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乳腺原发性骨肉瘤1例
乳腺成骨肉瘤属骨外骨肉瘤,临床罕见,我们现报告1例.
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成骨肉瘤患者化疗所致呕吐1例的观察及护理
在临床上成骨肉瘤患者化疗时常出现严重的呕吐现象,需要有简单有效的方法来帮助患者减轻痛苦.笔者对1例患者的化疗疗程进行了观察,现总结如下.
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应用抑制性消减杂交技术鉴定肿瘤转移抑制相关基因
目的克隆与肿瘤转移抑制相关的基因, 探讨成骨肉瘤转移的分子机理.方法采用抑制性消减杂交技术构建了人成骨肉瘤低转移细胞株SOSP-9607的消减文库,对部分克隆进行了测序和同源性分析,用Northern杂交及反转录PCR技术证实了克隆的表达情况.结果在低转移细胞株SOSP-9607中高表达的克隆中有2个克隆与人端粒结合因子2(telomeric repeat binding factor 2,TERF2)同源.Northern杂交及反转录PCR证实这个基因只在低转移细胞中表达,而在高转移人成骨肉瘤细胞株SOSP-M和裸鼠肺转移结节中均未表达.结论 TERF2可能在维持肿瘤细胞自身相对稳定、抑制骨肉瘤演进中起重要作用.
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股骨下端骨肉瘤溃破出血一例
骨肉瘤为青少年常见恶性骨肿瘤,生长迅速,预后差.我科于1997年4月收治一例右股骨下端成骨肉瘤溃破出血致失血性休克,经抢救成功.现报道如下.
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成骨肉瘤早期临床表现特点
目的 试图找出成骨肉瘤早期临床表现的特点和规律,为其早期诊断提供帮助. 方法 1984年4月～2002年10月,收治成骨肉瘤92例,对其中71例记录及检查齐全的患者首次就诊时的临床表现、诊断和确诊拖延的时间等进行调查和记录.男42 例,女29 例.年龄6～66岁,平均17.4 岁.病程1～28周,所有患者均经病理诊断证实为四肢的成骨肉瘤,其中股骨下段38例,胫骨上段22例,股骨上段3例,腓骨上段3例,肱骨上段2例,胫骨下段2例,桡骨远端1例. 结果 71例患者中,有70例患者首次就诊为局部疼痛和/或包块.37例有昼夜无明显区别的持续性疼痛,23例为间隙性痛, 11例为夜间痛.42例初疼痛的出现与外伤有关,其中3例发生病理性骨折.首诊有局部包块者,医生拖延诊断时间1～14周,平均4周;未发现局部包块者,医生拖延诊断时间为3～30周,平均14周.首诊X线片检查者,医生拖延诊断时间1～20周,平均8周;未行X线片检查者,医生拖延诊断时间为4～30周,平均16周. 结论 间隙性和持续性疼痛及局部包块是成骨肉瘤患者早期具特征性的表现,外伤往往是发现早期成骨肉瘤症状的一个因素.对关节周围出现疼痛且反复发作的青少年患者应给予细致的临床检查和观察.
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抗人成骨肉瘤杂交瘤细胞系的建立及其特性鉴定
目的建立分泌抗人成骨肉瘤单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的 mAb进行鉴定.方法用成骨肉瘤细胞系(OSPS-9607)免疫Balb/c小鼠,取脾细胞按常规方法融合、筛选、克隆化及腹水mAb制备.取骨肉瘤手术标本(60例)及正常组织(6种),用mAb进行免疫组化ABC染色.结果筛选出2株能持续、稳定分泌特异性抗骨肉瘤mAb的杂交瘤细胞株(6E5和3F7).2株杂交瘤细胞经过100 d连续培养,分泌mAb的特性稳定、mAb特异性强、效价高.免疫组化染色检测表明,mAb 6E5和3F7针对的抗原,在成骨肉瘤组织及成骨肉瘤细胞系均呈高表达(70%).针对mAb 6E5的抗原主要分布于细胞核上,针对mAb 3F7的抗原主要分布于细胞浆内.6种正常组织中除胃粘膜可见弱阳性反应外,其余未见明确的阳性反应.结论此两株杂交瘤细胞分泌的mAb对成骨肉瘤细胞具有特异亲和性,为成骨肉瘤的早期诊断、免疫治疗及发现成骨肉瘤新的标志物奠定了基础.
