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趋磁细菌的分离与培养
目的：趋磁细菌是一类能沿着磁力线运动的细菌。本研究从黑龙江省哈尔滨市松蒲镇松花江水域的泥水界面采集泥水样，用自制装置进行样品的富集、趋磁细菌的磁选，对磁选后的细菌进行培养和提取分离，经过电镜可观察到趋磁细菌体内的磁小体，证明已分离得到一株趋磁细菌。
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生物磁性纳米材料--磁小体在医学中的应用研究
趋磁细菌（Magnetotactic bacterium）是一类在外磁场的作用下能作定向运动并在体内形成磁性纳米颗粒－磁小体（Magnetosome）的细菌。磁小体表面有生物膜包被，且具有纳米级磁性颗粒的特性，因此受到国内外学者的广泛关注。本文综述了生物磁性纳米材料——磁小体的基本特征，提纯方法，并对磁小体在医学成像、药物传递、肿瘤热疗等医学方面的应用进行了综述。
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趋磁细菌磁小体靶向输送pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物治疗骨肉瘤
背景:在外加变化磁场作用下,磁小体可侵入肿瘤细胞,抑制其增殖.目的:研究趋磁细菌磁小体靶向输送pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物治疗骨肉瘤的效果.方法:将人源骨肉瘤细胞株U2OS分4组培养,A组加入趋磁细菌磁小体载pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物系统.B组加入趋磁细菌磁小体载pHSP-shNC/阿霉素复合物系统.C组加入趋磁细菌磁小体载pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物系统,同时给予磁场干预.D组加入趋磁细菌磁小体载pHSP-shNC/阿霉素复合物系统,同时给予磁场干预.pHSP-shNC为pHSP70-shPLK1的空白对照.培养12,24,48,72 h,观察骨肉瘤细胞对复合物的摄取率,流式细胞术观察细胞周期,RT-PCR法和Western blot法检测细胞中PLK1 mRNA和蛋白表达水平,MTT法检测细胞增殖,黏附实验和Transwel小室检测细胞黏附性和侵袭能力,凋亡试剂盒检测细胞凋亡率.结果与结论:①培养12,24 h,D组摄取率高.培养48,72 h,B组摄取率高.②A组、C组和D组G2/M期比率逐渐降低,G0/G1期比率逐渐增加,C组G2/M期比率各时间点低,其次为D组,A组高.B组G2/M期比率逐渐增加.③培养12,24 h,B组、D组PLK1表达高于A组、C组(P<0.05).培养48,72 h,B组PLK1表达高于其余3组(P<0.05),D组高于A组、C组(P<0.05).④B组不同时间点的细胞增殖、黏附率及侵袭能力高,细胞凋亡率低.C组不同时间点的细胞增殖、黏附率及侵袭能力低,细胞凋亡率高.⑤结果表明,趋磁细菌磁小体靶向输送pHSP70-shPLK1/阿霉素复合物能够增强骨肉瘤细胞凋亡的发生,抑制其增殖和侵袭.
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趋磁细菌纳米磁小体的培养与分离及其在医学上的应用进展和前景
趋磁细菌是一种对磁场有趋向性反应的细菌,其原因是它们体内能合成一种特殊的细胞器-磁小体;由于磁小体有着大小合适,磁性强,表面易修饰等诸多优点,在诸多领域,尤其是医学领域有广泛的应用和广阔的前景.本文主要就从环境中区分和分离趋磁细菌;对其不同培养条件的优化与选择;从细菌体内提取磁小体并加以纯化;将不同药物偶联于磁小体之上的方法及其在医学上如,制造磁性细胞,磁分离技术,生物传感与检测技术,并将其作为靶向药物的载体,肿瘤治疗,基因治疗等方面的应用现状和前景作简要论述.
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趋磁细菌及其应用于生物导航的研究进展
趋磁性细菌是一种由于体内含有对磁场具有敏感性的磁小体,而能够沿着磁力线运动的特殊细菌,本文综述了趋磁细菌的分布、分类、特性、磁小体研究以及趋磁细菌在生物导航方面的研究进展.
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趋磁细菌WM-1的培养条件优化研究
采用正交设计实验法研究了趋磁细菌WM-1产磁性细胞的培养条件.并利用L16(44)方案,用16个实验完成了4种培养条件、4个水平的优化工作.研究结果表明,培养基的pH值是影响趋磁细菌WM-1产磁性细胞的重要因素,正交实验结果在90%的置信区间可信.在优的培养条件下,即pH为7.0,氧气的浓度为4%,m酒石酸:m琥珀酸为1:1,NaNO3 100mg l-1条件下,磁性细胞的浓度提高到6.5×107 cells ml-1,比优化前提高了约8.3%.趋磁细菌WM-1磁滞回线的测量表明,Hc=230 Oe,Ms=0.9 emu/gdry wt.Cells,及Mr/Ms=0.50.
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趋磁细菌磁小体研究进展
磁小体是由趋磁细菌合成的细胞内结构,是一种表面包裹有脂质双分子层膜的磁性纳米颗粒,可以结合不同的生物分子.此外,磁小体粒度分布范围窄,形态均一,具有生物相容性高、毒性较低的特性,在生物技术领域的应用广泛,如作为磁共振成像对比剂,利用其在外加变化磁场中产生的磁热治疗肿瘤,作为药物输送载体,利用其磁性分离病原菌及DNA等.本文就磁小体的特性及其在临床上的应用进行了概述.
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α变形菌纲磁螺菌属TaqMan探针实时荧光定量PCR快速检测方法的建立
目的 建立一种快速有效检测环境中α变形菌纲磁螺菌属细菌的方法.方法 本研究以α变形菌纲磁螺菌属保守且特异的16SrRNA片段为靶序列,化学合成基因序列,制备重组质粒作为磁螺菌属检测的标准品;用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)技术,针对目的片段基因设计特异性引物和TaqMan荧光探针,进行实时荧光定量PCR检测,运用统计学方法评价该方法的特异性、敏感性及重复性.结果 本实验成功构建了质粒PUC19-QC,引物、探针特异性良好,标准曲线在5.10×10～15.10xl07拷贝数之间具有较好的线性关系,相关系数R2=0.999.该法低可检测到5.10x 10个DNA拷贝数,灵敏度明显高于普通PCR;重复性试验表明,荧光定量PCR检测结果Ct值波动范围较小,Ct值的标准差均小于0.23,表明该法重复性好,可靠性高.析因方差分析表明不同稀释度之间的Ct值差异有统计学意义(F=3 125.305,P＜0.001),三个批次的再现性良好,差异无统计学意义(F=0.057,P=0.945),而浓度分组与时间之间也无交叉效应(F=0.533,P=0.873).结论 本实验所建立的TaqMan探针实时荧光定量PCR检测技术,能够快速有效地检测α变形菌纲磁螺菌属细菌,且检测结果稳定,受外界条件如时间、气温等影响小.
