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一条人脑胶质瘤相关新基因的克隆与表达
目的运用基因芯片技术获取正常成人脑组织与人脑胶质瘤中差异表达的基因,并对其中一条与脑胶质瘤相关的新基因进行了克隆和表达的研究.方法抽提正常成人脑组织与人脑胶质瘤组织中的mRNA来制备探针,经杂交、洗涤后,通过计算机观察二者表达谱的差异情况,对681F05克隆子进行了Northern blot,生物信息学分析和蛋白质的表达.结果通过四次基因芯片筛选,获得15条与胶质瘤相关的新基因,经northern blot证实681F05基因在人正常脑组织中低表达,而在人脑胶质瘤中高表达.BLASTn和BLASTx分析显示,它们编码蛋白与线虫Cyp-10蛋白同源性分别为52%和72%.cDNA序列分析发现这两个克隆是同一个基因[命名为cyclophilin-like gene(PPIL3)]的两个不同的剪切体(PPIL3a和PPIL3b).并在大肠杆菌中得到了PPIL3a和PPIL3b与GST较好表达的融合蛋白.结论基因芯片筛选正常脑组织与人脑胶质瘤差异表达的基因具有样品用量少,高质量,高速度,高敏感等特性.681F05基因可能是与人脑胶质瘤形成有关的一条全长新基因.
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脑胶质瘤中全长新基因PKIβ的克隆与表达
目前世界上在不同组织或不同病理样本中获取差异表达基因的方法有很多种[1-9].在各种技术中诸如:差异显示技术,只适用于少量样本,同时跑电泳的工作相当辛苦,并受限于一次电泳样品数量,而高密度的基因芯片,一次就能完成大量样本的基因表达水平上的筛选工作.
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金伯泉教授在国际上为我国获得第一个新的膜分子编号
经过10余年的努力,我校基础部免疫学教研室主任金伯泉教授等在成功地克隆出人体重要的免疫膜分子人血小板/T细胞活化抗原1 (PTA1)全长新基因之后,连续克隆出灵长类动物的PTA1基因,并首次系统阐明该分子的功能.有关研究的鉴定及编号已在2000年第7届人类白细胞分化抗体协作会议上公布. 据有关专家介绍,这是我国学者在世界上首次申报并获准的新的CD编号.这一成果标志着我国免疫学研究取得重要进展.在日前揭晓的国家自然科学基金中标项目中,该项研究获得重点项目资助. 人体大约有十万个基因.随着人体基因图谱的绘出、基因组计划的完成以及后基因时代的到来,并成为整个生命科学研究的重中之重.一种重要免疫膜新分子的发现,并搞清其结构与功能,不仅在基础研究方面对于认识人体生命现象的本质具有重要的理论意义,而且对揭示诸多疾病的发病机制和防治疾病方面都有极为重要的应用价值.如为一些免疫相关性疾病的治疗提供新方法和新策略,也可以作为具有临床应用价值的生物高技术新药物.(摘自《四医大通讯》,2000-12-01,第2版)