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抗成骨肉瘤 mAb的制备、鉴定及其细胞毒效应
目的建立抗人成骨肉瘤 mAb杂交瘤细胞系并对其抗体特性进行研究。方法利用我室自建的骨肉瘤细胞系 (OS— 9607)免疫 Balb/c小鼠，取小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞 Sp2/0进行融合，经筛选和克隆化后，建立杂交瘤细胞系。以免疫组化和 Western Blot等方法研究抗体特性，以 MTT法研究细胞毒作用。结果得到 1株能够稳定分泌抗体，效价高的杂交瘤细胞系 3D9，免疫组化结果显示着色区主要分布在细胞核上，相应抗原在成骨肉瘤标本和成骨肉瘤细胞系高度表达 (83％ )，正常组织未见表达， Western Blot 显示 3D9相应分子量为 Mr 54 000。 MTT法示该抗体对成骨肉瘤细胞的杀伤率明显高于对照组。结论得到的杂交瘤细胞系分泌的 mAb体具有成骨肉瘤细胞特异亲和性，并有一定的细胞毒效应，可能成为新的成骨肉瘤生化标志，在肿瘤的免疫治疗方面有广阔的应用前景。
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快速cDNA末端扩增技术在钓取未知基因中的应用
全长cDNA的克隆是目前人类基因组研究中的一个重要方面.对一段不完整的cDNA序列,克隆其全长的方法,包括cDNA文库筛选法[1]和快速cDNA末端扩增法(rapid amplification of cDNA ends, RACE)[2].cDNA文库筛选法烦琐、工作量大、费用昂贵;而RACE技术灵敏、快速.MSP2为本实验室应用mRNA差异显示技术克隆到的可能参与肿瘤转移抑制过程的一种新的基因片段,长481bp.经计算机分析它具有编码区特征,Northern blot 分析显示其mRNA约2.0 kb左右[3].我们采用RACE技术,对其5 ' 端和3'端进行了扩增,获得了基因全长.
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骨病2例误诊报告
病例1:右胫骨骨髓炎误诊为成骨肉瘤.男性,26岁,4个月前右内踝挫伤,用中西药外敷及注射青霉素,但局部形成肿块,并逐渐增大至4cmX 4cm.X线拍片显示右胫骨内踝上方骨皮质呈花边状骨膜增生及放射针状阴影,诊断为骨肉瘤入院.入院后经抗菌治疗显著好转.于是在腰麻下取活检,当切开包块时可见坏死组织及小死骨片.冰冻切片报告未见癌细胞,确诊为外伤性组织慢性炎症.随访6年余无复发,低毒力细菌感染慢性骨髓炎常是以骨膜或骨增生为主.本例单凭花边状及放射针状骨膜增生而误诊为成骨肉瘤.
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胫骨成骨肉瘤的保肢治疗
目的探讨胫骨成骨肉瘤的保肢治疗.方法对1992年～2001年收治的胫骨成骨肉瘤75例,采用插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活,辅以手术前、后化疗及术后免疫治疗,并按Enneking标准评价肢体关节功能.结果平均随访4.5年,术后6个月～2.2年内因肿瘤转移而死亡者17例,存活58例,存活率77.3%.存活者中,3例因局部复发而截肢,1例复发者行瘤段截除大段异体骨植骨融合.对58例肢体关节功能评价:优39例;良15例;因复发行瘤段截除大段异体骨融合者可;3例截肢者配带假肢功能差.结论插入式微波天线阵列诱导高温原位灭活胫骨成骨肉瘤,并辅以化疗、免疫治疗,安全、有效,可望普及推广.
