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人类羊膜细胞的神经生物学特性研究现状
羊膜位于胎儿绒毛膜的表面,为光滑、无血管、无神经、无淋巴的透明薄膜,厚约0.02-0.50mm,由羊膜上皮细胞、基底膜和基质组成.形成于原肠胚之前的受精第8天,羊膜组织细胞保持有前原肠胚胚胎细胞的可塑性,羊膜组织主要由来源于外胚层的羊膜上皮(amniotic epithelial cells,AECs)和来源于中胚层的羊膜间充质(amniotic mesenchyme cells,AMCs)两类细胞组成[1],羊膜上皮细胞具有三种胚原基层细胞的分化潜能,内胚层、中胚层和外胚层[2].神经发育生物学研究认为神经发生早期,羊膜组织直接与神经上皮联系,向羊水中释放神经递质及神经营养因子,在神经系统发育过程中起着重要作用.由于羊膜组织是来源于胎儿的产物,暴露于母体免疫系统监视下,AECs表面人类白细胞抗原DR遗传座位(human leucocyte antigen-DR,HLA-DR)低表达,不表达HLA-A,B,C抗原[3],此外,羊膜组织系产后废弃物无伦理学问题;羊膜组织细胞来源充分,具有神经细胞的神经生物学特点和功能,利用上述优势使羊膜组织细胞有望成为再生医学领域的可靠细胞来源,开展细胞移植治疗神经系统退行性疾病和外伤性神经损伤.
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上皮间质转化与肿瘤侵袭转移
上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)是指上皮细胞在各种因素的刺激下,失去细胞极性,转化为间质细胞的过程[1].EMT在胚胎发育时发生,参与了胚胎发育的各个阶段,它在发育的初级阶段参与了原肠胚、神经嵴的形成,次级阶段参与了胰腺、肝脏和生殖道的形成,第3阶段参与心脏重构.EMT除在胚胎发育中发挥作用,也参与组织损伤修复,上皮组织的伤口愈合过程中,增生的上皮细胞移行到伤口部位进行修复的过程,也是一种EMT[2].
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胚胎心肌干细胞体外的分化
目的 鸡胚原肠胚形成期含有心肌干细胞(cardiac stem cell, CSC)的生心区原条组织离体后体外培养,使其增殖分化成具有舒缩功能的心肌组织.方法 改良滤纸鸡胚胎整体培养法取胚,37℃孵箱孵育,待胚胎发育到原肠胚的HH4期,无菌环境内选择性离体胚胎生心区原条组织(原条组织的前25%～40%)于10%FBS DMEM-F12培养基中培养,2～5 d后得到局部跳动的细胞组织,通过原位杂交、免疫组织化学、DiI示踪和细胞的超微结构鉴定是否分化为心肌组织.结果 FGF8特异性表达于心管和神经管;N-cadherin特异性表达于心管、神经管和体节;DiI标记的细胞迁移参与心管的形成;细胞的超微结构显示心肌组织特有的结构--闰盘.结论 CSC体外培养可以定向分化发育成心肌组织,为进一步研究心肌细胞的发育分化和生理药理学实验提供了良好的平台.
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人类胚胎干细胞的生物学特点和多向分化
成体组织干细胞具有可塑性,并能跨胚层来源"横向"分化[1],然而早期胚胎组织干(Embryonic stem,ES)细胞更具有分化全能性.ES细胞是胚胎发育早期-囊胚的内细胞团(Innercell mass,ICM)中未分化细胞,于形成胚盘外胚层后在原肠胚阶段分化为三个胚层(Embryonicgerm layers),再进一步分裂成个体.囊胚阶段分离培养ES细胞可无限增殖传代同时保持分化全能性[2].现对人类ES细胞(hESC)的细胞系建立,生物学特性,体内外多向分化和应用于临床治疗必须解决的问题作一综述.
