首页 > 文献资料
-
负载抗原肽的树突状细胞增强腺病毒载体介导hTRP2诱发抗小鼠黑色素瘤免疫
目的 探讨人黑色素瘤相关抗原TRP2(hTRP2)MHC Ⅰ多肽TRP2p180-188(SVYDFFVWL)修饰小鼠骨髓来源的树突状细胞(DC),增强腺病毒载体介导hTRP2(Ad hTRP2)诱发的抗小鼠黑色素瘤免疫效果.方法 Ad hTRP2免疫C57BL/6小鼠,3周后分别用Ad hTRP2或DC/SVYDFFVWL再免疫一次.用体内细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤实验和细胞内IFNγ染色(ICS)分析CTL杀伤活性和IFNγ的产生;或给免疫小鼠皮下接种B16.F10细胞,观察荷瘤小鼠的成活情况.结果 测定脾脏中6 h CTL杀伤率和产生IFNγ的CD8+T细胞比例,结果分别是:Ad hTRP2(初免)-Ad hTRP2(加强)组为68.40%±5.50%和0.67%±0.16%,DC/SVYDFFVWL(初免)-DC/SVYDFFVWL(加强)组为28.50%±6.40%和0.22%±0.07%,而Ad hTRP2(初免)-DC/SVYDFFVWL(加强)组为98.90%±0.90%和1.05%±0.21%.荷瘤实验显示,小鼠接种1×106B16.F10细胞后3个月,DC/SVYDFFVWL(初免)-DC/SVYDFFVWL(加强)组小鼠无一成活,AdhTRP2(初免)-Ad hTRP2(加强)组只有40%的小鼠存活,而Ad hTRP2(初免)-DC/SVYDFFVWL(加强)组小鼠100%存活.结论 用DC/SVYDFFVWL加强免疫能显著地增强Ad hTRP2初次免疫的效果,表明Ad hTRP2(初免)-DC/SVYDFFVWL(加强)免疫是一种克服重复应用腺病毒并不能提高抗肿瘤免疫效应的有效方式.
-
毛囊黑素细胞酪氨酸酶及相关蛋白1和2等分化标记分子的研究
目的:研究毛囊黑素细胞生物学特性,特别是与黑素合成相关酶蛋白和黑素小体结构蛋白在毛囊中的表达及分布情况.方法:取正常人头皮,采用HMB-45和识别酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(TRP1)、酪氨酸酶相关蛋白2(TRP2)等抗体免疫组化染色黑素细胞,研究毛囊中黑素细胞的分布、形态及TYR、TRP1和TRP2等黑素细胞分化标记分子的表达情况.结果:有功能的黑素细胞位于毛漏斗部基底层和生长期毛母质内接近毛乳头处,毛母质黑素细胞树突计数均值为5.1,高于表皮黑素细胞(P＜0.01).毛髓质中黑素细胞与皮质细胞比值约为1:4.2,而在基底层基底细胞与黑素细胞之比约为1:9.7.毛球HMB-45,TYR,TRP1和TRP2阳性,阳性颗粒仅局限于毛皮质和毛髓质内.图像分析结果表明:毛球部黑素细胞HMB-45、TYR、TRP1灰度值低于表皮黑素细胞(P＜0.05)、毛球部、毛漏斗部及表皮的黑素细胞TRP2灰度比较差异无显著性(P＞0.05).结论:毛囊中有活性的黑素细胞主要位于毛球和毛漏斗部,它们均表达黑素细胞分化标记抗原gp100、TYR、TRP1和TRP2.而且毛母质黑素细胞前3种分子表达量高于表皮黑素细胞.
-
中药何首乌促进黑色素生成的作用机理研究
目的 研究中药何首鸟在B16黑素瘤细胞中促进黑色素生成的作用机理.方法 用MTT法、多巴氧化法及NaOH裂解法测定何首乌时细胞增殖、酪氨酸酶活性及黑素合成的影响.RT-PCR和Western blotting法分别检测何首乌作用前后酪氨酸酶、小眼相关转录因子(MITF),酪氨酸酶相关蛋白1(TRP-1)和酪氨酸酶相关蛋白2(TRP-2)基因表达和蛋白合成的变化.结果 随何首鸟加药浓度的增大,细胞增殖率、酪氨酸酶活性和黑素合成能力明显增强;何首鸟可明显促进酪氨酸酶和MITF的基因表达和蛋白合成,但对TRP-1、TRP-2的表达几乎没有影响.结论 何首鸟在体外能显著刺激B16细胞中黑色素的生成,上述变化可能是通过促进酪氨酸酶和MITF的基因表达和蛋白合成以及激活酪氨酸酶的活性来实现的.
-
非洲爪蟾TGF-β5和小鼠TRP-2联合免疫诱导产生抗肿瘤免疫应答
目的研究非洲爪蟾转化生长因子-β5(aTGF-β5)基因免疫对肿瘤治疗性质粒DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫应答的效能的影响,探讨所诱导免疫应答的抗肿瘤机制.方法用aTGF-β5真核表达质粒和小鼠酪氨酸酶相关蛋白2(mTRP-2)真核表达质粒联合免疫野生型C57BL/6小鼠、CD4缺陷的C57BL/6小鼠和CD8缺陷的C57BL/6小鼠,于免疫前或免疫后接种黑色素瘤细胞B16F10,观测肿瘤生长和小鼠存活情况.结果两种质粒联合免疫能在野生型C57BL/6小鼠体内诱导产生保护性和治疗性抗肿瘤免疫,而mTRP-2真核表达质粒单独免疫野生型C57BL/6小鼠及两种质粒联合免疫CD4或CD8缺陷的C57BL/6小鼠均不能诱导产生抗肿瘤免疫应答.结论 aTGF-β5基因免疫能增强编码mTRP-2的肿瘤治疗性质粒DNA疫苗诱导抗肿瘤免疫应答的能力;T细胞免疫应答的诱导是抗小鼠黑色素瘤免疫应答所必需的.
-
非洲爪蟾TGF-β5和小鼠TRP-2联合免疫诱导抗原特异性CTLs
目的研究非洲爪蟾转化生长因子-β5(aTGF-β5)基因免疫是否能增强肿瘤治疗性DNA疫苗诱导抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞的能力. 方法构建编码小鼠肿瘤抗原酪氨酸酶相关蛋白2(mTRP-2)的真核表达质粒,与aTGF-β5真核表达质粒联合免疫C56BL/6小鼠,采用标准51Cr释放试验检测抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞的诱导.结果 aTGF-β5和mTRP-2联合免疫可在体外诱导H-2Kb限制的mTRP-2aa180-188特异性细胞毒性T淋巴细胞产生.结论 aTGF-β5免疫能有效提高肿瘤治疗性DNA疫苗诱导特异性细胞毒性T淋巴细胞的能力.