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CD147在骨肉瘤中的表达及其临床意义
目的:研究CD147在骨肉瘤中的表达情况,探讨其与临床病理及预后的关系.方法:用S-P免疫组织化学染色法对76例骨肉瘤CD147蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析.结果:CD147在骨肉瘤中呈普遍阳性表达,对照组骨软骨瘤、骨瘤和正常骨基本不表达.CD147蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与软组织侵犯、WHO分型和预后相关.结论:骨肉瘤CD147蛋白的表达与肿瘤恶性程度和侵袭性密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值.
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CD147在骨肉瘤中的表达及其临床意义
目的研究CD147在骨肉瘤中的表达情况,探讨其与临床病理及预后的关系.方法用S-P免疫组织化学染色法对76例骨肉瘤CD147蛋白的表达进行检测,并对其与骨肉瘤临床病理及预后的关系进行统计学分析.结果CD147在骨肉瘤中呈普遍阳性表达,对照组骨软骨瘤、骨瘤和正常骨基本不表达.CD147蛋白表达与Enneking分期和Price分级呈正相关,与软组织侵犯、WHO分型和预后相关.结论骨肉瘤CD147蛋白的表达与肿瘤恶性程度和侵袭性密切相关,对骨肉瘤诊断和预后评估具有重要价值.
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肋骨成骨肉瘤1例报告
男,12岁,发现左前胸壁局限性隆起2月余.查体示左前胸壁乳头内下方局限性隆起,约6 cm×6 cm大小,质硬,不活动,无压痛,边界不清,皮温不高,无皮肤静脉怒张.
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胸壁骨外成骨肉瘤1例报告
患者男,22岁.胸部钝痛伴咳少量脓痰,诊断为侧胸膜腔积液并抗痨治疗1月,咳嗽、咳痰消失,胸痛好转,复查胸部平片胸膜腔积液增多,穿刺抽液,淡红色.外院CT报告:右肺中叶实变,相应胸膜增厚及肋骨溶骨性破坏.经皮肺穿活检:(右肺)陈旧性囊性肿物.
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早期生长反应基因1对成骨肉瘤Saos-2细胞Stathmin基因的表达调控
目的:观察甲期生长反应基因1(Egr1)对成骨肉瘤细胞Saos-2中stathmin基因表达调控的影响.方法:构建Egr1真核表达载体,应用脂质体转染人成骨肉瘤Saos-2细胞,采用RT-PCR检测转染细胞的Egr1及stathmin mRNA表达的变化;Western Blot和免疫细胞化学染色检测stathmin蛋白表达;MTT法检测转染细胞生长状况;原位末端标记(TUNEL)检测细胞凋亡情况.结果:RT-PCR榆测发现Egr1表达水平明显高于空白对照组,stathmin mRNA表达水平显著降低,转染细胞stathmin蛋白表达水平明显降低.MTT法结果显示Egr1可显著抑制Saos-2细胞的生长,TUNEL阳性细胞明显增加.结论:转录调控因子Egr1参与stathmin基因转录调控并可抑制其表达,进而促进Saos-2细胞凋亡.
关键词： 转录因子 成骨肉瘤 基因转染 Stathmin基因 基因表达调控 -
微波诱导鼠成骨肉瘤细胞凋亡的研究
目的:探讨微波诱导鼠成骨肉瘤细胞系UMR 106细胞凋亡及其适宜作用剂量、作用时间.方法:以微波不同剂量和时间作用于鼠成骨肉瘤细胞系,采用形态学观察、MTY法、软琼脂集落形成实验、FCM等方法观察微波诱导成骨肉瘤细胞的凋亡.结果:不同剂量的微波照射大鼠成骨肉瘤细胞后细胞形态发生了改变,随照射剂量的增高,细胞逐渐脱离基质;成骨肉瘤细胞在不同剂量的微波进行相同时间(1 h)照射下存活率均显著下降,并呈剂量依赖性;微波作用于UMR 106细胞的IC50为100 W/m2微波辐射下不同时间后,细胞的存活率显著下降,呈时间依赖性;微波辐射下大鼠成骨肉瘤细胞出现G1期阻滞.结论:微波辐射可诱导大鼠成骨肉瘤细胞凋亡,其佳作用时间和剂量为1 h和100 W/m2.
