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TNF-α对胃癌细胞MMP-2和MMP-9表达的诱导作用
目的:探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)对胃癌细胞基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达的诱导作用.方法:以外源性TNF-α作用于胃癌细胞.未经TNF-α作用的胃癌细胞作为对照.采用ELISA法检测胃癌细胞培养上清液中MMP-2和MMP-9蛋白的含量.采用RT-PCR检测胃癌细胞MMP-2 mRNA和MMP-9 mRNA的表达状况.采用Western blot检测胃癌细胞内MMP-2蛋白和MMP-9蛋白含量.结果:不同浓度(1,10和100 μg/L)的TNF-α作用胃癌细胞后,胃癌细胞上清液中MMP-2的含量分别为8.24±1.36,23.65±3.45和14.83±2.54 ng/L,均显著高于对照组(1.56±0.23 ng/L,P＜0.01);MMP-9的含量分别为12.47±2.66,34.12±6.78和23.31±4.45 ng/L,亦均明显高于对照组(5.25±0.89 ng/L,P＜0.01),其中以10μg/L TNF-α作用时升高为显著.TNF-α作用胃癌细胞16 h后,上清液中MMP-2和MMP-9含量达到峰值,分别为23.65±3.45和34.12±6.78 ng/L.胃癌细胞MMP-2 mRNA和MMP-9mRNA表达明显增强,胃癌细胞内MMP-2和MMP-9蛋白表达亦明显增多.结论:TNF-α可上调胃癌细胞MMP-2和MMP-9表达.
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VEGF反义寡核苷酸对胆囊癌细胞VEGF,Flt-1及KDRmRNA表达和VEGF蛋白分泌的影响
目的:体外研究Oligofectamine介导的VEGF反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)转染对人胆囊癌GBC-SD细胞VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达和VEGF蛋白分泌的影响.方法:运用Oligofectamine介导的VEGF反义寡核苷酸(ASODN)和错义寡核苷酸(Scrambled Oligodeoxynucleotide,SODN)转染人胆囊癌细胞GBC-SD,半定量RT-PCR检测转染后各组细胞不同时间的VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达变化,ELISA测定转染后各组细胞培养上清液VEGF蛋白浓度.结果:半定量RT-PCR发现ASODN组及ASODN+Oligofectamine组24,48,72,96h VEGF (ASODN组VEGF165:0.686±0.033,0.569±0.049,0.489±0.036,0.716±0.017;ASODN组VEGF121:0.462±0.046,0.338±0.034,0.219±0.022,0.471±0.038;ASODN+Oligofectamine组VEGF165:0.601±0.021,0.465±0.042,0.416±0.023,0.662±0.035;ASODN+Oligofectamine组VEGF121:0.408±0.014,0.286±0.019,0.1 57±0.021,0.418±0.037)、Flt-1 (ASODN组:0.694±0.01 9,0.562±0.045,0.435±0.042,0.724±0.026;ASODN+Oligofectamine组:0.609±0.018,0.442±0.049,0.314±0.015,0.614±0.029)及KDR (ASODN组:0.667±0.063,0.490±0.033,0.301±0.029,0.665±0.068;ASODN+Oligofectamine组:0.523±0.048,0.432±0.027,0.21 8±0.036,0.524±0.037)mRNA的表达显著低于Contril组(P＜0.05),且ASODN+Oligofectamine的抑制作用比ASODN强(P＞0.05).ELISA测定结果显示ASODN组(281.26±1 8.62,526.44±34.95,791.1 3±20.99)及ASODN+Oligofectamine组(250.7±14.57,506.09±19.14,711.79±19.91)24,48,72 h VEGF蛋白的分泌浓度均显著低于Control组(394.23±1 6.26,711.6±26.21,933.85±28.65)(P＜0.05),且ASODN+Oligofectamine的抑制作用比ASODN强(P＞0.05).结论:Oligofectamine介导的VEGF ASODN能抑制GBC-SD细胞VEGF,Flt-1及KDR mRNA表达和VEGF蛋白分泌.
