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表皮干细胞的研究进展
表皮干细胞(epidermal stem cells)主要位于表皮基底层和毛囊外根鞘膨凸部(bugle).
关键词: 毛囊外根鞘 表皮干细胞 stem cells 基底 -
颏部增生性毛鞘瘤一例
增生性毛鞘瘤又称增生性外毛根鞘囊肿,是一种少见的皮肤附属器肿瘤,来源于毛囊外根鞘.我们发现一例,现报告如下.
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毛囊干细胞双向分化的分子调控机制
随着皮肤组织工程研究的逐步深入,毛囊干细胞有望作为稳定的种子细胞用于组织工程化皮肤的构建,并应用于临床.目前的研究表明,皮肤表皮细胞和毛囊各种细胞成份都来源于位于真皮层的毛囊外根鞘隆突区的毛囊干细胞,即毛囊干细胞具有双向分化的潜能,其分化方向有可能是受细胞增殖分化的内源性生物信号通路和外源性微环境调节控制的[1-6].本文就近年来毛囊干细胞特性、定向分化生长的调控机制研究进展做一综述.
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308 nm激光联合胡椒碱对毛囊外根鞘无色素黑素细胞黏附、移行及酪氨酸酶相关蛋白表达的影响
目的:研究308 nm准分子激光(EL)联合胡椒碱对毛囊外根鞘无色素黑素细胞(AMMC)黏附、移行及酪氨酸酶相关蛋白(TRP-1及TRP-2)表达的影响,初步探讨其对AMMC黑素合成影响的作用机制.方法:体外培养的AMMC分别予308nm EL(激光组)、胡椒碱(胡椒碱组)及二者联合(联合干预组)作用72 h、120 h及168 h,同时设阳性对照组及空白对照组.激光共聚焦显微镜观察AMMC黏附及移行情况,并定量分析荧光染色后AMMC细胞内TRP-1及TRP-2表达.结果:与空白对照组比较,其余4组均能不同程度地促进AMMC的黏附及移行.联合干预组、激光组及阳性对照组TRP-1及TRP-2表达均上调,其中联合干预组促进作用强.胡椒碱作用72 h可促进AMMC细胞内TRP-1表达,且呈浓度依赖性;而对TRP-2的表达无影响.结论:308 nm EL联合胡椒碱具有促进AMMC黏附、移行及提高细胞内TR P-1及TRP-2表达的作用.
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内皮素-1对毛囊外根鞘无色素黑素细胞黏附和移行及其细胞骨架形态的影响
目的:体外研究内皮素-1(ET-1)对毛囊外根鞘无色素黑素细胞(AMMC)黏附和移行的作用,并观察其对细胞骨架蛋白微丝、微管的形态影响.方法:3种浓度的ET-1作用体外纯化培养的人AMMC,观察其在细胞外基质蛋白如纤维连接蛋白、层黏连蛋白、Ⅳ型胶原包被培养板上的黏附,以及通过Boyden小室微孔滤膜的情况.采用免疫荧光双重染色法对AMMC分别进行罗丹明(红色)和异硫氰酸(绿色)标记纤维型-肌动蛋白(F-actin)、β微管蛋白,激光共聚焦显微镜观察3种浓度ET-1处理前后AMMC纤维型-肌动蛋白、β微管蛋白形态的变化.结果:与空白对照组相比,ET-1促进了AMMC在纤维连接蛋白上的黏附,20 ng/mL ET-1作用明显(P<0.01),而200ng/mL时对细胞的黏附不继续增加.但对层黏连蛋白和Ⅳ型胶原上的黏附无明显影响(P>0.05).另外,ET-1呈浓度依赖性地促进AMMC通过微孔滤膜.激光共聚焦显微镜观察显示,>20 ng/mLET-1可明显促进AMMC胞质中束状应力纤维形成,并集中分布于细胞膜内侧,但对微管结构无明显影响.结论:ET-1在体外可以促进AMMC的黏附和移行,其作用可能与诱导束状应力纤维形成和促进其向细胞膜内侧分布有关.
