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睾丸支持细胞与共刺激通路阻断剂对异体移植肾细胞的保护作用
目的研究表达Fas配体(FasL)的睾丸支持细胞与共刺激通路阻断剂细胞毒性T细胞相关抗原4免疫球蛋白(CTLA-4Ig)对异体移植肾细胞的保护作用,以提高移植肾的免疫耐受性.方法酶消化法制备睾丸支持细胞及肾细胞.取106个细胞混合移植于大鼠肾包膜下,实验大鼠分为3组:对照组(10只)、混合细胞移植组(混合移植组,16只)、联合CTLA-4Ig组(CTLA组,10只).分别于术后1、7、14、20 d检测血清白细胞介素-2(IL-2)水平变化.术后20 d取出移植物,以亲和素-生物素-过氧化物酶复合物技术观察肾细胞存活状况;MD-20图像分析系统测定混合移植物灰度值;末端脱氧核糖核酸转移酶介导的X-dUTP缺口末端标记(TUNEL)法观察移植物中凋亡的细胞. 结果对照组无移植物存活; 混合移植组14只移植物存活,灰度值为0.362±0.017;CTLA组10只移植物均存活,灰度值为0.445±0.021;混合移植组与CTLA组间灰度值差异有显著意义 .术后CTLA组血清IL-2水平较混合移植组低,差异有显著意义;混合移植物中可见凋亡的淋巴细胞. 结论异体肾细胞移植中,睾丸支持细胞与CTLA-4Ig对移植肾细胞具有协同保护作用.
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人类精液中一氧化氮和转铁蛋白含量的关系
目的:探讨一氧化氮(NO)与人精液转铁蛋白(Tf)含量及精子质量的关系.方法:参照WHO标准,进行精液常规分析.无菌取大鼠睾丸,经胶原酶和透明质酸酶消化,分离出纯度较高的支持细胞,用Hams F-12培养液培养.实验组加入NO供体硝普钠(SNP),同对照组一起培养48 h取上清液,采用镀铜镉还原荧光法检测NO代谢产物硝酸盐(NO-3).用免疫散射比浊法检测Tf含量.结果:130例不育者精液Tf含量、精子密度和活动率随NO含量升高而降低,呈显著的负相关(P<0.01),大鼠睾丸支持细胞悬液Tf含量正常生育组[(22±9)μmol/L]显著高于不育组[(13±8)μmol/L,P< 0.01].结论:精液Tf含量测定有助于评价精子质量,可作为反映支持细胞功能的特异指标,NO对精子运动能力及支持细胞产生和分泌Tf有抑制作用,这对研究不育症的机制有重要价值.