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骨桥蛋白在胆固醇结石患者胆汁中的表达及成核作用研究
目的 探讨骨桥蛋白在人胆固醇结石形成中的作用.方法 36例胆固醇结石患者为结石组,19例肝移植供体为正常组,分别测定骨桥蛋白、钙离子及脂质成分在胆囊胆汁中的含量,用成核时间法研究骨桥蛋白在胆汁中的成核作用.结果 骨桥蛋白呈剂量依赖性地抑制胆固醇自发成核.50 μg/ml的骨桥蛋白可分别使结石组和正常组胆汁的成核时间延缓48.90％和17.07％,100 μg/ml的骨桥蛋白可使成核时间延缓91.51％和32.93％;并可抑制钙离子诱导的促成核作用.50μg/ml骨桥蛋白+钙离子可分别使结石组和正常组胆汁成核时间延缓75.78％和33.96％,而100μg/ml骨桥蛋白+钙离子则使成核时间分别延缓125.90％和62.26％.结石组胆汁中胆固醇、磷脂、胆汁酸及胆固醇饱和指数均显著高于正常组胆汁(P＜0.05),而骨桥蛋白和钙离子含量则明显低于正常组胆汁中的含量(P＜0.05).结论 骨桥蛋白可抑制胆固醇成核,并参与胆结石的发生发展.
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骨桥蛋白在不同胆汁体系中的成核作用研究
目的 探讨骨桥蛋白( Osteopontin,OPN)在不同胆汁体系中的成核作用,研究其与胆结石形成的关系.方法 应用成核时间实验检测OPN在模拟胆汁及人胆汁中的成核时间.胆固醇结晶生长实验检测OPN对模拟胆汁胆固醇结晶生长的影响,电镜观察OPN对模拟胆汁及人胆汁中胆汁泡的影响,并检测胆结石患者胆汁和正常胆汁中OPN和钙离子的浓度.结果 OPN在模拟胆汁及人胆汁中均可延长胆固醇成核时间,其作用具有剂量依赖性并和钙离子相关(P＜0.05).50 μg/ml和100 μg/ml的OPN分别使结石胆汁的成核时间延长1.50倍和1.93倍(P＜0.01)；使正常胆汁的成核时间延长1.17倍和1.33倍(P＜0.01)；使模拟胆汁的成核时间延长1.29倍和1.48倍(P＜0.01).在模拟胆汁中,OPN可抑制胆固醇结晶生长,延缓胆固醇结晶出现,使胆固醇成核时间指数和胆固醇结晶生长指数延长,并可抑制由钙离子诱导的促成核效应.电镜观察发现OPN可使胆固醇磷脂泡更加稳定,抑制泡的动态变化及胆固醇析出.结石胆汁中OPN[(0.53±0.08)mg/ml比(0.65±0.14) mg/ml,P＜0.05]和钙离子浓度均低与对照组[(0.71±0.17) mmol/L比(0.84±0.08) mmol/L,P＜0.05].结论 OPN在不同胆汁体系中均可抑制胆固醇成核,从而抑制胆固醇结石形成.
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寻找药物新晶型的非常规方法
介绍若干种生成晶型的非常规方法,包括高通量筛选法、毛细管生成法、激光诱导成核、单晶表面异相成核以及聚合物异相成核方法等,为寻找药物新晶型提供参考.
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糖尿病致胆石症相关因素的探讨
胆石症是一种常见病,近年在我国尤其是北方地区发病率有增加的趋势.有文献报告[1]有25%-30%的糖尿病患者并发胆石症.胆石症形成机制:胆汁中某些脂质、无机盐或有机盐超过了在胆汁里的大溶解度,从胆汁中析出.胆固醇结石形成的三个阶段:①过饱和胆汁形成;②晶核形成;③结石生长.许多学者[2]认为胆固醇结晶形成和和生长速度的关键因素是促成核因子和抑制成核因子的比率失调.而胆汁内的促成核因子是一种糖蛋白,它所启动多层囊泡表面与胆固醇分离,从而促成了成核作用和结晶生长.胆囊的自身结构和功能的改变导致饱和胆汁滞留,刺激胆囊上皮分泌过多的粘液,胆囊运动功能要发生改变.胆汁淤滞使结晶形成和生长形成胆石.
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三聚氰胺-三聚氰酸网状结构诱导三聚氰胺尿路结石的成核作用
目的:探讨一种三聚氰胺尿路结石的发生机制模型.方法:收集三聚氰胺尿路结石24枚(试验组),随机选择19枚成人尿路结石作为对照组,测定试验组患儿肾功能和血尿酸、肌酸水平.使用高效液相色谱法测定结石样本肌酐、肌酸和尿酸含量,使用高分辨透射电镜研究上述结石提取物、人T制备的三聚氰胺-三聚氰酸聚合物、色谱级尿酸、肌酸和肌酐标准品结构.结果:试验组患儿血生化指标均正常,且无个体间显著差异.试验组结石肌酸(6.17±8.09 μg/g vs 0.19±0.16 μg/g,P=0.000)和肌酐(20.49±21.91 μg/g vs 2.09±1.06 μg/g,P=0.008)含量较对照组显著增高.但患儿血生化指标与上述结石指标之间无明显相关(P＞0.05).电镜研究显示:试验组结石核心区域提取物中发现的网状结构与人工制备的三聚氰胺-三聚氰酸聚合物结构极其相似,而且肌酸、肌酐和尿酸分子均小于上述网状结构网格尺寸.结论:本研究首次证实三聚氰胺结石中存在独特的类三聚氰胺-三聚氰酸聚合物的网状结构,其可能参与结石发生中的成核作用.
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中心体异常与宫颈癌关系的研究进展
中心体作为哺乳动物细胞微管组织中心,在细胞分裂间期通过成核作用和微管的形成来维持细胞正常结构.双极纺锤体的形成是细胞有丝分裂中染色体均衡分离的必需条件,而中心体对双极纺锤体的形成起着关键作用.中心体的异常已经在越来越多的恶性肿瘤细胞中被发现.然而关于中心体异常和宫颈癌的关系,国内外研究较少.本文主要对中心体异常与宫颈癌的关系进行综述.
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运甲状腺素蛋白在胆固醇结石胆囊组织中的表达及其促成核作用研究
目的 探讨运甲状腺素蛋白(transthyretin,TTR)基因及其蛋白在胆固醇结石患者胆囊组织中的表达情况,以及其在胆固醇结石形成中的促成核作用.方法 收集笔者所在的两所医院施行择期胆囊切除术的25例胆固醇结石患者和9例肝移植供体的正常胆囊组织,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术及Western blot法检测2组患者胆囊组织中TTR基因及其蛋白的表达.构建Small和综合模拟胆汁体系,分别加入TTR和白蛋白(ALB),再通过Holan成核时间法和Holzbach法分别检测成核时间和成核活性.结果 胆固醇结石组TTR mRNA及其蛋白的表达水平分别为1.51 ±0.78和3.95±0.09,均高于正常对照组的0.85±0.63和1.53±0.08 (P＜0.05).在Small模拟胆汁体系中,观察至21 d时,TTR组的成核时间为(14.5±1.3)d,ALB组为(18.0±0.8)d,TTR的成核活性为0.81;在综合模拟胆汁体系中,TTR组的成核时间为(13.5±0.6)d,ALB组为(18.5±1.3)d,TTR的成核活性为0.73.TTR组的成核时间均较短(P＜0.01).结论 TTR在胆固醇结石患者胆囊组织中的表达上调,并在体外模拟胆汁体系中表现出促成核活性,提示其参与了胆固醇结石的发生和发展过程.
