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双自杀基因治疗文献资料
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逆转录病毒载体介导双自杀基因治疗肝细胞肝癌的研究
我们将2种重要的自杀基因TK与CD基因整合在一起,以脂质体和逆转录病毒为载体,介导转入肝癌细胞HCC-9903[1],大限度地消除肿瘤细胞对治疗药物的耐药性;同时,降低前药的毒副作用.
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应用两步氯化钙转化法高效制备双自杀基因重组腺病毒
目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动下的双自杀基因重组腺病毒.方法应用PCR扩增出CD和TK基因,经适当改造后插入pAdtrack CMV中构建成转移质粒pAdtrack CMV-CDTK,经酶切线性化后,转化用氯化钙制备的感受态AdEasier-1细菌,获得重组腺病毒质粒.后将线性化的重组腺病毒质粒转染293细胞包装获得重组腺病毒,滴度测定后,体外感染血管内皮细胞ECV304.结果PCR检测表明已成功构建了含CD、TK融合基因的重组腺病毒,为进一步开展肿瘤的双自杀基因治疗研究奠定了基础.结论应用改进后的AdEasy系统构建腺病毒相比于传统AdEasy系统,方法更简便、成功率更高、实验周期更短.
