病因之一,而现代分子技术作为新的研究方法能更深入、更全面了解口腔微生物的特性及其在口腔感染性疾病中的作用.本文就近年来常用于口腔微生物生态学研究的一些分子技术的原理、用途及优、缺点作一综述.
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抗菌肽及其对口腔微生物作用研究进展
抗菌肽是多细胞生物体自身防御体系产生的具有高效广谱抗菌活性的小分子肽,自20世纪80年代发现抗菌肽以来,学者们对其进行了不断研究.本文就抗菌肽的生物活性、抗菌肽对口腔微生物的作用、抗菌肽作用机制、抗菌肽的应用前景加以介绍.
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口腔微生物共聚的研究进展
共聚是不同属(种)微生物表面分子间的特异性识别,在口腔微生物定植于宿主以及菌斑生物膜形成和成熟过程中起着重要作用,与龋病、牙周病等口腔感染性疾病的发生发展密切相关.笔者就近期口腔微生物共聚的关系、相关性生物分子及研究方法三方面作一综述,旨在揭示其共聚的特征及本质,为有效控制菌斑及防治口腔疾病提供依据.
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激光共聚焦扫描显微镜在口腔微生物学研究中的应用
激光共聚焦扫描显微镜具有分辨率高、标本制备简单、可以对活细胞进行无损伤性动态观察和三维重建、空间定位等特点,广泛应用于几乎所有涉及细胞研究的医学和生物学领域.本文简要介绍了激光共聚焦扫描显微镜的组成、基本原理并对其在口腔微生物学的具体应用做一综述.
关键词： 激光共聚焦扫描显微镜 口腔微生物 生物膜 -
可摘局部义齿基托对承托区腭粘膜微生物的影响
目的:了解基托戴入前后承托区腭粘膜微生物的变化及不同材料基托引起上述变化的差异.方法:检测备牙前、戴牙1月和3月时金属基托和塑料基托对应承托区腭粘膜面可培养菌总量及检出微生物组成比的变化.结果:戴牙1月和3月时,塑料基托对应腭粘膜可培养菌总量及乳杆菌、白色念珠菌组成比与备牙前相比均明显增加(P<0.05).戴牙1月时,金属基托对应腭粘膜可培养菌总量及乳杆菌、白色念珠菌组成比与备牙前无明显变化.戴牙3月时,乳杆菌、白色念珠菌组成比与备牙前相比显著增加(P<0.05).两种材料制作的基托对应腭粘膜面可培养菌总量变化值无显著差异,但塑料基托所致白色念珠菌组成比的增加明显高于金属基托(P<0.05).结论:可摘局部义齿的戴用在基托与承托区腭粘膜间形成新的滞留区,有利于乳杆菌及白色念珠菌的繁殖.与金属基托相比,塑料基托更易促进白色念珠菌的生长.
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微结构芯片对石墨粉吸附及3种口腔微生物黏附行为的影响
目的 通过制备精确控制微结构的材料样品,比较不同尺寸无生命物质的吸附行为及不同尺寸微生物的黏附行为,探讨微结构影响微生物黏附增殖的机制.方法 聚二甲基硅氧烷(PDMS)翻制羟磷灰石(HA)芯片上的23个微结构,并分别与不同尺寸的石墨粉和不同尺寸的口腔微生物共培养,观察并比较微结构大小及形状对石墨粉吸附和微生物黏附的影响.结果 30～50 μm的石墨粉在各尺寸微结构上的吸附量无显著差异,10-20μm的石墨粉在10 μm和20 μm的结构上吸附量多;白假丝酵母菌易黏附于尺度与其大小相当的5 μm微结构区.微结构对呈链状生长的变异链球菌黏附影响不大.结论 微结构对无生命物质的吸附与二者的尺度大小呈正相关,对微生物的黏附也产生同样影响,即与大小尺度呈正相关性;但一些特殊增殖行为的细菌,如呈链状生长的变异链球菌,微结构形状及尺度大小对其黏附影响较小.
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口腔微生物与消化系统疾病关系的研究进展
人类微生物组计划使人们对口腔微生物的认识更加深入.口腔微生物不仅在龋病、牙周病、口腔癌等口腔疾病的病程中发挥重要作用,还与其他全身系统疾病关系密切.口腔微生物与消化系统疾病间存在紧密的相关性,可以促进结直肠癌的发生和发展.本文对口腔微生物与消化系统疾病的研究进展、口腔微生物在消化系统疾病进程中的重要作用以及口腔微生物作用于消化系统多脏器的途径进行综述,为口腔微生物与全身系统疾病的进一步研究提供参考.
