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冬凌草甲素通过调控miRNA-125a诱导肝癌细胞HepG2凋亡的研究
目的 探讨冬凌草甲素通过调控微小核糖核酸125a(RNA-125a)诱导肝癌细胞HepG2凋亡以及相关机制.方法 冬凌草甲素(10,20,30,40,50,70,1000 μmol·L-1)处理HepG2肝癌细胞24h,用MTT法测定细胞的增殖情况;用Hoechst 33342染色检测细胞形态改变;用实时定量荧光PCR(real-time PCR)检测miRNA-125a与血管内皮生长因子(VEGF) mRNA表达,免疫细胞化学法检测VEGF蛋白表达.结果 冬凌草甲素能浓度依赖性地抑制HepG2细胞的增殖(P＜0.05),HepG2细胞核形态明显改变;HepG2细胞经冬凌草甲素作用24h后,miRNA-125a表达上调,而VEGF mRNA表达下调(P＜0.05);而高剂量冬凌草促进miRNA-125a表达以及抑制VEGF表达的作用显著(P＜0.01).结论 冬凌草甲素可通过上调miRNA-125a,使VEGF表达减少,而诱导肝癌细胞HepG2凋亡.
关键词： 冬凌草甲素 肝癌 微小RNA-125a 血管内皮生长因子 -
宫颈癌组织中miRNA-125a、STAT3、 IL-10的表达变化及意义
目的 探讨微小RNA-125a(miR-125a)、信号转导及活化因子3(STAT3)、IL-10在宫颈癌组织中的表达变化及意义.方法 分别采用RT-qPCR、qRT-PCR法检测56例份宫颈鳞癌组织(宫颈癌组)和40例份宫颈正常上皮组织(对照组)中miR-125a、STAT3和IL-10 mRNA的相对表达量,并分析在宫颈癌组中三者之间的相关性;免疫组织化学Elivision二步法检测两组STAT3及IL-10的蛋白表达.分析miR-125a和STAT3 mRNA的表达与宫颈癌患者临床病理特征的关系.结果 与对照组比较,宫颈癌组中miR-125a mRNA相对表达量降低,而STAT3和IL-10的mRNA相对表达量升高(P均＜0.05);且STAT3和IL-10的相对表达量呈正相关(r=0.457 8,P＜0.05);与对照组比较,宫颈癌组STAT3蛋白阳性表达率升高(P＜0.05).miR-125a的表达与宫颈癌组织分化程度、淋巴结转移和临床分期均有关(P均＜0.05);STAT3的表达与淋巴结转移和临床分期均有关(P均＜0.05).结论 宫颈癌组织中miR-125a表达降低,STAT3和IL-10表达升高;其三者可能互相作用,参与宫颈癌的发生发展.
关键词： 宫颈癌 微小RNA-125a 信号转导及活化因子3 白细胞介素10 -
微小RNA-125a通过Notch通路抑制肺癌细胞侵袭、迁移和增殖
目的 探讨微小RNA(miRNA,miR)-125a在肺癌细胞侵袭、迁移和增殖能力的影响及其机制.方法 miR-125a类似物(miR-125a-mimic)过表达miR-125a,聚合酶链反应(PCR)检测过表达效率;Transwell侵袭实验检测miR-125a-mimic对肺癌细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测miR-125a-mimic对肺癌细胞迁移能力的影响;细胞计数试剂盒(CCK-8)检测miR-125a-mimic对肺癌细胞增殖能力的影响;Western blot检测miR-125a-mimic处理后,肺癌细胞Notch-1、Notch细胞内结构域(NICD)-1和分裂酶(Hes)-1蛋白的表达;荧光素酶报告基因检测miR-125a与Notch-1的相互作用;裸鼠皮下成瘤实验检测miR-125a-mimic对肺癌成瘤大小以及体积的影响,免疫组织化学检测对照组和miR-125a-mimic组中Notch-1的表达.结果 miR-125a-mimic可以显著提高miR-125a的表达水平(0.22±0.03比0.89±0.13,P=0.008);miR-125a-mimic可以抑制肺癌H1975细胞的侵袭、迁移和增殖能力[24h:(0.38±0.02)%比(0.19±0.01)%, P=0.025;48h:(0.72±0.05)%比(0.38±0.04)%, P=0.035;72h:(0.86±0.08)%比(0.43±0.04)%, P=0.019];miR-125a-mimic可以下调Notch-1、NICD-1和Hes-1蛋白的表达;Notch-1是miR-125a的直接靶点;与NC组比较,miR-125a-mimic组荷瘤小鼠肿瘤体积和重量都明显变小[体积:(2.73±0.13)cm3比(0.34±0.03)cm3,P=0.039;重量:(2.19±0.13)g比(0.36±0.03)g,P=0.028],免疫组织化学结果显示与NC组比较,miR-125a-mimic组中Notch-1表达明显降低.结论 miR-125a通过Notch通路抑制肺癌细胞侵袭、迁移和增殖能力.
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微小RNA-125a在骨肉瘤组织的表达及其临床意义
目的 检测骨肉瘤组织及其癌旁组织中微小RNA(miRNA,miR)-125a基因表达差异,分析miR-125a表达水平差异与患者临床病理特征的相关性.方法 收集郑州市骨科医院2014年10月至2015年12月20对骨肉瘤患者癌组织及其对应癌旁组织手术标本,提取20对标本总RNA,实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测骨肉瘤组织及其癌旁组织标本中miR-125amRNA表达差异,分析miR-125a表达与患者临床病理特征的相关性.结果 20对配对骨肉瘤及其癌旁组织RT-qPCR检测结果显示,与癌旁组织比较,miR-125a在12例癌组织中呈低表达,占总体样本的73.33％ (12/20),癌组织中miR-125a mRNA的相对表达量为(0.4098 ±0.0673)明显低于癌旁组织(0.932 7 ±0.081 6),差异有统计学意义(t=2.920,P=0.010),且两者之间的平均表达差异达2.28倍.临床资料分析结果显示,miR-125a在骨肉瘤组织中的表达差异与骨肉瘤患者病理分期(x2=23.375,P=0.000)、是否规律化疗(x2=4.444,P=0.035)及有无肺转移(x2=4.469,P=0.043)关系密切;与年龄、性别无关(x2=0.317,P=1.000).结论 miR-125a在骨肉瘤组织中的表达明显低于其相应的癌旁组织;miR-125a与骨肉瘤的Enneking外科分期、有无肺转移及是否规律化疗显著相关.
关键词： 骨肉瘤 微小RNA-125a 实时定量反转录聚合酶链反应
