参芎葡萄糖注射液对脑缺血再灌注大鼠血液流变学的影响

目的:通过观察参芎注射液对脑缺血再灌注大鼠血液流变学的影响,探讨其脑保护作用及机制.方法:将30只雄性大鼠随机分为对照组、丹参组和参芎葡萄搪组.采用线栓法制作大脑中动脉缺血再灌注(I/R)模型,再灌注24h检测血液流变学指标.结果:MCAO大鼠血液出现粘、浓、聚等病理变化,参芎葡萄搪组血液流变学各参数明显改善(P<0.01或P<0.05).结论:参芎注射液对局灶性脑缺血再灌注损伤有明显的保护作用.

牛蒡子复方制剂对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达的影响

目的:探讨牛蒡子复方制剂(WWZ)对大鼠脑缺血再灌注后Caspase-3表达的影响.方法:采用改良线栓法制作右侧大脑中动脉缺血再灌注模型,运用Zea-Longa法进行神经病学评分,用光镜观察脑组织形态学改变,用免疫组化法观察其对Caspase-3蛋白表达的影响.结果:WWZ治疗组脑组织变性坏死程度轻,神经功能缺损评分显著减少,Caspase-3阳性细胞减少(P<0.01).结论:WWZ能降低神经功能缺失评分、抑制Caspase-3的激活,提示对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,其脑保护作用可能与抑制缺血区Caspase-3蛋白表达从而抑制细胞凋亡有关.

高压氧对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响

目的:探讨高压氧对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的影响.方法:成年健康雄性Wistar大鼠36只,随机分为假手术组、对照组、高压氧暴露组,后两组再分为脑缺血1h再灌注12h、24h、3d、5d组,每组4只,应用线栓法制作大鼠左侧大脑中动脉阻塞再灌流模型(MCAO),进行高压氧暴露,应用HE染色和细胞凋亡检测,观察神经细胞病理变化和细胞凋亡分布.结果:对照组随着再灌注时间的延长凋亡细胞的教逐渐增加,至24d达高峰,后逐渐减弱,至5d仍高于假手术组;高压氧暴露组凋亡细胞的数量相对较少,其变化规律与对照组相似,但是在同一时间点比较,均明显低于对照组.结论:高压氧可以抑制神经元凋亡,促进神经功能恢复.

硼替佐米治疗脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:旨在观察硼替佐咪对脑缺血再灌注损伤的保护作用.方法:将30只大鼠随机分为常规治疗依达拉奉组、硼替佐咪组、联合用药组各10只.治疗给予硼替佐米(万珂)0.2mg/kg及依达拉奉3mg/kg尾静脉注射,以上各组均在再灌注24小时取材.免疫组化法测NF-KBp65、IL-1β;TUNEL法检测神经细胞凋亡.TTC染色测脑梗死体积.结果:1.联合用药组与单独用药组相比,NF-KBp65、IL-1β免疫反应阳性细胞及凋亡细胞数明显减少,差异均有统计学意义,万珂组比依达拉奉组NF-KBp65、IL-1β免疫反应阳性细胞有所减少,差异有统计学意义.2.联合用药组与单独用药组相比,脑梗死体积明显缩小,差异均有统计学意义,万珂组与依达拉奉组比,差异亦有统计学意义.结论:在对脑缺血再灌注损伤的治疗中,联合自由基清除剂依达拉奉和蛋白酶体抑制剂万珂可同时抑制炎症反应和抗脂质过氧化反应,疗效优于单独用药.

血栓心脉宁对脑缺血再灌注大鼠脑组织IL-1β和IL-12的影响

目的:观察血栓心脉宁对大鼠脑缺血再灌注损伤后脑组织中IL-1β和IL-12表达的影响.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,线栓法制作大鼠大脑中动脉脑缺血再灌注模型,于缺血1h再灌注24h后做神经功能缺陷评估,ELISA法检测大鼠血清中IL-1β和IL-12的表达.结果:与模型组相比,治疗组神经功能缺陷评分明显降低,IL-1β和IL-12的表达显著下调,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论:血栓心脉宁对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用可能与抑制炎症因子的表达有关.

