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pN0期食管鳞癌血液微转移检测的临床意义
目的 探讨pN0期食管鳞癌的血液微转移临床意义及其对预后的影响.方法 提取血液标本总RNA,将mRNA反转录成cDNA,然后用实时荧光定量RT-PCR技术检测血液标本MMP-7 mRNA和hTERT mRNA表达,计算样本的△△Ct值,对40例N0期食管癌患者分别进行术后3、6、12个月跟踪随访复查.结果 血液微转移与年龄、性别、癌肿长度等因素无相关关系,但与组织分化等级和pTNM分期间存在相关关系.随访结果显示单纯观察肿瘤不同侵犯深度与肿瘤术后转移(复发)率无相关性;随访术后6个月及12个月,血液微转移与否与肿瘤转移(复发)率有相关性(P<0.05),其中血液微转移阳性患者术后12个月肿瘤转移(复发)概率是阴性患者的6.44倍(OR=6.440,95%CI为1.547～26.822).结论 食管鳞癌患者血液微转移检测对早期诊断及预后判断具有重要意义.
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PTENmRNA和hTERTmRNA与子宫内膜样腺癌生物学行为关系的探讨
目的：：探讨PTENmRNA、hTERTmRNA在子宫内膜样腺癌中的表达及其与生物学行为的关系。方法：采用原位杂交法检测50例子宫内膜样腺癌组织和50例正常子宫内膜组织PTENmRNA、hTERTmRNA的表达情况，分析二者与子宫内膜样腺癌生物学行为的关系。结果：PTENmRNA、hTERT-mRNA在子宫内膜样腺癌组织中的阳性表达率分别为30.0％和78.0％。 PTENmRNA、hTERTmRNA表达与子宫内膜样癌的分化程度、FIGO 分期、淋巴结转移及浸润深度均有关，差异具有统计学意义( P<0.05)。结论：PTENmRNA和hTERTmRNA与子宫内膜样腺癌的发生、发展密切相关，联合检测PTENmR-NA和hTERTmRNA可作为评估子宫内膜样腺癌恶性程度和预后预测的指标。
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非小细胞肺癌患者外周血hTERT mRNA水平检测的临床意义
目的:探讨非小细胞肺癌(NSCLC)发展与外周血端粒酶逆转录酶(hTERT)表达的相关性.方法: 采用Real-time PCR技术检测114例NSCLC患者和35例肺部良性病变患者外周血hTERT mRNA表达水平,比较二者之间的差异并分析.结果:检测结果显示,肺鳞癌Ⅰ~Ⅳ期hTERT mRNA表达量分别为(0.134±0.018)×10-3、(0.185±0.044)×10-3、(0.576±0.267)×10-3、(3.409±2.544)×10-3,Ⅰ、Ⅱ期之间差异无统计学意义(P>0.05),其余各组之间差异有统计学意义(P<0.05);肺腺癌Ⅰ~Ⅳ期hTERT活性分别为(0.156±0.006)×10-3、(0.220±0.052)×10-3、(0.630±0.282)×10-3、(3.230±2.245)×10-3,Ⅰ、Ⅱ期之间差异无统计学意义(P>0.05),其余各组之间差异有统计学意义(P<0.05);同期鳞癌与腺癌之间差异无统计学意义(P>0.05);肺部良性病变组外周血hTERT mRNA表达水平为(0.042±0.017)×10-3,与肺癌组之间存在显著性差异 (P<0.05).结论:NSCLC患者外周血hTERT mRNA表达显著升高,并与NSCLC临床分期正相关,提示其可作为肺癌诊断和临床分期的有益参考,但与NSCLC的病理类型无关.
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结直肠癌患者外周血中人端粒酶逆转录酶mRNA的表达及其临床意义
目的 探讨结直肠癌患者外周血中人端粒酶亚单位hTERTmRNA的表达及其意义.方法 以hTERTmRNA为靶基因运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测76例结直肠癌、22例良性大肠疾病患者和30例正常对照人群外周血中hTERTmRNA的表达.结果 76例结直肠癌患者中有52例外周血hTERTmRNA表达阳性,阳性率为68.4%,22例良性大肠疾病患者中有1例外周血hTERTmRNA表达阳性,二者比较有显著性差异(P<0.001);30例正常对照人群外周血中均无hTERTmRNA表达.hTERTmRNA的阳性检出率与肿瘤分化程度和TNM分期密切相关,与其他因素无相关性.结论 外周血细胞中hTERTmRNA的表达与肿瘤分期相关,有可能作为结直肠癌微转移的一个监测指标.
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甘氨脱氧胆酸钠对人肝癌细胞端粒酶活性及其hTERTmRNA表达的影响
目的 探讨甘氨脱氧胆酸钠(glycodeoxycholic acid,GDCA)对肝癌SMMC7721细胞端粒酶活性以及hTERTmRNA表达影响.方法 采用PCR-ELISA法检测端粒酶活性;应用RT-PCR检测hTERTmRNA的表达.结果 GDCA作用肝癌SMMC7721细胞后,端粒酶活性与hTERTmRNA表达均降低.GDCA200、400μmol/L处理组与对照组端粒酶活性(A450nmOD值)分别为(0.140 ±0.04)、(0.077±0.01)、(0.248±0.05),差异有统计学意义(P<0.05).抑制率为43.5%和69.0%.hTERTmRNA表达明显降低,相对表达率分别为1.33、0.59、1.89.结论 甘氨脱氧胆酸钠抑制肝癌SMMc7721细胞端粒酶活性,且下调hTERTmRNA的表达.