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龋病微生物因素研究进展
龋病是发病率高的口腔慢性感染性疾病,以变异链球菌为代表的一系列细菌曾被认为是龋病的单一致病菌.然而,近几十年来,基于传统致病菌的防治手段未能有效降低龋病的发病率,人们逐渐认识到单一致病菌理论并不能全面反映疾病与微生物的关系.龋病病因学的微生物研究逐步从传统致病菌理论过渡至微生态失衡理论.目前,随着检测手段的不断发展,大量龋病微生物群落研究陆续开展,龋病“核心微生物组”的概念得以提出,即在龋病发生发展中起到关键作用的一组微生物,这将是未来龋病微生物因素研究的方向.
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口腔中过氧化氢的来源及在微生态平衡中的作用
过氧化氢(H2O2)作为口腔中一种重要的抑菌物质,在口腔微生态平衡中发挥着重要作用.在口腔龈上菌斑定植的先锋菌中,约有80%细菌属于口腔链球菌属,这些口腔链球菌可以利用不同的氧化酶合成H2O2,同时H2O2可通过抑制对H2O2敏感的微生物参与菌间竞争拮抗,使氧耐受菌得以存活,从而调节生物膜的发展过程;H2O2还可通过影响微生物细胞外DNA的释放和感受态细胞的形成进而影响基因的水平转移,调节生物膜对口腔环境的适应能力;同时口腔微生物也可通过一系列机制耐受H2O2.此外,H2O2在微生物与宿主的关系中也发挥着重要作用.本文就口腔中H2O2的来源及其在口腔微生态平衡的作用两方面的研究进展进行综述.
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口腔微生物名称讨论会会议纪要
首届全国口腔微生物名称讨论会于1999年4月17日在成都华西医科大学口腔医学院召开.会议由中华口腔医学会牙体牙髓专业委员会副主任委员、上海第二医科大学口腔医学院刘正教授主持,来自国内几大院校的著名口腔微生物学专家学者就口腔微生物分类及命名展开了热烈的讨论.一致认为,口腔微生物分类及命名具有很多特殊性,但目前国内缺乏统一的口腔微生物名称,这既不利于国内外学术交流,也不利于教学,所以统一我国口腔微生物的名称具有重要的意义.本次会议决定成立全国首届规范口腔微生物名称专家小组,通过了<口腔微生物名称>(第一版),首次讨论并规范了口腔常见微生物名称.
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人工种植牙龈沟内细菌的研究
目的:探讨有牙周炎病史的患者种植体周常见致病菌的变化情况,为种植体的临床应用及维护提供理论基础.方法:临床选取31名种植患者的40枚种植体,并将其分成A、B两组,A组是有牙周炎病史的患者种植体20枚,为实验组.B组是牙周健康的患者种植体20枚,为对照组.记录了修复后1个月,3个月,个月,12个月四个时段,入选种植牙的菌斑指数(PLI),牙龈指数(GI),牙龈出血指数(GBI),探诊深度(PD);采用产黑菌、放线菌、具核梭杆菌及厌氧菌的选择性培养基对龈下菌斑标本进行了分离培养.结果:横向比较A、B两组之间厌氧菌总数、产黑菌、牙龈指数、探诊深度有统计学差异,其余各检测指标无统计学差别.修复后1月时,A、B两组之间厌氧菌总数、产黑菌计数值已有统计学差异.纵向比较随时间延长,A、B两组的厌氧菌总数、产黑菌、核梭菌、粘放菌总的来讲有显著差别,其余各检测指标随时间变化无统计学差异.结论:有牙周炎病史的患者种植体周的微生物指标在种植早期即高于正常种植患者,应指导该类患者及早进行口腔清洁和维护,预防种植体周围炎的发生,提高此类种植的成功率.
