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七方胃痛颗粒对H.pylori感染的AGS细胞TFF1表达及ERK/NF-κB信号通路的影响
目的:探讨七方胃痛颗粒对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylor1)感染的人胃腺癌AGS细胞三叶因子l(trefoil factor family 1,TFF1)的表达及其细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)/核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路的调控机制.方法:采用实时荧光定量PCR(RFQ-PCR)法检测TFF1 mRNA的表达,Western blot法检测TFF1、磷酸化ERK及NF-κB蛋白的表达水平；同时采用U0126抑制ERK信号通路后,观察AGS细胞TFF1蛋白表达的变化.结果:10％、20％、30％浓度七方胃痛颗粒药物血清作用H.pylori感染的AGS后,TFF1mRNA表达量为271±33、305±23、327±13,显著高于实验对照组的187±30,(P＜0.05)；TFF1、p-ERK及NF-κB蛋白表达量分别为271±22、358±31、428±34; 175±9、141±3、107±15; 116.0±2.6、83±2、53.0±6.6;与实验对组的210±13比较,差异具有统计学意义(均P＜0.05).加入U0126阻断ERK信号通路后,TFF1蛋白表达量为115±6,与实验对照组的210±13比较,差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:七方胃痛颗粒可能通过抑制ERK/NF-κB信号通路参与调控H.pylori诱导的AGS细胞TFF1表达,促进上皮修复,是其防治H.pylori诱发胃癌可能的机制之一.
关键词： 七方胃痛颗粒 AGS细胞 幽门螺杆菌 三叶因子1 ERK/NF-κB信号通路 -
七方胃痛颗粒对胃癌前病变TFF1基因DNA甲基化影响
目的：观察七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎癌前病变患者的临床疗效，并探讨七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎癌前病变胃黏膜上皮TFF1 mRNA表达水平及TFF1基因DNA甲基化的影响。方法40例胃癌前病变患者随机分为治疗组和对照组，治疗组服用七方胃痛颗粒，对照组用胃复春片。观察其临床疗效及治疗前后TFF1表达水平、TFF1基因DNA甲基化表达的变化。结果①七方胃痛颗粒治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变临床疗效显著优于胃复春。②与治疗前相比，2组TFF1 mRNA表达显著升高，TFF1基因DNA水平显著下降。结论七方胃痛颗粒可升高慢性萎缩性胃炎癌前病变TFF1 mRNA表达水平，降低TFF1基因DNA甲基化表达水平，对阻断疾病进一步发展有明显效果。
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七方胃痛颗粒对Hp感染性胃病小鼠的疗效及其对NOS的影响
目的:观察七方胃痛颗粒对小鼠Hp感染性胃病的疗效及其对NOS的影响.方法:清洁级BALB/c小鼠104只,随机分为2批(7d、28d),每批4组:空白对照组、阳性对照组、七方胃痛组、雷尼替丁组,每组13只.除空白对照组外,其余组的小鼠给予Hp菌液灌胃制成Hp感染性胃病小鼠模型.造模后第2d开始小鼠分别给予下述处理:阳性对照组生理盐水灌胃、七方胃痛组七方胃痛颗粒灌胃、雷尼替丁组雷尼替丁灌胃,空白对照组实验全程只给生理盐水灌胃.连续灌胃7d、28d后处死动物,观察Hp感染、胃黏膜炎症及nNOS、iNOS的表达情况.结果:(1)七方胃痛7d、28d两批Hp阳性率明显低于阳性对照组及雷尼替丁组;(2)七方胃痛组7d、28d胃黏膜炎症明显轻于阳性对照组及雷尼替丁组,且七方胃痛28d疗效优于7d;(3)七方胃痛7d、28d两批nNOS、iNOS表达强度明显低于阳性对照组及雷尼替丁组,且七方胃痛组28d显著低于7d.结论:动物实验证实,七方胃痛颗粒能增强胃黏膜防御能力,抑制Hp定植;七方胃痛颗粒能改善胃黏膜血流,减轻胃黏膜炎症;七方胃痛颗粒能降低Hp感染引起nNOS、iNOS高表达,保护胃黏膜,改善胃肠功能.
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七方胃痛颗粒对胃癌前病变TFF1和Ki-67抗原表达的影响
目的:观察七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎胃黏膜组织中TFF1和Ki-67抗原表达的影响.方法:40例胃癌前病变患者随机分为治疗组和对照组,治疗组服用七方胃痛颗粒,对照组服用胃复春片.应用免疫组化染色检测治疗前后TFF1和Ki-67抗原表达水平.结果:与治疗前比较,治疗组与对照组TFF1表达均明显升高,Ki-67表达均明显降低,TFF1与Ki-67的表达呈负相关.结论:七方胃痛颗粒对治疗慢性萎缩性胃炎癌前病变有明显效果,其机制可能是通过促进TFF1表达并降低Ki-67的表达来发挥对黏膜的保护作用.
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七方胃痛颗粒对胃癌细胞中Fas/FasL通路的影响
目的 探讨七方胃痛颗粒对胃癌细胞中Fas/FasL通路的影响.方法 参照血清药理学方法制备七方胃痛颗粒含药血清,以10％、20％、30％浓度七方胃痛颗粒含药血清作用SGC-7901胃癌细胞后,MTT法检测七方胃痛颗粒对SGC-7901细胞的生长抑制作用;Western Blot和RT-PCR法检测经七方胃痛颗粒干预前后胃癌细胞SGC-7901中Fas,FasL,FADD,Caspase-3、Caspase-8因子的蛋白及mRNA表达变化.结果 与空白对照组相比,七方胃痛颗粒能抑制SGC-7901的增殖(P＜0.05),并呈浓度、时间依赖性;中药血清干预后人胃癌细胞株Fas,FasL,FADD,Caspase-3、Caspase-8蛋白和mRNA表达升高,与空白对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05),并呈浓度、时间依赖性.结论 在体外试验中,七方胃痛颗粒能抑制SGC 7901的增殖并促进其凋亡,可能通过下调胃癌细胞Fas、FasL、FADD、Caspase-3、Caspase-8蛋白的表达水平,从而达到抗癌作用.
