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反义硫代寡核苷酸对小鼠体内柯萨奇病毒B3增殖的抑制作用及其对心肌炎发病的影响
柯萨奇病毒B3(CVB3)是病毒性心肌炎常见的病原，CVB3所致Balb/C小鼠急性心肌炎模型稳定，为在机体筛选抗病毒药物奠定了基础，被广泛应用于病毒性心肌炎发病机制及药物治疗的研究。本研究目的是观察针对CVB3 RNA 5＇非编码区(5＇NCR)nt581-601序列的反义寡核苷酸(AODN)在小鼠体内对CVB3的抑制作用及其对小鼠心肌炎发病的影响。
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bFGF反义硫代寡核苷酸增强人喉鳞癌Hep2细胞的化疗敏感性
目的: 研究bFGF反义硫代寡核苷酸增强人喉鳞癌Hep2细胞对多柔比星、氟脲嘧啶及顺铂的敏感性.方法:设计、合成bFGF反义脱氧寡核苷酸(AS),用聚乙烯亚胺(jetPEI)介导bFGF反义脱氧寡核苷酸转染入Hep2细胞;半定量RT-PCR测定bFGF反义硫代寡核苷酸转染后细胞中bFGF mRNA水平;免疫细胞化学法检测Hep2细胞转染前后bEGF的表达水平;FACS分析bFGF反义硫代寡核苷酸诱导细胞的凋亡;MTT法检测bEGF反义硫代寡核苷酸及其与化疗药物联合处理后的细胞增殖.结果: bFGF反义硫代寡核苷酸呈剂量与时间依赖抑制Hep2细胞增殖,高抑制率为25.5%;被转染细胞bFGF mRNA和蛋白的表达分别降低52.0%和41.1%,细胞凋亡率为20.5%;bFGF反义硫代寡核苷酸协同多柔比星、 氟脲嘧啶及顺铂作用Hep2,使3种药物的IC50分别降低75.5%、83.5%及65.4%.结论: bFGF反义硫代寡核苷酸协同化疗药物增强Hep2细胞对化疗药物敏感性,将为人喉鳞癌的生物和化学药物治疗增添新途径.
关键词： 碱性成纤维细胞生长因子 喉鳞癌 反义硫代寡核苷酸 化疗药物 化疗敏感性 -
反义硫代寡核苷酸对人膀胱癌细胞端粒酶活性的影响
目的探讨端粒酶抑制剂对膀胱癌BIU-87细胞端粒酶活性的影响.方法用TRAP-ELASA法检测端粒酶抑制剂反义硫代寡核苷酸(asONS)对膀胱癌BIU-87细胞及其细胞裂解物端粒酶活性的影响.结果 asONS能够部分抑制人膀胱癌BIU-87细胞端粒酶的活性,呈现一定的浓度依赖性和时间依赖性;asONS与细胞裂解物直接作用组同作用细胞组相比,端粒酶活性下降的更为明显.结论 asONS如何有效通过细胞膜将是保证疗效的关键.
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反义RNA和反义硫代寡核苷酸抗HBV转基因小鼠病毒疗效的比较
目的比较人工合成的反义硫代寡核苷酸(asODN)和反义RNA真核表达质粒(PCEP4-ac)在乙型肝炎(HBV)病毒转基因小鼠体内的抗病毒作用.方法设计合成针对HBV-pre-c/c基因的反义硫代寡核苷酸5‘-CATGCCCCAAAGCCAC-3'.构建HBV-c区反义RNA真核表达质粒(PCEP4-ac),并以半乳糖-多聚赖氨酸(Gal15-PLL)作肝靶向载体.将20只HBV转基因小鼠分为反义寡核苷酸、反义RNA真核质粒表达、生理盐水组.靶向反义硫代寡核苷酸以每只体重150 ug剂量,反义RNA真核质粒每只100ug剂量,尾静脉注射给药,对照组用同样体积生理盐水同样方法给药.结果注射asODN和PCEP4-aC后7 d血清HBsAg已有所下降(P＜0.05);14 d时显著下降(P＜0.01),且血清HBV-DNA转阴率分别为66.7%(4/6)和62.5%(5/8),而生理盐水组无明显变化.结论反义硫代寡核苷酸和反义RNA真核表达质粒均能在乙肝转基因小鼠体内抑制HBV复制和表达,且两者在抑制作用上无明显差异性.
