首页 > 文献资料
-
细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应
目的:建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属(铜、镉、锌)及类二噁英化合物五氯联苯( PCB126)等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列,构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点,将pTol2-CYP3A65-EGFP 质粒与pCS-TP 转座酶mRNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞,通过荧光筛选,遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系 Tg ( CYP3A65-EGFP);利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及 PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系,绿色荧光在肝和消化道表达;该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后,铜0.1和0.2μmol·L-1、镉0.35和0.7μmol·L-1组、锌1.5和3μmol·L-1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01);铜0.9μmol·L-1组、镉2.7和5.4μmol·L-1组及锌24μmol·L-1组荧光相对表达量显著减弱( P<0.01);染毒168 h 后,铜0.1和0.2μmol·L-1组、镉0.35和0.7μmol·L-1组、锌1.5和3μmol·L-1组及PCB1262~32μmol·L-1浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01),铜0.9μmol·L-1组、镉2.7和5.4μmol·L-1组、锌12和24μmol·L-1组荧光相对表达量减弱( P<0.05),随着浓度增加荧光减弱,呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。