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加味七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜病理形态学的影响
[目的]观察加味七方胃痛颗粒对慢性萎缩性胃炎大鼠胃黏膜组织病理学改变的影响.[方法]将Wister健康大鼠120只按随机数字表法随机分成6组,20只空白组从一开始到取胃组织前均给予正常饮用水及食物,其余100只大鼠在饮用水中开始加入180μg/ml N-甲基-N'-硝基-N-亚硝基胍液(MNNG),饮用90 d后,从第91天开始,除空白组外,其它五组分别给予生理盐水、胃复春、加味七方胃痛颗粒大、中、小剂量灌胃,灌胃30 d后,禁食24h,剖取胃组织,沿胃小弯从前胃至幽门取全肌层壁2块,用10％甲醛固定,苏木精-伊红染色光镜观察.[结果]加味七方胃痛颗粒组和胃复春组均可以有效改善慢性萎缩性胃炎胃黏膜厚度、腺体萎缩,逆转肠化生及不典型增生.[结论]加味七方胃痛颗粒能明显改善慢性萎缩性胃炎大鼠受损胃黏膜组织的病理状况.
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七方胃痛颗粒对脾虚型萎缩性胃炎42例的疗效观察
目的 探讨七方胃痛颗粒对脾虚型萎缩性胃炎(CAG)患者的临床疗效.方法 将83例CAG患者随机分为2组,对照组41例采用临床常规方法进行治疗；治疗组42例采用常规方法治疗的基础上,加用七方胃痛颗粒治疗,疗程8周.结果 治疗组症状和病理改善明显优于对照组,治疗组的治愈率高于对照组(P＜0.05).结论 七方胃痛颗粒可以减轻CAG患者的症状、黏膜病变和病理改变,对逆转癌前病变有可喜苗头,值得进一步研究.
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七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞增殖凋亡的影响
目的:观察中药复方七方胃痛颗粒对人胃腺癌细胞(AGS)增殖和凋亡的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:不同浓度的七方胃痛颗粒药物血清处理AGS后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞周期、凋亡及增殖细胞核抗原(PCNA)、三叶因子1(TFF1)的表达.结果:不同浓度药物血清组AGS增殖抑制率显著高于对照组(P＜0.05),并呈浓度、时间依赖性；七方胃痛颗粒使AGS停滞在G0/G1期,细胞凋亡率增加(P＞0.05).七方胃痛颗粒药物血清处理后PCNA表达显著下调,TFF1表达显著上调(P＞0.05).结论:七方胃痛颗粒能抑制AGS的增殖,促进凋亡,其作用机制可能与上调TFF1的表达有关.
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七方胃痛颗粒对PU患者T淋巴细胞亚群与TNF-α的影响
目的:评价七方胃痛颗粒对消化性溃疡(PU)患者T淋巴细胞亚群分布与血清TNF-α水平的影响.方法:PU伴Hp阳性患者共80例纳入研究,分为治疗组与对照1组,各40例,并取20例健康成人做对比.治疗组、对照1组共80例均以奥美拉唑肠溶片、阿莫西林胶囊、甲硝唑片3联疗法根除Hp,治疗组加用七方胃痛颗粒,疗程6周.治疗前后行电子胃镜检查,并检测T淋巴细胞亚群分布与血清TNF-α水平.结果:疗程结束后,治疗组、对照1组两组总有效率相似,治疗组Hp根除率优于对照1组(P<0.05).治疗前治疗组、对照1组的CD4+、CD8+、CD4+/CD8+及TNF-α水平均明显异常,与健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01).疗程结束后,治疗组CD4+及CD4+/CD8+ 比值水平明显提高,CD8+与TNF-α水平明显降低,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01).结论:七方胃痛颗粒能有效的调节PU患者T淋巴细胞亚群分布以及TNF-α的表达,其防治PU的作用机制可能与调节免疫功能有关.
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NF-κB信号通路在七方胃痛颗粒调控H.pylori感染人胃腺癌细胞TFF1表达中的作用
目的:探讨核因子-κB(nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路在七方胃痛颗粒对幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)感染人胃腺癌细胞(human gastric cancer cells,AGS)三叶肽因子1(trefoil factor family 1,TFF1)表达中的作用.方法:采用实时荧光定量PCR观察H.pylori感染AGS TFF1 mRNA的表达;双荧光报告基因系统检测质粒载体TFF1(Wt)野生株和多个变异株报告基因瞬时转染AGS,TFF1基因转录情况及七方胃痛颗粒的干预效果,并分析TFF1启动子区NF-κB蛋白结合位点碱基序列区间;凝胶阻滞电泳(EMSA)确定TFF1启动子区NF-κB蛋白结合位点和七方胃痛颗粒对其的作用.结果:药物血清组TFF1mRNA表达及TFF1表达与其它组比较差异有统计学意义(P<0.05),TFF1(Wt)野生株和变异株基因转录表达较空白组均显著增加(P<0.01),TFF1(A)变异株基因表达显著低于Wt株(P<0.01),和其他TFF1变异株相比,差异有统计学意义(P<0.05),变异株之间比较差异无统计学意义(P>0.05);七方胃痛颗粒可降低NF-κB的DNA活性.结论:七方胃痛颗粒上调H.pylori感染AGS TFF1的表达,可能是通过NF-κB信号通路实现的.
