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桦木酮酸体外抗肿瘤实验的初步研究
研究桦木酮酸(betulomov acid)对人胃癌细胞(SGC-7901)和人肝癌细胞(HepG-2)的作用.采用噻唑蓝(MTT)比色法考察上述两种肿瘤细胞株对桦木酮酸及常用抗癌药VP-16的敏感性.实验可知,SGC-7901细胞对桦木酮酸较HepG-2敏感,其中,两种肿瘤细胞的IC50分别为68.14μmol/L和110.77μmol/L.因此,桦木酮酸可一定程度地抑制肿瘤细胞增殖,可作为一种特异性的细胞增殖抑制剂.
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路路通药材中桦木酮酸定性定量方法的研究
目的:建立路路通药材中桦木酮酸的鉴别和含量测定方法.方法:薄层色谱法鉴别.药材用醋酸乙酯提取,在以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,用石油醚(60～90℃)-丙酮(17:3)展开,磷钼酸显色;高效液相色谱法进行含量测定.样品用无水乙醇超声提取.Diamonsil C18柱,甲醇-水-冰醋酸(87:13:0.1)为流动相,流速1.0mL·min-1,柱温35℃,蒸发光散射检测器蒸发管温度82℃,气体流速1.25L·min-1.结果:薄层色谱鉴别重现性好;在上述液相色谱条件下,桦木酮酸获较好分离,进样量在0.65～3.25μg其对数与峰面积对数呈线性关系(r=0.999 7),加样回收率为98.0%,重复性为2.5%.对收集的11批商品药材进行了定性鉴别和含量测定.结论:本研究为路路通质量标准的建立提供可借鉴的方法.
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蓝桉果实化学成分的研究
目的:研究蓝桉Eucalyptus globulus果实的化学成分.方法:应用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析等方法进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据等进行结构鉴定.结果:从蓝桉果实中分离得到12个化合物,鉴定了其中5个化合物:桦木酮酸 Ⅰ,白桦脂酸Ⅱ,熊果酸Ⅲ,2α,3β-二羟基乌苏酸Ⅳ.结论:化合物I,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ均为首次从该植物中分离得到.
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桦木酮酸对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞周期及相关蛋白表达的影响
目的:研究桦木酮酸对H22荷瘤小鼠肿瘤细胞周期及相关蛋白表达的影响.方法:采用流式细胞仪检测H22肿瘤细胞细胞周期的变化以及P53蛋白的表达变化;免疫组化法检测H22细胞中的PI3K和AKT蛋白.结果:随桦木酮酸剂量的增加,H22细胞S期和G2期的含量逐渐增多且P53蛋白的表达随之升高,而PI3K和AKT蛋白的表达降低.结论:桦木酮酸可能上调P53的活性,抑制PI3K和AKT蛋白,从而抑制细胞的存活通路促凋亡.
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RP-HPLC法测定蓝桉果实总三萜酸中三种三萜酸
蓝桉Eucalyptus globulus Labill.为桃金娘科植物,蓝桉果实作为民间使用的一种中药,具有治疗感冒发热、抗菌消炎、跌打损伤、抗癌以及治疗真菌引起的皮肤病等作用.本课题组已对蓝桉果实进行过资源调查[1]、挥发性成分研究[2],同时在对蓝桉果实的有效部位化学成分进行研究时发现蓝桉果实富含有三萜酸[3].对其提取所得到的总三萜酸(Eucalyptus triterpenoid acids,简称ETA)曾用比色法进行过定量测定[4],为了进一步深入研究蓝桉果实中的ETA,本实验采用RP-HPLC法,对其中成分明确的3种三萜酸--熊果酸、桦木酮酸、白桦脂酸进行了测定.本研究建立了分离效果好、专属性强的高效液相色谱法测定其中的3种三萜酸的方法,结果满意,可作为蓝桉果实中ETA质量控制的指标之一.