Caveolin-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的 研究银杏内酯B(ginkgolidesB,GB)在减轻大鼠脑缺血再灌注(Ischemia/Reperfusion,I/R)损伤时质膜微囊结构蛋白-1(caveolin-1,Cav-1)的变化及这种变化对GB减轻大鼠脑缺血再灌注损伤的影响.方法 2017年2—7月,徐州医科大学麻醉学重点实验室,将240～260 g的S-D雄性大鼠48只随机分为4组,每组12只:假手术+生理盐水组(Sham+NS);假手术+GB组(Sham+GB);缺血再灌注+生理盐水组(I/R+NS);缺血再灌注+GB组(I/R+GB).采用Western blot检测各组Cav-1蛋白的表达变化.采用Zea Longa 5分制对各组大鼠进行行为学评分.结果 Western blot检测显示缺血再灌注组大鼠大脑中动脉支配区域Cav-1表达较假手术组明显降低[I/R+NS vs Sham+NS、Sham+GB,(0.744±0.4090)vs(1.8804±0.2780),(1.890±0.29180)(P<0.001)];灌胃给药GB 3 d能明显抑制Cav-1的减少[I/R+GB vs I/R+NS(1.3507±0.2143)vs(0.744±0.4090)(P<0.01)].神经行为学评分显示:GB不能逆转在大脑中动脉支配脑区行立体定位注射针对Cav-1的siRNA组大鼠神经行为学评分的升高[I/R+GB+siRNA-SC vs I/R+GB+siRNA-Cav-1,I/R+NS+siRNA-Cav-1,I/R+NS+siRNA-SC(1.5605±0.3125)vs(3.769±0.2345),(3.864±0.3542),(3.674±0.2789)(P<0.001)].结论 Cav-1在灌胃给GB的脑缺血再灌注组大鼠大脑中动脉支配脑区表达较对照组升高,在相应脑区干扰Cav-1后,GB不能改善缺血再灌注组大鼠的神经行为学表现,说明Cav-1蛋白在银杏内酯B保护大鼠脑缺血再灌注损伤中起重要作用.

脑梗死缺血再灌注损伤机制的研究进展

脑缺血再灌注损伤是目前急性脑梗死的研究热点，其机制较复杂，近年来不断有研究发现脑缺血再灌注损伤还与Na+-K+-ATP酶、谷胱甘肽过氧化物酶、一氧化氮合酶、过氧化物酶体增殖受体γ、Caspase-3、水通道蛋白4等有关。通过这些研究，可以尽早地给予干预措施，减轻脑梗死后再灌注损伤的程度，挽救更多的濒死脑组织，提高患者日常生活能力。

慢性间歇性缺氧合并脑缺血再灌注动物模型的研究

目的:通过慢性间歇性缺氧(CIH)合并脑缺血再灌注(CIR)大鼠模型的建立,研究睡眠呼吸暂停综合征(0SAS)对脑梗塞的影响.方法:2月龄Sprague-Dewley(SD)大鼠34只,随机选取10只在缺氧箱中行血氧检测,余随机分成4组:空白对照组(UC,n=6),假手术组(n=6),CIR组(n=6),CIH+CIR 组(n=6).CIH+CIR组大鼠每天间歇性缺氧8小时.UC组、假手术组及CIR 组暂不作处理.8周后CIR组和CIH+CIR组均用线栓法制备大脑中动脉缺血(MCAO)模型.通过神经功能缺损评分观察大鼠大体情况;2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色观察脑梗死体积.结果:CIH+CIR组与CIR组梗死体积和神经功能评分均有明显的差异.结论:本实验建立的慢性间歇性缺氧合并脑缺血再灌注大鼠模型可满足OSAS+脑梗死基础研究的需要,CIH可加重脑缺血再灌注损伤.

"贺氏三通法"对脑缺血再灌注大鼠模型血浆β-EP、ACTH的影响

目的 观察"贺氏三通法"对脑缺血再灌注模型大鼠血清血浆β-内啡肽(β-EP)和促肾上腺皮质激素(ACTH)含量变化的影响,探讨针刺对大鼠脑缺血再灌注后机体反应的调节机制.方法 采用线栓法制备大鼠右侧大脑中动脉脑缺血再灌注模型,将接受针刺的大鼠分为3 h、6 h、48 h三组分别运用"贺氏三通法"予以治疗,然后采用放射免疫法检测血清血浆β-EP和ACTH含量.结果 各组脑缺血再灌注大鼠血浆β-EP含量均明显增高,而ACTH呈下降趋势,但以3 h组逆转β-EP与ACTH的比值失调更为明显.结论 "贺氏三通法"针法可以调节脑缺血再灌注大鼠β-EP与ACTH的比值失调,而以3 h组效果为理想.

