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载基因阳离子脂质体的制备与包封率测定
目的:制备包封基因质粒的阳离子脂质体并考察其性质、测定包封率.方法:以DC-Chol和DOPE为材料,薄膜分散法制备阳离子脂质体,与可表达增强型绿色荧光蛋白的基因质粒结合并考察其转染性能,激光粒度分析仪测定阳离子脂质体和脂质复合物的粒径及Zeta电位；使用葡聚糖凝胶过滤法测定包封率,并对该法进行详细考察.结果:所制备的阳离子脂质体和脂质复合物的平均粒径分别为161.6和216.3 nm,Zeta电位分别为+22.2和+3.2 mV;基因质粒在0.1925 ～3.85 μg·mL-1浓度范围内线性良好,精密度高,与葡聚糖无吸附作用,柱回收率高,测得脂质复合物的包封率为89.94%.结论:采用该处方和工艺可成功制备质量良好、能有效转染细胞的阳离子脂质体载体,葡聚糖凝胶过滤法可准确测定其包封率,该法快速、简便、有效.
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水飞蓟宾纳米结构脂质载体中主药含量及包封率测定
目的 建立测定水飞蓟宾纳米结构脂质载体中主药含量及包封率的方法.方法 采用高效液相色谱法测定药物含量,色谱柱为Kromasil C18柱(4.6 mm×150 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.35 mol·L-1醋酸(48:52),流速为1 mL·min-1,检测波长为288 nm;分别采用离心超滤法、葡聚糖凝胶过滤法分离水飞蓟宾纳米结构脂质载体和游离药物以测定包封率.结果 水飞蓟宾在1～40 mg·L-1内线性良好(r=0.9998),平均回收率为99.57%(RSD=0.52%),离心超滤法及葡聚糖凝胶过滤法测得平均包封率分别为96.87%,84.20%.结论 采用离心超滤法分离脂质载体与游离药物,高效液相色谱法测定药物含量,可高效、准确、方便地测定水飞蓟宾纳米结构脂质载体包封率.
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甘草次酸-丹参酮ⅡA复方脂质体包封率测定方法研究
目的 建立甘草次酸-丹参酮ⅡA复方脂质体(GT-Lip)包封率的测定方法.方法 分别采用葡聚糖凝胶过滤法、低速离心法分离脂质体和游离药物.以HPLC法为分析手段,比较该2种方法包封率的测定结果.结果 葡聚糖凝胶G-50 (M)对脂质体有一定吸附,不适合GT-Lip包封率的测定;低速离心法能使GT-Lip脂质体与游离药物有效分离,经HPLC法测定,丹参酮ⅡA(TSN)与甘草次酸(GA)平均包封率分别达到(81.50±0.76)％和(98.63±0.90)％.结论 HPLC法与低速离心法相结合可快速、有效用于甘草次酸-丹参酮ⅡA复方脂质体的包封率测定.
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穿琥宁脂质体包封率的测定
采用乙醇注入法制备穿琥宁脂质体.分别采用葡聚糖凝胶过滤法、透析法、超速冷冻离心法分离脂质体和游离药物,计算脂质体包封率.结果表明,3种方法中超速冷冻离心法测得的平均包封率高.4℃离心(268000×g)2h后,测得平均包封率为96.9%.