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戊型肝炎病毒疫苗作为人乳头状瘤病毒疫苗效果评价对照组的可行性及血清抗体危险因素分析
目的 研究女性人群戊型肝炎病毒抗体(HEV-IgG)和人乳头状瘤病毒抗体(HPV L1-IgG)的分布情况以及危险因素,探讨HEV疫苗免疫人群作为HPV疫苗人群免疫效果评价对照组的可行性.方法 对河南省新密地区952例女性人群进行筛查研究,通过问卷调查获得其人口学特征与危险因素.取每名受试者9 ml外周血,采用酶联免疫吸附方法检测同一研究对象HEV-IgG和HPV L1-IgG的水平.采用Logistic回归分析的方法描述影响HEV-IgG与HPV L1-IgG表达的危险因素.结果 研究人群的平均年龄为47.2岁,农民所占的比例为85.8％,低收入人群占44.5％.952例研究人群中,HPV L1-IgG的阳性率为26.8％ (255/952),HEV-IgG的阳性率为31.0％ (295/952),HEV-IgG与HPV L1-IgG的表达无关(P=0.749).HEV-IgG与HPV L1-IgG的表达水平基本随年龄增长而升高,不同年龄组的表达差异有统计学意义(均P ＜0.001).多因素分析显示,年龄(OR=1.050,95％ CI为1.031 ～1.069)、是否为低收入人群(OR=1.341,95％ CI为1.004 ～1.790)、是否为农民(OR=0.604,95％ CI为0.402～0.906)为HEV-IgG阳性影响因素;年龄(OR=1.022,95％ CI为1.001 ～1.043)、初次性生活年龄(OR=0.923,95％ CI为0.861 ～0.990)、是否接受过教育(OR=0.630,95％CI为0.423 ～0.939)为HPV L1-IgG阳性影响因素.结论 新密地区女性人群HEV-IgG与HPV L1-IgG的阳性率基本随年龄增长而升高;年龄是HEV-IgG与HPV L1-IgG的共同危险因素;HEV-IgG与HPV L1-IgG的检测未见交叉反应.
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病毒性肝病患者混合感染庚型肝炎病毒临床分析
我们采用酶链免疫吸附试验(ELISA)的方法检测患者血清中HGV-IgG,旨在了解肝病患者混合感染庚型肝炎病毒(HGV)的情况,进而了解其临床表现.由于用特异性的引物进行的反转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测方法较为复杂,成本也高,不利于进行临床的普遍检测,国内汪兴太和貌盼勇等[1～2],分别报道用人工合成的多肽作包被抗原,进行抗HGV 抗体的检测,获得较好的效果.ELISA法操作简单,成本低,可作为临床病人的初步检测.我们用ELISA法检测204份血清,其中有51例抗HGV-IgG阳性,我们分析这51例病旨在了解各类肝病患者混合感染GBV-G/HGV的临床表现.现报告如下:
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内皮细胞粘附分子在妊高征发病中的作用
目的:探讨内皮细胞粘附分子VCAM-1,ICAM-1在妊娠高血压综合征(妊高征)发病中的作用及与妊高征严重程度之间的关系.方法:选取妊高征25例,其中轻度8例,中度8例,重度9例,并与正常妊娠39例比较,采用酶链免疫吸附试验测定孕产妇临产前及产后1周血清VCAM-1、ICAM-1的水平.结果:妊高征患者血清VCAM-1及ICAM-1浓度产前显著高于产后(P＜0.01及0.05);产前血清VCAM-1浓度妊高征患者也显著高于正常孕妇(P＜0.01),产后差异无显著性;ICAM-1浓度与正常组相比差异无显著性;不同程度妊高征患者的血清VCAM-1、ICAM-1水平差异无显著性.结论:妊高征患者血清VCAM-1的升高与妊高征的发生有关,VCAM-1及ICAM-1水平高低不能准确反映妊高征严重程度.
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109例儿童弓形虫感染者血清学标志模式与Toxo-DNA的对比分析
目的探讨弓形虫IgG、IgM、CAg及Toxo-DNA对弓形虫感染的诊断意义.方法采用ELISA法检测弓形虫IgG、IgM和CAg,PCR法检测Toxo-DNA.结果109例弓形虫感染儿童中,弓形虫IgG、IgM、CAg及Toxo-DNA阳性率分别为63.3%、43.1%、38.5%和41.3%,后三项阳性率相互比较无统计学差异.71例弓形虫IgM(+)和/或CAg(+)(模式2、3、4、6、7、8)患者中,Toxo-DNA阳性38例,IgM和CAg同时阳性18例,IgM单项阳性29例,CAg单项阳性24例.6例弓形虫IgG(-)、IgM(-)和CAg(-)(模式1)患者Toxo-DNA均阳性.32例IgG(+)、IgM(-)、CAg(-)(模式5)患者中有1例Toxo-DNA呈阳性.结论弓形虫急性感染指标的弓形虫IgM、CAg及Toxo-DNA阳性检出率接近,但仅在部分病例可见2项或3项同时阳性,即三者符合率不是很高,提示联合检测弓形虫血清学标志及Toxo-DNA,有助于减少假阴性结果.
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莱姆病临床实验室诊断的研究现状
莱姆病是伯氏疏螺旋体感染引起的、累及皮肤、神经、关节、心脏等多系统的疾病.莱姆病的流行病学和临床特征与部分虫媒传播性或感染性疾病类似,临床诊断较困难.目前临床实验室对莱姆病的检测方法有分离培养、组织病理学检测、PCR、血清免疫学检测和生物芯片等.本文就莱姆病近年来临床实验室检测的研究现状作一简要综述.
