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抗人成骨肉瘤杂交瘤细胞系的建立及单克隆抗体特性
目的:建立抗人成骨肉瘤单克隆抗体杂交瘤并对杂交瘤细胞及抗体特性进行研究.方法:利用我室自建的成骨肉瘤细胞系(OS-9607)免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞Sp2/0融合,经筛选和克隆化,制备杂交瘤细胞系,用免疫组化ABC方法研究杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体特性.结果:制得2株能持续、稳定分泌抗体的杂交瘤细胞系.其中6E7和5D3株杂交瘤细胞经过100 d连续培养,单克隆抗体6E7 mAb和5D3 mAb分泌稳定、特异性强、效价高.免疫组化检测结果发现,6E7 mAb和5D3 mAb相应抗原在成骨肉瘤组织及成骨肉瘤细胞系呈高度表达(80%),10种正常组织中未见阳性反应;中度以上染色者占阳性总数的80%以上,6E7 mAb主要分布于细胞核上,5D3 mAb主要分布于细胞质内.结论:此2株杂交瘤细胞分泌的单克隆抗体具有成骨肉瘤细胞特异亲合性,它们的成功研制为发现新的成骨肉瘤生化标志、成骨肉瘤的早期诊断及免疫治疗提供了可能性.
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人成骨肉瘤及骨纤维结构不良组织p53,p16及Rb表达的意义
目的:探讨人成骨肉瘤组织、成骨肉瘤细胞系(OS-9901)及骨纤维结构不良组织中突变型p53,p16及Rb基因的表达及意义.方法:采用免疫组织化学ABC方法对60例成骨肉瘤标本、一株成骨肉瘤细胞系及14例骨纤维结构不良组织中p53,p16及Rb基因的表达进行检测.结果:p53,p16及Rb基因在上述两种组织中均有表达,但阳性率各异.在60例骨肉瘤标本中的阳性表达率分别为45%,60%及55%.不同组织学类型的骨肉瘤标本阳性表达率无明显差异(P＞0.05);在14例骨纤维结构不良组织中有4例p53阳性(28%),4例p16阴性(28%)及3例Rb阴性(21%);成骨肉瘤细胞系OS-9901中有明确的p16及Rb基因表达但未见p53基因阳性表达.结论:突变型p53蛋白的过表达及p16及Rb蛋白的表达缺失是成骨肉瘤发生发展中的重要分子事件;成骨肉瘤细胞系OS-9901中未见上述3种肿瘤抑制基因表达的异常改变,说明该例肿瘤的发生、发展可能存在着其它基因改变;14例骨纤维结构不良组织中抑癌基因的异常表达为支持骨纤维结构不良为真性肿瘤理论提供了理论依据.
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Stathmin基因反义核酸对人成骨肉瘤细胞系的生长抑制作用
目的探讨Stathmin基因的反义核酸(AS-ODN)对人成骨肉瘤细胞系的生长抑制作用,并观察与化疗药物合用后的协同作用. 方法以高表达Stathmin的人成骨肉瘤细胞系SOSP-9607为靶细胞、反义Stathmin(AS-ODN)为阻断剂,通过MTT试验观察AS-ODN对成骨肉瘤细胞的生长抑制作用及与紫杉醇(PTX)的协同作用,流式细胞仪分析细胞增殖周期的影响. 结果 AS-ODN及AS-ODN与PTX联合应用均明显抑制成骨肉瘤细胞的生长(P<0.05, P<0.01). SOSP-9607在AS-ODN作用下,细胞分裂阻滞在分裂期的中期,并诱导细胞发生凋亡. 结论 Stathmin基因的反义核酸(AS-ODN)对成骨肉瘤细胞的生长可能起十分重要的作用,它有望成为成骨肉瘤治疗的新靶点,与抗癌药联合应用有协同作用.
关键词： Stathmin基因 反义核酸 成骨肉瘤 细胞系 -
人成骨肉瘤组织中bcl-2,bax和c-fos基因表达及意义
0 引言肿瘤细胞凋亡的失控与肿瘤组织的生长关系密切.近年来,关于肿瘤细胞凋亡基因的异常表达与肿瘤细胞凋亡关系的研究已为肿瘤分子生物学研究的热点.bcl-2和bax是一对调控细胞凋亡的重要基因.研究发现bcl-2和bax间的比率关系决定细胞的凋亡状态[1].fos基因是从两种小鼠的反转录病毒FBJ和FBR中得到的,两者都能诱发成骨肉瘤[2].我们旨在了解Bcl-2,Bax和c-Fos蛋白在人成骨肉瘤细胞中的表达情况,以进一步探讨它们在成骨肉瘤发生、发展中的作用.
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成骨肉瘤患者TH1/TH2亚群漂移研究
通过观察成骨肉瘤患者辅助性T淋巴细胞中Th1/Th2亚群的变化，为细胞因子免疫治疗提供依据.作者应用放射免疫法以及酶联免疫吸附法检测成骨肉瘤患者血清中IL-2，IL-4，IL-6，TNF-α的含量，检测外周血单个核细胞培养上清中IL-2，IL-4含量.发现成骨肉瘤血清中及培养上清中IL-2减少，而IL-4，IL-6，TNF-α含量增加.因而得出结论：成骨肉瘤患者中存在有Th1/Th2平衡失调，其中Th1亚群功能抑制Th2功能抗进，它们与肿瘤在宿主体内生长密切相关. (张惠中)
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保肢术治疗骨肉瘤的整体化护理
骨肉瘤是一种常见的恶性肿瘤,好发于生长活跃的骺端.其特点是恶性瘤细胞直接形成骨肉瘤,危害大,可直接造成肢体残疾.常见于青少年,男多于女,约为2:1.以往治疗骨肉瘤以截肢术为主,此方法不但对瘤不能彻底根治,术后病员存活时间短,而且手术的大面积创伤在身心上都给病员以沉重……
