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  • UHMWPE 颗粒上调 EMMPRIN、MMPs 表达并增强共培养体系中 THP-1、FLS 迁移、侵袭能力的实验研究

    作者:蔡志清;许杰;李登;马若凡

    目的:探讨超高分子量聚乙烯( UHMWPE)颗粒对人单核细胞株THP-1、成纤维样滑膜细胞( FLS)共培养体系迁移、侵袭能力及对细胞外基质金属蛋白酶诱导剂( EMMPRIN)与基质金属蛋白酶( MMPs)表达的影响。方法建立THP-1-FLS细胞共培养体系,应用台盼蓝染色检测THP-1细胞、FLS细胞存活率,Western blot、明胶酶谱、实时定量PCR方法检测样品中的EMMPRIN、MMP-2、MMP-9的表达及活性,并应用RNA干扰技术评估EMMPRIN的作用。结果 UHMWPE颗粒刺激THP-1细胞EMMPRIN表达上调,对FLS的EMMPRIN表达无明显影响。 UHMWPE颗粒刺激FLS的MMP-2、MMP-9表达上调、活性增强,对 THP-1表达 MMPs 无明显影响。 THP-1-FLS 共培养时, UHMWPE颗粒刺激使EMMPRIN、MMP-2、MMP-9表达上调更为显著。颗粒刺激下,THP-1-FLS共培养体系的迁移能力、侵袭能力明显强于无颗粒刺激,并与EMMPRIN的表达水平和MMPs的活性呈明显正相关。行THP-1细胞EMMPRIN基因干扰后,共培养体系的EMMPRIN、MMPs表达均下调,迁移、侵袭能力下降。结论 UHMWPE 颗粒可刺激THP-1-FLS 共培养体系高表达EMMPRIN,上调MMP-2、MMP-9的分泌并增强其活性,提高共培养体系的迁移、侵袭能力。

  • 胰腺癌中细胞外基质金属蛋白酶诱导剂的表达及临床意义

    作者:王羽;谢德荣;郭双双;杨琼;江志敏

    目的 检测细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(EMMPRIN)在胰腺癌中的表达及其与P-糖蛋白(P-gp)、血管内皮生长因子(VEGF)的关系,以探讨胰腺癌细胞多药耐药和浸润转移是否有关联.方法 应用免疫组化SP法检测34例胰腺癌患者癌组织中EMMPRIN、P-gp和VEGF的表达,用卡方检验和相关分析了解其与临床病理参数的关系.结果 EMMPRIN、P-gp和VEGF在胰腺癌组织中阳性表达率分别为61.8%、55.9%和64.7%.EMMPRIN、P-gp、VEGF阳性表达与性别、年龄、肿瘤大小及病理分化程度无关(P>0.05),但与淋巴结转移有关(P<0.05).EMMPRIN表达与P-gp、VEGF分别相关(r=0.398和r=0.432,P<0.05).结论 胰腺癌中EMMPRIN与P-gp、VEGF表达有关,提示肿瘤耐药、浸润和转移之间有一定相关性,EMMPRIN可能是其中的关键因子.

  • 牵张应力对人牙周膜成纤维细胞细胞外金属基质蛋白酶诱导剂表达的影响及相关信号通路的研究

    作者:鲍菁;谢明;焦婷

    目的 研究人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)在循环牵张力下细胞外金属基质蛋白酶诱导剂(EMMPRIN)(CD147/basgin)的表达变化以及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,推测EMMPRIN在应力作用下牙周组织改建过程中的可能作用.方法 采用荧光免疫组织化学法检测EMMPRIN和VEGF在PDLFs中的表达定位;使用Flexcell System对PDLFs加载6%、12%、20%的循环牵张力0.5、2、6、12、24、36、48及72 h后,采用实时PCR和Western blotting的方法分别观察PDLFs内EMMPRIN及VEGF的基因及蛋白的表达变化;在PDLFs培养液中加入外源性EMMPRIN蛋白6、12、24 h后,分别观察PDLFs内VEGF的基因及蛋白的表达变化.结果 EMMPRIN蛋白主要表达于PDLFs的细胞膜和细胞质,而VEGF则在PDLFs的细胞核和细胞质中有较强表达.对PDLFs分别施加6%、12%及20%的机械牵张力后,细胞内EMMPRIN与VEGF的基因和蛋白表达均特异性上调;外源性的EMMPRIN蛋白可以促进PDLFs中VEGF mRNA的表达.结论 机械牵张力可特异性上调PDLFs中EMMPRIN和VEGF的表达;EMMPRIN可能调控VEGF的表达并与之共同参与应力作用下的牙周组织改建的过程.