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甲氧沙林对体外培养的人毛囊外根鞘无色素黑素细胞的激活作用
目的:观察甲氧沙林(8-MOP)对体外培养的人毛囊外根鞘无色素黑素细胞黑素合成相关酶的影响.方法:3种浓度(10、50、100μmol/L)的8-MOP作用于体外培养的人毛囊外根鞘无色素黑素细胞,经免疫荧光染色后,采用激光共聚焦显微镜观察不同浓度、不同作用时间的8-MOP对无色素黑素细胞形态的影响,荧光定量分析酪氨酸酶、酪氨酸相关蛋白(TRP)1、TRP2表达量的变化.结果:50、100μmol/L 8-MOP作用于人毛囊外根鞘无色素黑素细胞3 d能显著促进酪氨酸酶的表达(P<0.01),作用7 d后TRP1、TRP2的表达也增加(P<0.05).结论:8-MOP在体外能直接刺激毛囊外根鞘无色素黑素细胞的活化.
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人头皮毛囊外根鞘无色素黑素细胞的分离和纯化培养进一步研究
目的:从人头皮毛囊外根鞘分离纯化培养无色素黑素细胞.方法:采用两步酶法(0.50%分离酶和0.50%胶原酶Ⅴ)获得游离的毛囊,高浓度0.50%胰酶30 min消化游离的毛囊外根鞘细胞,并以优化的培养基进行细胞培养.用HMB-45和NKI/beteb单克隆抗体免疫组化染色、透射电镜对培养物进行鉴定.结果:培养物中初始贴壁细胞大多数为无色素黑素细胞,仅有少量的角质形成细胞,无成纤维细胞污染.经二次传代差别胰酶处理很容易去除角质形成细胞.取培养3周的细胞经免疫组化和透射电镜鉴定证实为无色素黑素细胞.传3代后细胞得到完全纯化.结论:两步酶法结合高浓度的胰蛋白酶处理细胞可彻底清除成纤维细胞,获得无色素黑素细胞的纯培养.
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毛囊外根鞘NKI/beteb和HMB-45免疫组化及胰酶消化后细胞的电镜观察
目的:研究头皮毛囊外根鞘中无活性黑素细胞的存在部位以及毛囊经胰酶消化的细胞组成.方法:拔取正常头发,琼脂预先包埋后,切片行NKI/beteb和HMB-45单抗染色.另取毛囊用胰酶消化,收集细胞,在透射镜下进行观察.结果:拔取的正常毛囊外根鞘中存在NKI/beteb阳性细胞,而HMB-45染色阴性.在毛母质中有大量的HMB-45阳性细胞.毛囊经胰酶消化的细胞为有活性的黑素细胞(MC)、无色素性黑素细胞(AMMC)、毛皮质细胞和成纤维细胞.结论:毛囊外根鞘中存在功能和形态不成熟的AMMC.
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白癜风外科治疗新进展——毛囊外根鞘细胞悬液移植
白癜风是一种皮肤色素异常性疾病,表现为慢性局限性的皮肤色素脱失斑,表皮黑素细胞功能进行性丢失,如果出现毛发变白则提示预后较差.白癜风的外科疗法即手术治疗,适用于对光疗或药物治疗无效的稳定期白癜风患者,对非手术疗法不敏感的皮损,如唇部、手足、手指及生殖器等部位也可采用外科疗法.除了常见的白体表皮移植和白体黑素细胞移植,近年来采用毛囊单位提取法获取毛囊外毛根鞘细胞悬液移植作为一种新的外科手段,逐渐显现出其在白癜风治疗中的优势.该文就该方法在白癜风中的应用作一综述.
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巨大外毛根鞘癌1例分析及文献复习
外毛根鞘癌(TLC)是一种罕见的向毛囊外根鞘分化、具有局部侵袭性的低度恶性肿瘤[1].临床常误诊为鳞状细胞癌、基底细胞癌、角化棘皮瘤等,病理常误诊为其他类型的皮肤附属器肿瘤或鳞状细胞癌.本研究报道1例TLC,并复习相关文献,探讨其临床病理特征、诊断及治疗.
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人毛囊外根鞘细胞的培养
关键词: 毛囊外根鞘