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干扰miRNA-183表达对食管癌细胞凋亡的影响及机制研究
目的 探讨干扰微小RNA-183(miRNA-183)表达对食管癌细胞凋亡的影响及其分子机制.方法 采用荧光定量PCR检测食管癌组织及细胞中miRNA-183的表达情况.以加入脂质体和miRNA-183 inhibitor的细胞为miRNA-183 inhibitor组,以加入脂质体和miRNA-183 inhibitor negative control的细胞为阴性对照组,以加入等量脂质体的细胞为空白对照组,采用荧光定量PCR检测其转染效果.转染48 h后,采用流式细胞仪检测细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法(Western blot)检测细胞中Bcl-2和p53蛋白的表达水平.结果 与正常食管组织和正常食管上皮细胞比较,miRNA-183在食管癌组织和食管癌细胞中的表达均上调(P＜0.05).脂质体转染细胞48 h后,miRNA-183 inhibitor组细胞的miRNA-183相对表达量低于空白对照组(P＜0.05),阴性对照组和空白对照组的miRNA-183相对表达量比较,差异无统计学意义(P＞0.05).miRNA-183 inhibitor组的细胞凋亡率和p53蛋白表达水平均高于空白对照组,Bcl-2蛋白表达水平低于空白对照组,差异均有统计学意义(P＜0.05).空白对照组和阴性对照组的细胞凋亡率、p53蛋白、Bcl-2蛋白表达水平比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 miRNA-183在食管癌组织和食管癌细胞中呈高表达,抑制其表达可促进细胞凋亡,其作用机制可能与上调p53蛋白和下调Bcl-2蛋白的表达有关.
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结肠癌患者血清中microRNA-183及胸苷激酶1的表达及意义
目的：检测结肠癌患者血清中miRNA-183及胸苷激酶1（TK1）的表达并探讨其临床意义。方法收集结肠癌患者及健康体检者血清标本各52例，荧光定量PCR检测miRNA-183表达，免疫印迹增强化学发光法检测TK1的表达，分析两者之间的相关性及与临床病理的关系。结果与正常对照组相比，结肠癌患者血清miR-183的表达相对升高（P<0.01）；中低分化腺癌者血清miR-183的表达量高于高分化腺癌（P<0.01）；Ⅲ～Ⅳ期结肠癌者血清中miR-183的表达量高于Ⅰ～Ⅱ期（P<0.01），且在有淋巴结转移的患者中表达较高（P<0.01）；受试者工作特征（ROC）曲线显示，以相对表达量1.15为临界点，血清miR-183可能具有诊断结肠癌的价值，其敏感度为78.8%，特异度为67.3%，阳性预测值为78.9%，阴性预测值为70.2%。结肠癌患者血清中TK1的表达也较正常对照组升高，中低分化腺癌高于高分化腺癌（P<0.05），Ⅲ～Ⅳ期高于Ⅰ～Ⅱ期（P<0.01）。血清中miR-183与TK1的表达呈正相关（rs=0.692，P＜0.01）。结论血清中miR-183及TK1可能是早期结肠癌的诊断标志物，并可用于判断肿瘤的恶性程度及预后。
