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自动样品净化系统分析鱼样中二(口恶)英和共平面多氯联苯
为评价自动样品净化系统在分析食品样品中17种二(口恶)英(PCDD/Fs)与12种共平面多氯联苯(PCBs)上的应用,以鱼样有证标准参考物对系统进行验证.鱼肉标准参考物质经索式抽提、FMSPower Prep系统净化后浓缩,使用高分辨气相色谱-高分辨质谱联用仪以多离子检测方式和同位素稀释技术对样品中的目标化合物进行定性和定量.样品中PCDDs/Fs同位素内标的平均回收率为62.4%～84.3%,共平面PCBs同位素内标的平均回收率为53.1%～89.2%.3个不同浓度水平的有证标准参考物的TEQ测定值均与参考值符合.FMS Power Prep样品净化系统可以满足食品样品中PCDD/Fs和共平面PCBs的分析要求.
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食品中多氯联苯分析前处理技术进展
样品前处理是食品中多氯联苯分析的关键步骤,近几年在食品中多氯联苯的提取、净化和分离方面出现了一些新技术.超临界流体萃取、微波辅助提取、加速溶剂萃取等使样品的提取时间缩短并减少了溶剂用量.自动净化装置以及新型高效液相色谱柱等新的净化、分离手段使这一过程大为简化.
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二噁英、多氯联苯和氯丙醇的痕量与超痕量检测技术研究
为建立食品中二噁英、多氯联苯和氯丙醇的检测技术并达到国际水平,将稳定性同位素稀释质谱技术应用到中国食品安全和环境分析领域,针对不同目标化合物分别建立了高分辩磁质谱、四极杆低分辩质谱和离子阱串联质谱的标准化检测技术,特别是采用双同位素稀释同时测定4种氯丙醇的技术.通过对EPA1613A/1668A、FDA 4084和EPS1/RM/31、AOAC 2000.01等国际先进方法用食品(鱼、鱼油、鹿肉、奶粉和猪油)和环境样品(飞灰、土壤和底泥)开展对比筛选和一系列实验室间协同性验证,确立了二噁英和多氯联苯的稳定性同位素稀释质谱检测方法,建立了用双稳定性同位素进行酱油中单氯取代和双氯取代氯丙醇同时测定的方法,提出了符合国际规范的技术方案,作为国家标准方法待颁布.利用该检测技术在中国首次开展鱼贝类和土壤中污染的二噁英和多氯联苯同系物类型特征指纹库研究和酱油中氯丙醇的大规模调查,获得了中国人群膳食二噁英毒性当量和氯丙醇摄入状况的暴露数据,不仅证明所建立的方法实用、可行,也为我国履行承诺摸清了家底,提供了依据.
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我国某海域海鱼中二噁英污染分析
目的对我国某海域20个海鱼样品进行了二噁英污染状况的定量分析检测,并对该地区人群从鱼获得的膳食暴露进行了初步评估.方法 2003年6月至12月采集海水养殖鱼7类,20个样品.采用索式抽提装置、FMS专用净化装置对样品进行提取、纯化和富集,采用国际权威标准方法高分辨气相色谱/高分辨双聚焦磁式质谱联用(HRGC/HRMS)技术,以HRGC/HRMS-多离子检测方式分析了样品中的17种氯化二苯并二噁英和氯化二苯并呋喃(PCDD和PCDF)化合物的含量,用放射性核素稀释技术定量.结果质控样品对方法的验证结果在国际认可的范围内,3次检测数据的相对标准偏差＜15%.20个海鱼样品的总PCDD/PCDF平均含量以湿重计是1.48 ng/kg,范围分布在0.21～8.10 ng/kg湿重,以世界卫生组织毒性当量因子(WHO-TEF)计,样品总毒性当量浓度(WHO-TEQ)分布于0.030～1.291 ng/kg湿重之间,平均总的毒性当量浓度是0.292 ng/kg.以该TEQ值进行估算,该地区人群由鱼引起的二噁英污染暴露量估计为每日每公斤体重0.58 pg WHO-TEQ.结论不同样品间二噁英污染水平相差很大,人群由鱼引起的二噁英暴露量虽然低于世界卫生组织的标准,但若考虑人体多渠道摄入的食品,说明我国二噁英的污染现状不容忽视.
