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屋尘螨致敏蛋白组分 Der p1、Der p2和 Der p10检测的临床意义
尘螨是常见的室内变应原来源之一，诱导人 IgE 反应主要的尘螨是屋尘螨和粉尘螨。为了解变应原 IgE 组分检测的临床诊断意义和作用，该文就 Der p1、Der p2和 Der p10的研究进展进行综述。
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过敏性哮喘小鼠树突状细胞负荷Der p2后改变及与T细胞增殖分化的关系研究
目的:探讨哮喘小鼠与正常小鼠骨髓源性树突状细胞(DC)负荷Der p2抗原后表达表面分子(CD11c、CD86)和细胞因子(IL-10、IL-12p70)的差异及其对Th1和Th2型细胞因子平衡的影响,进一步研究过敏性哮喘发生中DC的可能作用.方法:分别从哮喘组和对照组提取骨髓培养DC,第五天负荷Der p2,24小时后吹打收集细胞,观察DC形态,用流式细胞仪检测孵育后细胞表面CD11c、CD86表达.并留取负荷Der f2前后培养上清,ELISA法检测IL-10及IL-12p70含量.同时以DC:反应细胞比例为1:10混合培养,72 h后ELISA法检测混合培养上清中IL-4、IL-5、IFN-γ的水平.结果:①负荷Der p2后,哮喘组CD86、CD11c表达比对照组高,分别为(t=11,P＜0.05)(t=4.9,P＜0.05),差异有统计学意义;②在细胞因子分泌方面,Der p2负荷前,两组DC均能分泌IL-10与IL-12p70,IL-10水平哮喘组高(t=9.5,P＜0.05),而IL-12p70水平对照组高(P＜0.05);负荷Der p2后,对照组IL-10、IL-12p7分泌量比负荷前明显增加(P＜0.05),哮喘组无明显差异(P＞0.05);③在DC刺激同种T细胞因子分泌方面,负荷Der p2后哮喘组DC刺激T细胞分泌IL-4、IL-5分泌能力明显增强(P＜0.05),而刺激INF-γ能力降低(P＜0.05).结论:DC在过敏性哮喘中起着重要作用,异常DC通过增加CD86、CD11c的表达和减少IL-10及IL-12的合成,致使T细胞向Th2细胞优势分化.
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比较口服不同亲和力重组耻垢分支杆菌调节免疫的差异
目的:Th1与Th2的平衡紊乱是过敏性哮喘的免疫学基础,本研究通过给予小鼠口服免疫不同亲和力屋尘螨抗原Der p2重组耻垢分枝杆菌,来比较其调节免疫应答的差异.方法:1,分别给予6-8周BALB/c小鼠口服接种Mycobacterium Smegmatis(M.S)、pCW-Der p2-rM.S及pCW-Der p2-PEB1-rM.S,在末次免疫后第14、28、56天分别用夹心ELISA法测定小鼠血清及脾脏淋巴细胞培养上清中IFN-γ、IL-2及IL-4的含量.结果:夹心ELISA结果显示,无论是血清还是脾脏淋巴细胞培养上清中,各组IFN-γ、IL-2水平逐渐升高,IL-4水平逐渐降低,8周时更明显,pCW-Der p2-PEB1-rM.S组与M.S、pCW-Der p2-rM.S组相比有明显统计学差异.体外给予Der p2蛋白刺激后,pCW-Der p2-rM.S及pCW-Der p2-PEB1-rM.S组变化更加明显,而M.S组无明显变化.结论:小鼠口服免疫pCW-Der p2-PEB1-rM.S能明显提高Th1型免疫反应,与pCW-Der p2-rM.S组相比有统计学学差异.三种不同亲和力重组耻垢分枝杆菌经口服后均能诱导小鼠产生Th1型免疫应答,且pCW-Der p2-rM.S及pCW-Der p2-PEB1-rM.S诱导产生的Th1优势应答具有Der p2抗原特异性.本研究弥补了粘膜型疫苗低亲和力的不足,为新型口服疫苗的制备和改进创造了条件.
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屋尘螨变应原Der p2 T细胞表位疫苗对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果
目的：探讨屋尘螨变应原Der p2的4个T细胞表位融合肽对哮喘小鼠的特异性免疫治疗效果。方法30只雌性BALB/c小鼠随机分为3组，分别为阴性对照组（PBS组）、阳性对照组（哮喘组）以及Der p2 T细胞融合肽治疗组（Der p2 T组）。用屋尘螨粗提取液致敏小鼠建立哮喘模型，PBS组以PBS缓冲液代替，Der p2 T组分别于小鼠致敏第25～27天雾化致敏前30 min行背部皮下注射相应治疗蛋白。后一次雾化激发24 h后，收集各组小鼠血清及支气管肺泡灌洗液（BALF）。采用ELISA法检测小鼠BALF中IFN?γ、IL?4、IL?13以及血清中屋尘螨粗提取液致敏的特异性IgE、IgG2a抗体水平，并行肺组织切片HE染色。结果哮喘组小鼠BALF中的嗜酸性粒细胞数量为（5.57±0.64）×105个/ml，高于PBS组[（0.50±0.30）×105个/ml]（P<0.01）和Der p2 T组[（3.45±0.36）×105个/ml]（P<0.01）。PBS组、哮喘组、Der p2 T组小鼠BALF中IFN?γ含量分别为（267.00±21.98）、（155.80±20.53）pg/ml和（234.40±24.46）pg/ml；与哮喘组比较，Der p2 T组小鼠BALF中产生了较高的IFN?γ水平（P<0.01）。PBS组、哮喘组、Der p2 T组小鼠BALF中IL?4含量分别为（23.40±5.96）、（53.28±8.26）pg/ml和（30.00±5.50）pg/ml；与哮喘组比较，Der p2 T组小鼠BALF中IL?4含量显著降低（P<0.01）。与哮喘组[（308.10±28.32）pg/ml]比较，Der p2 T组小鼠BALF中IL?13含量[（174.50±25.99）pg/ml]显著下降（P<0.01）；PBS组鼠BALF中IL?13含量为（95.99±31.14）pg/ml。肺组织切片显示，Der p2 T组小鼠肺部炎症较哮喘组明显减轻，且炎性细胞浸润显著减少、气道上皮结构重塑。结论 Der p2 T细胞表位融合肽可有效改善哮喘小鼠变态反应性气道及肺部炎症，可作为屋尘螨哮喘患者特异性免疫治疗的候选疫苗。