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可摘局部义齿卡环对基牙牙面致龋菌的影响
目的了解卡环戴入前后基牙牙面微生态平衡的变化,并探讨不同卡环引起上述变化的差异.方法检测备牙前、戴牙一个月及三个月时铸造卡环和锻丝卡环所在基牙牙面的可培养菌总量以及变形链球菌、粘性放线菌和乳杆菌组成比的变化. 结果与备牙前相比,戴牙一个月及三个月时,两种卡环所对应的基牙牙面的检出菌总量以及变形链球菌和粘性放线菌的组成比均明显增高,其差异具有统计学意义(P<0.05),且锻丝卡环所对应的牙面比铸造卡环所对应的牙面的变形链球菌组成比增高更明显(P<0.05).结论卡环的戴入在牙面形成新的滞留区,促进细菌沉积及致龋菌繁殖.与铸造卡环相比,锻丝卡环引起的上述变化更显著.
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口腔常见致病菌的表面疏水性分析
目的:分析测试几种口腔常见致病菌的细胞表面疏水性,为研究细菌非特异性黏附机制提供科学理论参数.方法:采用碳氢化合物黏着法测试细菌表面疏水性.结果:不同种类的细菌、同种细菌的不同菌株间疏水性均存在差异.每株细菌表面具有其相对稳定的参考值范围.结论:口腔细菌具有强弱不同的疏水作用.
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高龋均和重度牙周炎患者口腔微生物多样性差异的研究
目的:通过16Sr RNA高通量测序研究高龋均和重度牙周炎患者的唾液中微生物群落组成情况及其差异性.方法:随机选取高龋均和重度牙周炎患者各10例,分别采集每个患者的唾液样本并提取各样本中的微生物总DNA后,用PCR扩增其16Sr RNA序列的V3+V4区,同时对合格的DNA样本进行高通量测序.结果:从高龋均和重度牙周炎患者的唾液微生物群落中筛选获得733104条优质序列,共检测到386个操作分类单元(OTUs),分别归为14个门、23个纲、39个目、59个科、98个属.菌门和菌属分析结果显示,两组患者唾液中的微生物群落结构有差异性;菌门水平上,厚壁菌门在高龋均组的丰度高于重度牙周炎组,拟杆菌门、螺旋体门在重度牙周炎组的丰度高于高龋均组(P<0.05);菌属水平上,链球菌属、孪生球菌属在高龋均组的丰度高于重度牙周炎组,奈瑟氏菌属、普氏菌属-7、普氏菌属在重度牙周炎组的丰度高于高龋均组(P<0.05).结论:高龋均和重度牙周炎患者唾液中的微生物群落结构存在差异性,其中以高龋均患者的微生物群落结构更多样.
关键词： 高龋均 重度牙周炎 口腔微生物 Illumina Miseq高通量测序 -
16S rRNA测序方法分析KSL抗菌肽口香糖对口腔细菌的抗菌效果
目的:应用16S rRNA测序方法研究KSL抗菌肽口香糖对口腔细菌的抗菌效果.方法:分别收集6名志愿者使用KSL抗菌肽口香糖前后的唾液,并提取总DNA进行16S rRNA测序分析,以比较使用KSL抗菌肽口香糖前后的口腔细菌的组成和丰度变化.结果:在门水平上,KSL抗菌肽口香糖对变异菌门、拟杆菌门和厚壁菌门的抑制作用比较明显(P<0.05);在属水平上,KSL抗菌肽口香糖对拟杆菌属、奈瑟氏菌属、嗜血杆菌、韦永氏球菌属、普氏菌属、卟啉单胞菌属、链球菌属的抑制作用比较明显(P<0.05).结论:KSL抗菌肽口香糖对口腔中的部分致病菌具有抑制作用.
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甘肃保安族口腔健康儿童唾液微生物群落结构分析
目的：研究甘肃保安族口腔健康儿童唾液微生物群落结构，探寻优势微生物种群。方法：通过构建16S rRNA 克隆文库法对测序结果进行分析，利用 BLAST 、Mothur、Clustalx 2．0等软件进行细菌群落结构多样性分析，构建系统发育树。结果：共检测到84个操作分类单位（OTU），归属于5个门，12个纲，15个目，18个科，19个属。其中以厚壁菌门（Firmicutes，88．60％）比例多；6个优势菌属（检出率＞1％），分别为链球菌属（Streptococcus，70．28％）、颗粒链菌属（GranuIicatella，6．20％）、孪生菌属（Gemella，3．10％）、韦永氏球菌属（Veillonella，1．81％）、奈瑟菌属（Neisseria，1．03％）和嗜血杆菌属（Haemophilus，1．03％），其中链球菌属在8个样本中均出现。结论：保安族口腔健康儿童唾液微生物群落结构较为丰富；链球菌属为主要优势菌。
