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DNA芯片检测肝组织及血清中乙型肝炎病毒DNA的临床研究
目的研究DNA芯片检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的应用价值.方法用点样仪将聚合酶链反应(PCR)扩增的HBV DNA探针制成基因芯片.对15例慢性乙型肝炎病人的血清和肝活检组织,99例乙型肝炎后肝硬化肝组织,分别用基因芯片、原位分子杂交、免疫组织化学和雅培试剂检测HBV DNA、乙型肝炎核心抗原(HBcAg)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)和乙型肝炎e抗原(HBeAg).结果用基因芯片对15份HBsAg、HBeAg阳性的乙型肝炎患者血清进行检测,HBV DNA均阳性,阳性率符合率为100%;15份肝活检组织标本,免疫组化法检测HBcAg阳性15例,原位分子杂交法和基因芯片检测HBV DNA均阳性14例,阳性率93%.99份肝炎后肝硬化患者肝组织标本,HBcAg阳性67份,HBV DNA阳性53份,基因芯片检测HBV DNA阳性46份,阳性率分别为69%、88%.32例HBcAg、HBV DNA阴性的肝组织中,基因芯片检测HBV DNA均为阴性.结论肝炎基因诊断芯片可检测肝组织及血清中HBV DNA,诊断准确率高,假阳性率低.
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乙型肝炎病毒感染在IgA肾病发病中的作用的进一步研究
目的:探讨乙型肝炎病毒(HBV)感染与IgA肾病发病的关系.方法:采用免疫组化技术检测168例IgA肾病患者肾组织中HBV抗原(HBAg),应用原位分子杂交技术和Southem印迹杂交技术检测95例IgA肾病患者肾组织中HBVDNA.结果:168例IgA肾病患者中,血清HBsAg阳性32例(19.05%);肾组织HBAg阳性59例(35.12%),HBAg在肾小球中阳性率为30.36%(51/168),其中HBsAg为27.98%(47/168),HBcAg为24.40%(41/168);除了肾小球,HBsAg和HBcAg肾小管上皮细胞亦有阳性沉积,分别为44例(26.19%)和48例(28.57%);Southern印迹杂交证实在95例患者肾组织中46例有整合型HBV DNA,阳性率为48.42%;原位分子杂交证实95例患者肾组织HBV DNA阳性率为52.63%(50/95),其中肾小管上皮细胞、肾小球细胞和肾间质浸润的淋巴细胞HIBV DNA阳性率分别为49.47%(47/95)、45.26%(43/95)和33.68%(32/95);其中18例患者肾组织中HBV DNA同时定位于肾小管上皮细胞、肾小球系膜细胞和少数间质淋巴细胞的细胞核中.结论:除了HBV抗原、抗体复合物所致体液免疫损伤外,也要考虑肾组织直接感染HBV,并参与了IgA肾病的发病.