3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织MPO与ICAM-1表达影响的比较研究

目的 比较益气活血方、镇肝熄风汤与星蒌承气汤3种中药复方对脑缺血再灌注大鼠脑组织髓过氧化物酶(MPO)活性与细胞间黏附分子-1(ICAM-1)蛋白表达的动态影响.方法 采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,随机分为假手术组、模型组、益气活血方组、镇肝熄风汤组和星萎承气汤组,采用比色法测定MPO活性、免疫组织化学染色SABC法检测I-CAM-1表达.结果 模型组再灌注各时间点脑组织MPO活性显著增高,ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著增加(P＜0.05或P＜0.01);24h和48h时各治疗组MPO活性显著降低,72h时益气活血方与镇肝熄风汤MPO活性显著降低(P＜0.05或P＜0.01),且24h时星萎承气汤优于其它治疗组(P＜0.01);24h和72h时各治疗组ICAM-1蛋白表达阳性细胞数显著减少(P＜0.05或P＜0.01),48h时星蒌承气汤组显著减少(P＜0.01),且24h以镇肝熄风汤组优于其它治疗组,48h星蒌承气汤组优于其它治疗组(P＜0.05或P＜0.01).结论 3种中药复方可以通过降低MPO活性,抑制ICAM-1蛋白表达,抗脑缺血再灌注损伤,24h(MPO)、48h(ICAM-1)星萎承气汤作用效果佳,24h(ICAM-1)镇肝熄风汤组作用效果佳.

"贺氏三通法"对脑缺血再灌注模型大鼠血清IL-18和IL-1水平的影响

目的 观察"贺氏三通法"对脑缺血再灌注模型大鼠血清白细胞介素-18(IL-18)及白细胞介素-1(IL-1)水平的影响.方法 将SD成年雄性大鼠随机分为假手术组(8只)、模型对照组(8只)、针刺组(24只)、药物组(16只).采用线栓法制备脑缺血再灌注大鼠模型.造模成功后,针刺组分别于3 h、6 h、48 h(每时段8只)予"贺氏三通法"针刺,药物组于5 h、48 h予香丹注射液腹腔内注射.模型制备成功后72 h取材,采用双抗体夹心ABC-EUSA法检测血清IL-18,放射免疫法检测血清IL-1含量.结果 模型对照组IL-18和IL-1水平较假手术组明显增高,差异有统计学意义(均P<0.01);48 h针刺组IL-18水平较模型对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);6 h、48 h针刺组IL-1水平均较模型对照组降低,差异有统计学意义(均P<0.01);针刺组与相应时间介入的药物对照组比较均无显著差异(P>0.05).结论 "贺氏三通法"可改善脑缺血再灌注后血清IL-18和IL-1水平.提示"贺氏三通法"可能通过调节IL-1、IL-18的紊乱,参与对脑缺血再灌注脑损伤的保护机制.

清脑滴丸对急性脑缺血再灌注大鼠JNK蛋白与细胞凋亡的影响

目的 从JNK蛋白表达探讨清脑滴丸治疗急性脑缺血再灌注损伤引发细胞凋亡的作用机制.方法 线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,随机分为假手术组、脑缺血1.5h再灌注24h模型组(I1.5hR24组)和清脑滴丸治疗组.TTC染色检测脑梗死面积,Western blot法检测大脑缺血侧皮层的JNK及磷酸化蛋白表达,TUNEL法检测细胞凋亡.结果 与假手术组比较,I1.5hR24组大鼠脑梗死面积增大,p-JNK蛋白表达明显增加,细胞凋亡明显;清脑滴丸治疗组p-JNK蛋白相对含量减少,细胞凋亡抑制,脑梗死面积减小,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 清脑滴丸可能通过抑制JNK磷酸化蛋白过表达,降低细胞凋亡,从而减轻脑缺血再灌注的损伤.

