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ApoG2诱导鼻咽癌CNE-2细胞凋亡与自噬的观察
目的:研究新型棉酚衍生物ApoG2在体外应用对鼻咽癌CNE-2细胞凋亡与自噬的影响.方法:CCK-8检测增殖抑制率；Hoechst 33258染色、吖啶橙(AO)染色、透射电镜观察细胞凋亡与自噬形态学变化；FCM检测凋亡率与自噬荧光强度；蛋白质印迹法检测Bcl-2和Beclin1蛋白表达情况.结果:CCK-8法结果显示,不同浓度的ApoG2作用于CNE-2细胞24、48和72 h后,均可见对细胞具有生长抑制作用,且呈剂量-时间依赖性.72 h的IC50值为23.61 μmol/L.Hoechst 33258染色显示,ApoG2作用后可观察到更多的核固缩和碎裂等凋亡现象；AO染色显示,ApoG2作用后可观察到更多的亮红色酸性自噬泡.透射电镜可观察到细胞体内大空泡及膜性双层结构增多.FCM检测显示,对照组和ApoG2组凋亡率分别(3.83±0.23)％和(20.06±2.10)％,差异有统计学意义,F=176.823,P=0.000.FCM检测显示,对照组和ApoG2组自噬荧光强度分别为(1.05±0.54)％和(26.91±7.65)％,差异有统计学意义,F=34.019,P=0.004.蛋白质印迹法显示,Bcl-2蛋白表达下调差异有统计学意义,F=68.909,P=0.001；Beclin1蛋白表达上调差异亦有统计学意义,F=497.906,P=0.000.结论:ApoG2在体外可以抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖并诱导细胞凋亡与自噬.
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GSNH抗生育机理的研究
通过研究棉酚衍生物-牛磺酸棉酚(GSNH)对大鼠精子乳酸脱氢酶的作用机理发现,随着大鼠服药量的累加,作为精子活动能源的主要酶系之一,乳酸脱氢酶(LDH)的X-同工酶(LDH-X)逐渐减弱至消失,GSNH通过竞争抑制精子线粒体特异性酶-LDH-X,使精子的浓度能量来源被彻底阻断,从而产生了抗生育作用.
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ApoG2联合紫杉醇对鼻咽癌细胞及其移植瘤的抑制作用观察
目的 探讨新型棉酚衍生物ApoG2和紫杉醇(PTX)联用对鼻咽癌的体内外抑制作用及可能机制.方法 将不同浓度PTX、ApoG2单药及两药联用作用于人鼻咽癌CNE-2细胞48 h,采用MTT法检测细胞增殖抑制率；流式细胞仪检测细胞凋亡率.将12只CNE-2鼻咽癌皮下移植瘤裸鼠模型随机分为四组,对照组不干预,ApoG2组、PTX组及联合组分别予ApoG2、PTX及ApoG2与PTX联合应用(腹腔给药).观察移植瘤生长情况,计算抑瘤率；采用免疫组化SP法检测各组Bcl-2蛋白表达.结果 ApoG2与PTX单药对细胞的抑制作用随药物浓度提高而增强,呈浓度依赖性；联合用药有协同作用(CDI＜1)；联合组细胞凋亡率明显高于对照组及ApoG2组、PTX组,P均＜0.01;与ApoG2组及PTX组比较,联合组肿瘤体积明显减小(P＜0.01),抑瘤率明显升高(P ＜0.01)；Bcl-2表达率显著减低,P均＜0.01.结论 ApoG2与PTX联用可协同抑制鼻咽癌细胞及其移植瘤生长；其作用机制可能与下调Bcl-2蛋白表达有关.
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棉酚及其衍生物药理作用研究概述
棉酚(gossypol)又称棉籽醇,是一种天然存在于锦葵科的黄色酚类化合物,化学名为2,2'-双-8-甲酸基1,6,7-三羟基-5-异丙基-3-甲基萘,相对分子质量518(分子式:C30 H30O8),它是以1,1',3,3'取代的2,2'联萘为骨架的化合物,棉酚结构中连接两个萘环的化学键不能自由旋转[1],具有旋光性.人口服棉酚后胃肠道吸收缓慢,主要经小肠与胃上皮吸收,大部份分泌至胆汁,有明显的肝肠循环.各脏器中以肝脏中的药物浓度高,其他依次为脾、心脏、肾、肺、肌肉和脂肪组织、睾丸、脑等,存在血脑屏障.
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棉酚衍生物ApoG2诱导胃癌细胞凋亡及对Wnt6调控作用的研究
目的：研究棉酚衍生物ApoG2诱导胃癌细胞凋亡作用及对Wnt6调控作用的影响。方法以人胃腺癌细胞系BGC823细胞为模型，检测ApoG2作用下BGC823细胞生长抑制、形态学变化和细胞周期变化，以及给药前、后细胞Bcl2、Bax和Bak mRNA表达水平和Wnt6蛋白表达水平的变化。结果 ApoG2对BGC823细胞的生长抑制呈浓度依赖性，给药后经Hoechst染色可观察到典型凋亡细胞，经PI染色用流式细胞仪可检测到明显sub-G1峰；Wnt6蛋白含量和Bcl2 mRNA含量随ApoG2浓度升高而降低，Bax和Bak mRNA含量随ApoG2浓度升高而升高。结论 ApoG2能明显抑制人胃癌细胞BGC823的生长，诱导细胞凋亡，可能通过抑制细胞Wnt6蛋白表达从而调控Bcl2蛋白家族的基因转录，继而引起细胞凋亡。