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端粒酶逆转录酶蛋白及mRNA在胃癌中的表达及相关性研究
目的:通过对胃癌组织中hTERT蛋白及hTERTmRNA表达的研究,探讨hTERT与胃癌临床病理特征的关系和意义.方法:采用免疫组化法及原位杂交法检测10例正常胃组织和51例胃癌组织中hTERT蛋白及hTERTmRNA表达情况.结果:胃癌中hTERT蛋白及hTERTmRNA阳性表达率显著高于正常胃粘膜;胃癌中hTERT蛋白表达阳性率与患者发生部位及患者的年龄显著相关.hTERT蛋白阳性胃癌标本中hTERTmRNA阳性为74.36%;hTERT蛋白阴性的胃癌标本中,hTERTmRNA阳性为0%.结论:hTERT与胃癌的发生有关,且在胃癌中呈高表达.hTERT蛋白与hTERTmRNA在胃癌中表达量呈正相关,其阳性表达可能是胃癌的标志之一.
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CK20 mRNA和hTERT mRNA表达与大肠癌患者外周血微转移的临床研究
目的:检测大肠癌患者外周血中细胞角蛋白20(CK20)mRNA和人端粒酶逆转录酶(hTERT)mRNA的表达,探讨其能否作为判断大肠癌患者外周血微转移及预后的分子生物学指标.方法:采用RT-PCR技术检测大肠癌32例、肠道良性病变11例和健康体检者20例的外周血中CK20mRNA和hTERT mRNA的定性和半定量表达.以人胃腺癌细胞株SGC-7901作阳性对照.实验数据采用SPSS13.0 forWindows软件包统计分析.结果:①CK20 mRNA和hTERTmRNA在大肠癌患者外周血中的阳性表达率分别为50.0%和56.2%,相对系数分别为0.89±0.17和0.88±0.17;在肠道良性病变患者外周血中阳性表达率分别为9.1%和0%,相对系数分别为0.11和0;在健康体检者外周血中阳性表达率及相对系数均为0.大肠癌患者与肠道良性病变患者、健康体检者相比,CK20 mRNA和hTERT mRNA的表达均有统计学差异(P＜0.05).②CK20 mRNA和hTERT mRNA阳性表达率和相对系数与临床分期、远处转移均有关(P＜0.05);其阳性表达率与浸润深度、淋巴结转移无关,但相对系数与之均有关(P＜0.05).阳性表达者生存率低于阴性者(P＜0.05).结论:大肠癌患者外周血中存在CK20 mRNA和hTERTmRNA的表达,与临床分期及患者生存密切相关,提示CK20mRNA和hTERT mRNA的表达能预测大肠癌患者外周血微转移,可判断预后.
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hTERT mRNA和p53在胶质细胞瘤中相关性的实验研究
目的 探讨人端粒酶催化亚单位hTERT mRNA、变异型p53基因在不同级别胶质细胞瘤中的表达情况是否具有相关性,以及和胶质细胞瘤恶性级别、患者年龄及性别的关系.方法 ①收集手术切除胶质瘤患者的病灶组织(44例胶质瘤患者),②原代培养剩余部分和术中内减压的正常脑组织,分别用RT-PCR、SP免疫组化等方法检测不同级别神经胶质细胞瘤和正常脑组织中hTERT mRNA和变异型p53基因的表达.结果 ①按WHO(2007)中枢神经系统肿瘤分类标准:8例I级胶质细胞瘤、8例Ⅱ级胶质细胞瘤、12例Ⅲ级胶质细胞瘤、16例Ⅳ级胶质细胞瘤中,hTERT mRNA和变异型p53基因的阳性表达率均显著高于正常脑组织(P<0.05),并且与胶质细胞瘤WHO(2007)分级有明显相关性(P<0.05);hTERT、p53的表达上调与患者年龄、性别无明显相关性(P>0.05);正常脑组织中未检测出hTERT mRNA和变异型p53基因阳性表达;②通过对5例正常脑组织和20例不同级别胶质细胞瘤中的变异型p53和hTERT mRNA进行免疫组化记分和RT-PCR分析,发现他们的表达均有正相关性,Pearson相关系数为分别为r1=0.831和r2=0.945(P<0.05).结论 ①胶质细胞瘤中,变异型p53基因表达的上调同hTERT mRNA的激活存在重要的正相关性;②胶质细胞瘤中,变异型p53基因和hTERT mRNA的表达在mRNA水平上较正常脑细胞明显上调,且与其恶性程度分级呈正相关;但与患者年龄、性别无显著相关性;③变异型p53基因和hTERT mRNA在神经胶质瘤的发生、发展过程中起到至关重要的作用,可能成为判断其病例级别、评估预后的一个新的参考指标和新基因治疗的靶点.