乙酰葛根素对大鼠脑缺血再灌注VEGF表达的影响

目的 探讨脑缺血再灌注后乙酰葛根素的脑保护作用及其机制.方法 线栓法制作脑缺血再灌注模型,分别对假手术组、脑缺血再灌注组、葛根素组、乙酰葛根素低(10 mg·kg-1)、中(50mg·kg-1)、高剂量(250mg·kg-1)干预组实验标本作HE染色,采用免疫组化方法观察测定各组大鼠脑内的VEGF的表达情况并进行神经功能缺损评分.结果 脑缺血再灌注组与假手术组比较,VEGF表达增多(P<0.01),药物干预组较缺血再灌注组VEGF表达均增多(P<0.01),且神经元损伤较轻,且三个剂量的表达有显著差别(P<0.01).结论 乙酰葛根素对脑缺血再灌注有明显的保护作用,诱导VEGF表达可能是其对脑缺血再灌注损伤起保护作用的机制之一.

电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织bFGF、ES表达的影响

目的 观察电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠梗死灶周围碱性成纤维细胞因子(bFGF)及内皮抑素(ES)表达的影响.方法 80只SD大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、电针组,每组10只,采用免疫组织化学(SABC)法观察电针对局灶性脑缺血再灌注模型bFGF、ES表达的影响.结果 电针组bFGF表达明显高于模型组(P＜0.01)；ES的表达明显低于模型组(P＜0.01).结论 电针可增强脑缺血大鼠脑内bFGF的表达,同时降低ES的表达,可能为电针促进脑缺血大鼠缺血区血管新生的机制之一.

333 芪术汤的抗氧化潜力及其对大鼠脑缺血再灌注氧化损伤的作用

丹红合剂对大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含水及含钙量的影响

目的 研究丹红合剂对大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量及含钙量的影响.方法 选取健康SD大鼠60只,按照随机数字表随机分为6组,分别为假手术组、模型对照组,采用4血管法造脑缺血再灌注损伤模型,给药组分别给予不同剂量的丹红合剂和复方丹参注射液,观察丹红合剂对大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量及含钙量的影响.结果 丹红合剂高剂量组可降低大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量(75.84％)及含钙量(114.56 μg/g).丹红合剂中剂量组可降低大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量(80.13％)；降低大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含钙量(132.35 μg/g).丹红合剂低剂量组对大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量(73.94％)及含钙量(106.32.μg/g)有降低趋势,但差异无统计学意义.结论 丹红合剂能降低大鼠急性脑缺血再灌注损伤脑组织含水量及含钙量,提示其具有脑保护作用.

不同时间窗电针对脑缺血再灌注大鼠脑组织中HSP70表达及神经元凋亡的影响

目的 观察不同时间介入电针对局灶性脑缺血再灌注大鼠脑组织热休克蛋白(HSP) 70表达及神经元凋亡的影响.方法 线栓法复制大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,分别于缺血后0.5 h、2h、6h、12h介入电针.用免疫组化法检测缺血侧脑组织中HSP70的表达,用原位细胞凋亡法检测凋亡细胞,分别测定梗死侧皮质半暗带区和海马CA1区的平均光密度值、凋亡阳性细胞数.结果 与模型组比较,各电针组HSP70表达显著升高,0.5h半暗带区及海马CA1区分别为(89.98±6.55)、(128.73±8.03),2h分别为(90.96±6.38)、(132.25±8.78),6h分别为(93.71±6.12)、(132.58±7.04),12h分别为(96.19±7.30),(133.57±6.19).皮质半暗带区凋亡细胞数明显减少,0.5 h(1.80±0.84)、2 h(3.40±1.14)、6 h(5.00±1.00)、12 h (5.00±2.45),但海马CA1凋亡细胞数仅在缺血后0.5 h电针组显著减少(1.60±1.89).结论 电针可增强HSP70的表达,减少细胞凋亡.从而在脑缺血后神经元保护方面起到重要作用；电针疗法对于缺血再灌注大鼠发挥肯定的脑保护作用,电针应尽早介入缺血性卒中的治疗.

