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血清多肽谱对高级别浆液性卵巢癌诊断价值分析
目的 寻找高级别浆液性卵巢癌相关的血清标志,并评价其诊断价值.方法 收集2006-07-17-2011-03-30浙江省肿瘤医院卵巢癌血清样本165例,均经病理确诊.采用纳米磁珠结合基质辅助激光解析离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术,检测95例高级别浆液性卵巢癌患者、34例其他上皮性卵巢癌患者、36例卵巢良性肿瘤患者和70名健康志愿者血清样本,并获得血清多肽谱.采用Biomarker Wizard软件分析所获得的多肽谱找出差异蛋白,进一步采用SPSS 12.0中ROC曲线分析差异蛋白,评价其诊断灵敏度和特异性.结果 通过34例高级别浆液性卵巢癌患者和34名年龄匹配的健康人群血清多肽谱比较筛选出8个差异峰,P＜0.000 1.进一步扩大样本量,经分析ROC曲线面积＞0.9的有2 742、8 568和8 692 m/z 3个差异峰;当差异峰2 742m/z取临界值24.31时,其诊断敏感性和特异性分别为90％和84.2％,其中早期卵巢癌诊断敏感性为82.35％.早期(Ⅰ、Ⅱ)与晚期(Ⅲ、Ⅳ)高级别浆液性卵巢癌比较有3 163、4 180和4 288m/z 3个差异峰,P＜0.01,其ROC曲线面积均＞0.7;其中3 163 m/z鉴别早晚期高级别浆液性卵巢癌敏感性和特异性分别为52.9％和88.5％.高级别浆液性卵巢癌患者与其他上皮性卵巢癌患者比较无明显差异峰.高级别浆液性卵巢癌患者和卵巢良性肿瘤患者比较有13 745、15 930和28 111 m/z 3个差异峰,P＜0.01,ROC曲线面积＞0.7的差异峰有15 930和28 111 m/z;其中15 930 m/z的鉴别诊断敏感性和特异性分别达到52.6％和80.6％.结论 2 742m/z差异蛋白对于早期高级别卵巢癌具有较高的诊断价值,3 163m/z在早期和晚期高级别浆液性卵巢癌患者的鉴别诊断中有一定价值,15 930m/z对于高级别浆液性卵巢癌和良性卵巢肿瘤鉴别诊断有一定的价值.
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血清多肽谱检测对子宫内膜癌早期诊断价值
目的 研究子宫内膜癌患者血清多肽谱的变化,探讨子宫内膜癌早期诊断相关的差异蛋白.方法 选取2008-05-01-2011-05-31浙江省肿瘤医院收治的子宫内膜癌患者134例、子宫体良性病变患者103例和健康女性志愿者95名作为研究对象.将研究对象分为测试组(45例Ⅰ期子宫内膜癌患者和45名健康女性)、验证组(134例子宫内膜癌患者和95名健康女性),采用基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-associated laser disso-ciation/ionization timeof flight mass spectrmtry,MALDI-TOF-MS)结合纳米磁殊技术测定其血清多肽谱,Biomarker Wizard软件筛选差异蛋白峰,采用SPSS 12.0中ROC曲线分析差异峰建立诊断模型,进一步评价模型对诊断子宫内膜癌的敏感度和特异性,并分析差异蛋白峰在各期子宫内膜癌及子宫良性病变患者中的分布情况.结果 血清多肽谱检测结果显示,测试组质荷比为1 500～30 000 m/z,共测得82个蛋白峰,其中有12个差异峰差异有统计学意义,P＜0.001.在12个差异峰中,取ROC曲线面积≥0.8的2 768、3 402和6 441 m/z 3个差异峰作为子宫内膜癌的诊断模型,其敏感度分别为78.4％、75.4％和66.8％,特异性分别为92.6％、89.5％和86.2％;三者联合的敏感度和特异性为88.1％和75.8％.联合诊断模型鉴别子宫内膜癌和子宫良性病变的敏感度为94.9％.结论 血清多肽谱检测筛查发现的差异峰2 768、3 402和6 441 m/z能较正确的区分子宫内膜癌患者、健康人和子宫良性病变患者,有助于子宫内膜癌的早期筛查.
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应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱法研究原发性胆汁性肝硬化的血清多肽谱
目的 应用弱阳离子交换磁珠提取多肽结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱系统( MALDI - TOF - MS)分析原发性胆汁性肝硬化(PBC)患者的血清多肽谱,寻找具有潜在意义的血清标志物.方法 收集105例血清样本,包括55例PBC患者、25例其他肝病患者和25例正常对照者血清样本,经弱阳离子交换磁珠纯化,MALDI - TOF - MS分析及ClinProTools生物信息学方法研究其血清多肽表达谱.结果 在质荷比(m/z)1000～10000Da的范围内3组间共检测到158个血清多肽峰,其中83个有统计学意义(P＜0.001),在PBC中表达上调的多肽有31个,表达下调的多肽有52个.组合m/z 1062.47、5356.13、4268.63、846.18、1945.31和6649.53Da 6个峰建立多肽诊断指纹图谱模型,该模型盲样验证的准确率在PBC组、正常对照组和其他肝病组分别为100％、81.8％和72.7％.结论 可以利用MALDI - TOF - MS技术和ClinProTools软件来筛选PBC血清标志物,其在PBC诊断方面具有一定的价值.
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LTQ和SELDI-TOF质谱对弱阳离子磁珠捕获的血清多肽和蛋白的鉴定
[目的]鉴定弱阳离子磁珠捕获的血清多肽和蛋白峰.[方法]收集经弱阳离子磁珠从人血清中捕获后洗脱下来的蛋白,然后经过HPLC分离,各组分的一部分跑SDS-PAGE胶并用LTQ质谱鉴定,另一部分采用SELDI-TOF检测,后结合参考文献信息初步确定部分峰的鉴定结果.[结果]通过SELDI-TOF检测结果发现5个组分有比较明显的峰,基于LTQ质谱鉴定了这5个组分分子量在30kD以下的蛋白,数据库搜索结果显示评分在100分以上共鉴定出66个单一蛋白.并初步确定了13个SELDI-TOF上峰的蛋白结果.[结论]HPLC分离富集结合SELDI-TOF和LTQ质谱能比较有效地鉴定丰度比较高的差异峰,是各种差异峰鉴定策略的有益补充.
