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实体瘤干细胞研究进展
新近的研究结果表明,肿瘤细胞在成瘤性方面存在不均一性.肿瘤中存在少量具有自我更新和高增殖能力的干细胞,它们在维持肿瘤生长中起决定性作用.该理论首先在血液系统肿瘤中取得突破,并在部分实体瘤如乳腺癌、脑肿瘤、前列腺肿瘤、肺癌、胰腺癌及部分细胞系中成功分离出了肿瘤干细胞.目前实体瘤干细胞的标志研究主要集中于CD133、 CD44、CD117和CD34等CD分子.干细胞的识别将为肿瘤病理的认识及肿瘤治疗提供新的思路和方法.
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乳腺癌干细胞的基础与临床研究进展
乳腺癌严重威胁女性健康,我国每年乳腺癌发病达16.9万,死亡4.5万例.居女性恶性肿瘤发病率及死亡原因的第2位及第6位.1977年人们开始认识到干细胞的存在可能是造成疾病进展和复发的主要原因之一,乳腺癌干细胞的研究也逐渐展开.本文就乳腺癌干细胞的来源及分离鉴定、雌激素受体状态、信号转导机制、微环境及治疗方面作综述,以期抛砖引玉.
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组蛋白去乙酰化酶抑制剂在乳腺癌内分泌治疗上的研究进展
组蛋白乙酰化、去乙酰化修饰是基因转录调控的关键机制之一,与肿瘤的发生、发展关系密切.乳腺癌是女性肿瘤中常见的肿瘤之一,内分泌治疗是其主要治疗手段之一,但原发性和继发性内分泌治疗耐药极大地影响了治疗的效果,在体内外研究中证实组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACis)具有增敏内分泌治疗及逆转内分泌治疗耐药的作用,为提高内分泌治疗效果提供了新的选择.
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肺癌细胞株侧群细胞的分选及干细胞特性的鉴定
目的 肺癌细胞株侧群(side poulation,SP)细胞的分选及干细胞特性的鉴定.方法 选择肺癌细胞株SK-MES-1和NCI-H460,采用流式细胞仪分选SP和非SP(non-SP,NSP)细胞,分别接种于正常培养液和干细胞培养液中培养并传代,观察细胞表型和分化能力.电子显微镜观察细胞的超微结构.免疫荧光检测干细胞标志物CD44的表达.Cell counting kit-8 (CCK-8)法检测细胞增殖能力.集落形成、transwell侵袭实验和裸鼠成瘤实验明确细胞的恶性程度.结果 初次分选SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP和NSP百分比以及再纯化百分比之间比较,差异均无统计学意义(均P ＞0.05).2种细胞株的SP和NSP细胞在干细胞培养液中均不能形成干细胞球,但增殖速度加快.SP细胞呈集聚生长,NSP细胞呈接触抑制的单层生长.SP细胞培养至第5代时,细胞表型变化不明显;NSP细胞第5代出现混杂表型.电子显微镜下SP细胞核质比较高,NSP细胞核质比低.SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP细胞可高表达CD44,组间比较,差异无统计学意义(P＞0.05).CCK-8法检测显示,SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP细胞第2、5和7天的吸光度均高于NSP细胞,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).SK-MES-1和NCI-H460细胞株SP细胞克隆数和克隆形成率高于NSP细胞,侵袭过膜的细胞数增加,裸鼠成瘤数增多(均P＜0.05);均无转移灶,瘤体HE和免疫组织化学染色证实为典型肺癌细胞.结论 肺癌细胞株SP细胞具有干细胞特性,参与肿瘤的增殖、分化、侵袭和成瘤过程.
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人眼脉络膜黑色素瘤OCM-1细胞中肿瘤干细胞的分离纯化
目的 分离及纯化人眼脉络膜黑色素瘤细胞OCM-1中的肿瘤干细胞.方法 将OCM-1细胞复苏,使用Dubecco标准改良Eagle培养基(DMEM/F12)培养后,改用无血清化学限定培养基(SFM),并分离纯化培养肿瘤干细胞,用流式细胞仪检测神经干细胞特异性标记物CD133的表达比率,并对第六代细胞进行神经RNA结合蛋白(musashi-1)免疫细胞化学染色,显微镜下观察阳性细胞比率.结果 在标准DMEM/F12培养基中贴壁生长的OCM-1细胞用SFM培养基培养后,贴壁细胞显著减少,至第6代时细胞均为悬浮团状集落生长,呈现典型的干细胞生长方式.在不同代的细胞中,CD133均有阳性,未经过分离的OCM-1细胞、经过SFM培养并分离的第1、2代OCM-1细胞的阳性比率分别是2.5%、21.7%、57.8%,第6代的细胞CD133阳性比率达到79.8%,musashi-1强阳性表达.结论 脉络膜黑色素瘤细胞中存在肿瘤干细胞.使用干细胞培养液培养,并通过限制分化、连续传代的方法,可分离纯化出悬浮克隆集落生长的干细胞.