八味沉香散对脑缺血再灌注损伤模型大鼠的保护作用

目的 探讨八味沉香散对脑缺血再灌注损伤大鼠的保护作用及其作用机制.方法 取健康SD大鼠90只,按体重采用随机区组法分为6组各15只,即假手术组、模型组(此两组给予等量生理盐水)、尼莫地平组( 10.0 mg/kg)、八味沉香散高剂量组(20.4 g/kg)、八味沉香散中剂量组(10.2 g/kg)、八味沉香散低剂量组(5.6 g/kg).采用颈内动脉线栓法制备大鼠右侧大脑MCAO模型,观察八味沉香散不同剂量组对大鼠行为学、脑含水量、脑梗死面积、SOD、MDA及组织形态学变化的影响.结果 与模型组[(2.72±0.82)分]比较,八味沉香散各组的大鼠的神经行为学评分[高、中、低剂量组分别为(1.53±0.97)分、(1.65±0.97)分、(1.82±1.24)分]均降低,脑水肿减轻,脑梗死面积缩小,脑组织病理形态学改善,SOD活性[(13.66±0.93) U/mg、(12.74±2.49) U/mg、(12.18±5.32) U/mg]提高,MDA含量[(6.14±1.26) nmol/mg、(6.16±1.96) nmol/mg、(6.57±1.38) nmol/mg]减少.结论 八味沉香散高、中剂量组对脑缺血损伤具有明显的保护作用,其机制可能与改善自由基含量、抗脂质过氧化有关.

阿魏酸钠与人参皂苷Rg1协同神经保护作用及其机制

目的 观察阿魏酸钠和人参皂苷Rg1协同神经保护作用并探讨其作用机制.方法 复制大鼠脑缺血再灌注损伤模型,观察阿魏酸钠、人参皂苷Rg1及联合用药对梗死灶体积、凝集素标记阳性细胞、过氧化物酶体增殖物激活受体γ mRNA表达、SOD活性、MDA含量的影响.结果 TTC染色显示空白对照组未见脑梗死灶,模型对照组、阿魏酸钠组、人参皂苷Rg1组、联合用药组脑梗死体积百分比分别为44.2％、25.0％、20.4％、6.2％;空白对照组、模型对照组、阿魏酸钠组、人参皂苷Rg1组及联合用药组凝集素阳性细胞个数分别为11.4、44.6、27.8、23.0、13.4个/500μm2; PPAR-γmRNA表达分别为1883、1022、1473、1537、1843; MDA含量分别为1.52、3.50、2.62、2.38、1.66 mmol/mg; SOD活性分别为71.54、73.14、81.72、82.22、91.10 U/mg.与模型对照组相比,阿魏酸钠组、人参皂苷Rg1组、联合用药组均可明显减少脑梗死灶体积(P＜0.01),抑制小胶质细胞激活(P＜0.01),增加过氧化物酶体增殖物激活受体γmRNA表达(P＜0.01)、降低MDA含量(P＜0.01)、增加SOD活性(P＜0.05,P＜0.01),且联合用药组效果优于阿魏酸钠、人参皂苷Rg1单独用药组(P＜0.05,P＜0.01).结论 阿魏酸钠与人参皂苷Rg1具有协同神经保护作用,对过氧化物酶体增殖物激活受体γ的协同激活可能是其机制之一.

同仁大活络丸对脑缺血再灌注损伤大鼠恢复早期的神经保护作用

目的:探讨同仁大活络丸对脑缺血再灌注损伤大鼠恢复早期的神经保护作用及其作用机制.方法:采用线栓法制作大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,术后3～14天灌胃给药,观察同仁大活络丸对大鼠神经功能缺损症状、肢体运动感觉功能,脑皮质中超氧化物歧化酶(SOD)、脂质过氧化物丙二醛(MDA)、白介素6(IL-6)、白介素10(IL-10)、核转录因子p65(NF-kBp65)含量变化的影响.结果:与模型组相比,同仁大活络丸能明显改善神经功能缺损症状,明显改善横木行走能力,提高抓握力量;显著提高脑皮质中SOD活力、减少MDA含量;明显降低IL-10和NF-kBp65含量.结论:同仁大活络丸对大鼠脑缺血再灌注损伤恢复早期具有神经保护作用,其机制可能与提高脑皮质SOD的活性,减少脂质过氧化物生成,降低炎症因子IL-10和核转录因子NF-kBp65等作用有关.