  • 宫颈癌中细胞外基质金属蛋白酶诱导剂的表达及临床意义探讨

    作者:徐沁;谢榕;杨琳;林玉珍

    目的 检测细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(EMMPRIN)在宫颈癌中的表达及与金属蛋白酶-2(MMP-2),金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系,以探讨EMMPRIN在宫颈癌浸润转移中的作用.方法 应用免疫组化的方法检测110例早中期宫颈癌标本中EMMPRIN、MMP-2及MMP-9的表达,用卡方检验和相关分析了解其与临床病理参数的关系.结果 EMMPRIN、MMP-2及MMP-9表达于宫颈癌组织中.EMMPRIN、MMP-2及MMP-9在宫颈癌中的表达分别为70.9%(78例)、62.7% (69例)、及 52.7% (58例).EMMPRIN的阳性表达分别和世界妇产科联盟(FIGO)分期(P=0.001),病理学类型(P<0.001)、分化程度相关(P<0.001),呈现显著性相关;但与年龄、肿瘤大小、宫旁浸润、淋巴结转移、肿瘤复发以及生存率无显著性相关.EMMPRIN 在宫颈癌中分布表达和MMP-2(P<0.001,相关系数r=0.583)及MMP-9(P<0.001,相关系数r=0.556)呈现正相关性.结论 宫颈癌EMMPRIN的表达和MMP-2及MMP-9呈相关性,提示EMMPRIN在肿瘤的局部转移浸润及预后的相关性中起着举足轻重的作用.

  • β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶-8在人垂体瘤组织的表达及其对侵袭性的影响

    作者:王延後;杨伟;张玉宝;邱鹏;姚阳阳;徐同江;徐广明

    目的 探讨β1,3-N-乙酰氨基葡萄糖转移酶-8(β3GuT8)在人垂体腺瘤中的表达及其意义.方法 收集经手术和病理检查结果证实的垂体腺瘤标本58例,其中侵袭组32例,非侵袭组26例,分别采用免疫组织化学和Western blot方法检测侵袭性和非侵袭性垂体腺瘤组β3GnT8、相对高分子质量细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(HG-CD147)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的表达.结果 免疫组织化学结果显示33 GnT8在侵袭组的阳性率为87.5%,明显高于非侵袭组中的57.7%(P<0.05);Western blot结果显示β3GnT8、HG-CD147、MMP-2在侵袭组表达水平均明显高于非侵袭组(t=2.72,P<0.05;t =2.81,P<0.05;t =2.68,P<0.05),且随着β3GnT8表达量增加,HG-CD147及MMP-2的表达量亦增加,Pearson相关分析显示在侵袭组中β3GnT8、HG-CD147、MMP-2表达两两呈正相关(r =0.78,P <0.05;r=0.64,P<0.05;r=0.52,P<0.05),在非侵袭组中无明显相关(P>0.05).结论 β3GnT8在垂体瘤中表达且和垂体腺瘤的侵袭性密切相关.

  • 微小RNA Let-7b靶向CD147对大鼠垂体腺瘤GH3细胞侵袭性的影响

    作者:谢仕刚;邱鹏;杨伟;张玉宝;徐同江;徐广明

    目的 探寻微小RNA Let-7b(Let-7b)在大鼠垂体腺瘤GH3细胞中的靶基因,并观察其对GH3细胞侵袭性生长的影响.方法 利用TargetScan、PicTar、MiRanda 3种不同的生物信息学方法对靶基因进行筛选;设计Let-7b模拟物(Let-7b mimic)及反义寡核苷酸链序列(AMO),采用慢病毒转染,分别外源性导入Let-7b mimic以增加Let-7b的表达量、AMO互补结合以阻碍Let-7b功能实现,转染不含有大鼠同源序列的空白病毒为对照组.实时荧光定量核酸扩增检测系统(FQ-PCR)检测各转染组Let-7b表达量的改变;Westen blot检测转染后各组GH3细胞中细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(CD147)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白表达量的改变;Transwell细胞小室侵袭实验研究各组细胞侵袭能力的改变.结果 大鼠GH3细胞中,Let-7b与CD147存在直接的靶向关系,并对CD147、MMP-9蛋白表达及细胞的侵袭能力有明确的抑制作用.转染mimic组的GH3细胞Let-7b的表达量是空白对照组的(9.56±0.51)倍,CD147、MMP-9蛋白表达降低,细胞的侵袭性生长受到抑制,差异有统计学意义(P<0.05);转染AMO组的GH3细胞Let-7b的表达为对照组的(0.31±0.01)倍,CD147、MMP-9蛋白表达量增高,细胞的侵袭能力增强,差异有统计学意义(P<0.05);对照组与自然生长组Let-7b的表达量、CD147、MMP-9蛋白表达量及细胞侵袭能力差异均无统计学意义(P>0.05).结论 Let-7b靶向CD147对GH3细胞的侵袭性有抑制作用.

  • EMMPRIN在肿瘤进展中的生物学功能

    作者:杨菁;李宏江;羊晓勤

    目的 总结近年来细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)在肿瘤进展中的生物学功能及在临床诊治方面的运用.方法 根据PubMed数据库检索获取的相关资料,就EMMPRIN的分子结构以及其在肿瘤进展中的生物学功能进行综述.结果 EMMPRIN在肿瘤的进展过程中发挥着重要的作用,包括诱导肿瘤周围基质的降解、促进新生血管的形成、抑制肿瘤细胞凋亡、增强肿瘤耐药性等.结论 在肿瘤治疗中,EMMPRIN可以作为有效的作用靶点.

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