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  • 活化α7烟碱型乙酰胆碱受体对呼吸机相关肺损伤模型大鼠的保护机制研究

    作者:朱庆程;谈定玉

    目的 评价激活α7烟碱型乙酰胆碱受体对大鼠呼吸机相关肺损伤的影响.方法采用随机数字法将32只雄性Sprague Dawley大鼠分为:对照组(C组)、机械通气组(V组)、烟碱预处理+机械通气组(N组)、甲基牛扁碱(MLA)+烟碱+机械通气组(MLA组),每组8只.C组大鼠气管插管后不进行机械通气,保留自主呼吸,其余各组大鼠机械通气2h.N组大鼠在机械通气前30 min腹腔注射1 mg/kg的烟碱;MLA组大鼠在腹腔注射烟碱前30 min先腹腔注射1 mg/kg的MLA,其余各组大鼠腹腔注射等量等渗NaCl溶液.机械通气结束后即刻处死大鼠,计算各组大鼠肺组织湿重/干重、苏木素-伊红(HE)染色、肺组织损伤病理学评分,并采用Western-blotting检测白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)蛋白表达水平.结果C组大鼠肺泡形态结构正常;V组大鼠肺泡形态结构破坏,大量炎症细胞浸润;N组大鼠肺泡形态结构稍破坏,少量炎症细胞浸润;MLA组大鼠肺泡形态结构破坏,肺泡萎陷,较多炎症细胞浸润.4组大鼠肺组织湿重/干重、损伤评分、IL-1β、IL-6及TNF-α蛋白表达水平比较,差异均有统计学意义(F=168.009、647.579、138.005、192.706、178.094,P均<0.05).进一步两两比较发现,V组大鼠肺组织湿重/干重、损伤评分、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平均较C组更高(P均<0.05);N组大鼠湿重/干重、损伤评分、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平均较V组明显降低(P均<0.05);MLA组大鼠肺组织湿重/干重、损伤评分、IL-1β、IL-6、TNF-α蛋白表达水平均较N组明显升高,差异有统计学意义(P均<0.05).结论烟碱对呼吸机相关肺损伤的大鼠模型具有保护作用,其机制与激活α7-nAChR有关.

  • 烟碱型乙酰胆碱受体α3-nAChR和α7-nAChR在口腔癌中的表达

    作者:牛文雯;张敏;景新颖;董蕊;张剑飞;汤晓飞

    目的:研究烟碱型乙酰胆碱受体α3-nAChR和α7-nAChR在口腔鳞状细胞癌( oral squamous cell carcinoma, OSCC)中的表达,为口腔癌发病机制的研究提供实验依据。方法随机选取20例福尔马林固定的口腔鳞状细胞癌组织标本,10例正常口腔黏膜作为对照。采用免疫组织化学染色和荧光定量PCR方法,检测烟碱型乙酰胆碱受体α3-nAChR和α7-nAChR在OSCC中的表达。结果口腔鳞状细胞癌中α3-nAChR的mRNA水平是正常口腔黏膜的3.97倍( P <0.05),蛋白表达水平显著高于正常口腔黏膜( P <0.05),α7-nAChR 的mRNA水平是正常口腔黏膜的8.41倍( P<0.05),蛋白表达水平也显著高于正常口腔黏膜( P<0.05)。结论α3-nAChR、α7-nAChR与烟草相关口腔鳞状细胞癌的发生密切相关,在 OSCC治疗中有望成为有价值的分子靶点。

  • 尼古丁对小胶质细胞炎性反应的作用

    作者:崔小芬;李鑫鑫;张丽丽;王娜;关艳中

    目的 观察尼古丁在小胶质细胞炎性反应中的作用.方法 将培养的小胶质细胞系(BV-2)分为6组:对照组、谷氨酸组、尼古丁组、谷氨酸+尼古丁组、谷氨酸+高浓度尼古丁组、谷氨酸+尼古丁+α—银环蛇毒素组,培养24h、48h,用ELISA法检测外源性尼古丁对TNF-α及IL-1β的作用.结果 (1)谷氨酸(浓度500μmol/L)使小胶质细胞表达TNF-α及IL-1β增多;(2)尼古丁(浓度10μmol/L)抑制小胶质细胞表达TNF-α及IL-1β;(3)加入α-银环蛇毒素后,α7-nAChR被阻断,尼古丁(浓度1Oμmol/L)使小胶质细胞表达TNF-α及IL-1β增多.结论 (1)谷氨酸可引发小胶质细胞释放炎性因子(TNF-α及IL-1β);(2)尼古丁抑制小胶质细胞释放炎性因子TNF-α及IL-1β;(3)尼古丁抑制作用是通过小胶质细胞膜上的α7-nAChR实现.

  • α7-nAChR在肺癌中的表达和临床意义

    作者:黄华;王穆斌;苏春香;金惠;陈英;严玉兰

    目的:检测α7-烟碱型乙酰胆碱受体(α7-niccotinic acetylcholine receptor,α7-nAChR)在肺癌组织中的表达,探讨其与临床病理学特征的关系及意义.方法:采用免疫组织化学染色法检测130例肺癌组织及40例癌旁肺组织中α7-nAChR表达,并分析α7-nAChR表达与吸烟、病理分型、分化程度、临床分期、淋巴结转移等关系.结果:肺癌组织α7-nAChR阳性表达率70.77%,癌旁组织阳性率37.50%,肺癌组织中α7-nAChR阳性表达水平明显高于癌旁组织(P< 0.001).肺癌组织中α7-nAChR的表达水平与肺癌患者吸烟、临床分期、分化程度相关(P<0.05),与患者的性别、年龄、肿瘤大小、病理分型、淋巴结转移之间的关系无统计学意义(P>0.05).结论:α7-nAChR高表达在肺癌的发生中起一定作用,可为肺癌的α7-nAChR靶向治疗提供一定依据.

  • α7-nAChR在海马星形胶质细胞上的表达

    作者:王妍;张忠义;王勇

    目的 探讨α7-nAChR亚基在体内、体外海马星形胶质细胞上的表达.方法 从大鼠脑中分离海马后进行冰冻切片,采用免疫荧光双染技术,首先用抗-GFAP抗体对星形胶质细胞进行鉴定,再观察α7-nAChR在星形胶质细胞上的表达.体外表达的研究在培养星形胶质细胞上进行,先分离获得新生SD大鼠的海马组织,提取并培养海马星形胶质细胞,纯化鉴定后,用配体结合实验和细胞免疫荧光双标分析α7-nAChR在星形胶质细胞上的表达.结果 海马组织中抗-GFAP染色阳性的细胞抗-α7-nAChR染色也呈阳性,但仅部分抗-α7-nAChR染色阳性的细胞抗-GFAP染色也呈阳性.体外纯化后的星形胶质细胞既能与FITC标记的α-BTX结合,荧光染色呈阳性,同时,细胞免疫荧光双标分析显示星形胶质细胞抗-GFAP和抗-α7-nAChR染色均呈阳性.结论 α7-nAChR在体内体外星形胶质细胞上均能正常表达.

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