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应用抑制性消减杂交技术筛选成骨肉瘤转移相关基因
目的: 探讨与人成骨肉瘤转移相关的基因表达变化. 方法: 通过抑制性消减杂交技术从一对同一亲本、转移表型不同的人成骨肉瘤细胞株中分别提取细胞总RNA,筛选差异表达基因并测序,将结果与核酸数据库进行同源性比较. 结果: 获得12个在低转移成骨肉瘤中高表达的、均与已知的人类基因片段有很高同源性的核甘酸片段. 结论: 差异表达的基因可能与成骨肉瘤细胞转移生物学特性呈密切相关,特别是在维持肿瘤细胞自身稳定、防止转移中起重要作用.
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成骨肉瘤组织中stathmin基因的表达意义
目的明确stathmin基因在人成骨肉瘤组织有高表达并对其进行组织学定位.方法用地高辛标记全长stathmin基因,原位杂交方法检测stathmin基因在45例人成骨肉瘤组织及10例正常组织中的表达情况.结果在45例成骨肉瘤组织中有24例stathmin基因呈阳性表达(阳性率53%),阳性颗粒可见于胞质及胞核;10例正常组织中2例呈弱阳性表达,差异显著(P<0.05).结论 Stathmin基因在骨肉瘤中的高表达与骨肉瘤的发生、发展有重要的相关性,该基因有望成为人成骨肉瘤生物治疗中的重要靶基因.
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鼠源性抗人成骨肉瘤抗体轻链基因克隆及其结构分析
目的扩增与人成骨肉瘤细胞特异结合的鼠源性单克隆抗体轻链基因,并对其基因序列进行分析. 方法用RT-PCR方法从分泌鼠源抗人成骨肉瘤单克隆抗体的杂交瘤细胞(7F6B)扩增出抗体轻链基因, 克隆到pGEM-T载体, 以全自动测序仪测定其轻链基因序列并对其结构进行分析. 结果 7F6B轻链基因由656 bp组成,编码218个氨基酸,序列分析证实该基因可变区序列符合小鼠Ig 轻链基因的氨基酸序列特征. 结论获得的鼠源性抗成骨肉瘤抗体轻链基因为κⅢ家族,该结果为进一步探讨人成骨肉瘤的免疫治疗研究奠定了基础.
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超抗原葡萄球菌肠毒素A在体外激活淋巴细胞抗成骨肉瘤的作用
目的:探讨超抗原葡萄球菌肠毒素A(SEA)对成骨肉瘤患者外周血淋巴细胞的增殖及杀伤活性的调节作用.方法:分离成骨肉瘤患者外周血淋巴细胞,体外分别经PHA,SEA和SEA加IL-2刺激后,3H-TdR参入法检测淋巴细胞的增殖水平,MTT间接比色法检测活化的淋巴细胞对人成骨肉瘤细胞(SOSP-9607)的杀伤活性.结果:淋巴细胞经SEA刺激24 h后增殖和杀伤活性明显增强且呈剂量依赖性(P＜0.05),增殖活性在第4天达高峰,杀伤活性在第3天达高峰,然后明显下降.但事先加入IL-2可避免这一现象,同时IL-2和SEA对淋巴细胞的杀伤活性具有协同作用.结论:SEA辅以IL-2能高效激活成骨肉瘤患者淋巴细胞的功能,有望成为成骨肉瘤免疫治疗的辅助药物.