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中国居民指示性多氯联苯膳食摄入水平研究
目的：调查中国居民通过膳食摄入指示性多氯联苯（PCBs）的情况及其潜在健康风险。方法样品来自第五次中国总膳食研究（2009—2013年）。采样根据地理位置和膳食习惯将中国分为南方区和北方区，每个区选取10个省份，进行消费量调查及样品的采集。每个省份设3个采样点，包括1个城市点和2个农村点。本研究根据PCBs主要污染的食品类别和中国居民消费量较大的食品类别，选取了其中肉类、蛋类、水产、乳类、谷类、豆类、薯类及蔬菜8类食品膳食样品，共160份膳食样品进行测定。应用稳定性同位素稀释的气相色谱-质谱法测定主要膳食中7种指示性PCBs污染水平，并结合食物消费量数据计算得到中国居民指示性PCBs的膳食摄入水平。结果目前中国8大类膳食中指示性PCBs含量范围在0.8～1300.1 pg/g之间；水产品指示性PCBs含量[（307.8±302.4）pg/g]高，其后依次是蛋类和肉类，分别为（76.6±92.1）和（63.0±54.9）pg/g。中国不同省份指示性PCBs的膳食摄入量明显不同，范围为0.13～3.58 ng·kg-1·d-1，平均为（0.67±0.77）ng·kg-1·d-1。摄入量高的是福建（3.58 ng·kg-1·d-1），其后依次是上海（1.48 ng·kg-1·d-1）、浙江（1.09 ng·kg-1·d-1）。与美国有毒物质和疾病注册处提出PCBs的低风险剂量值(MRL)值（20 ng·kg-1·d-1）相比，高膳食摄入量仅为MRL值的17.9%，平均膳食摄入量为MRL值的3.4%。水产对中国居民人均指示性PCBs膳食摄入的贡献率为48%（0.32 ng·kg-1·d-1/0.67 ng·kg-1·d-1），是主要来源。结论中国居民指示性PCBs的膳食摄入健康风险处于较低水平。
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28份市售牛肉中二英类化合物含量调查
因二英类化合物具有强毒性，其在多种食品尤其是动物性食品中的污染水平受到整个社会的广泛关注[1-2]。2011年第5次全国总膳食研究结果表明，我国一些地区肉类中存在二英类化合物的污染，也是这类污染物膳食暴露的主要来源[3]。近年来，随着经济的发展和人们饮食习惯的转变，膳食结构发生了一定的变化，牛肉的消费量也日趋增高。
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细胞色素P450CYP3A65斑马鱼模型建立及对环境污染物的生物响应
目的：建立细胞色素P450CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼用于快速、直观检测重金属(铜、镉、锌)及类二噁英化合物五氯联苯( PCB126)等环境污染物。方法 PCR方法钓取斑马鱼CYP3A65基因调控序列，构建于pT2AL200R150G转座载体克隆位点，将pTol2-CYP3A65-EGFP 质粒与pCS-TP 转座酶mRNA共同注射入斑马鱼胚胎单细胞，通过荧光筛选，遗传选育和建立荧光标记转基因斑马鱼品系 Tg ( CYP3A65-EGFP)；利用该转基因斑马鱼胚胎及幼鱼检测上述3种重金属及 PCB126的生物学响应。结果成功建立了CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼品系，绿色荧光在肝和消化道表达；该转基因斑马鱼对3种重金属及PCB126产生生物学响应。染毒96 h后，铜0.1和0.2μmol·L－1、镉0.35和0.7μmol·L－1组、锌1.5和3μmol·L－1组、PCB126所有浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01)；铜0.9μmol·L－1组、镉2.7和5.4μmol·L－1组及锌24μmol·L－1组荧光相对表达量显著减弱( P<0.01)；染毒168 h 后，铜0.1和0.2μmol·L－1组、镉0.35和0.7μmol·L－1组、锌1.5和3μmol·L－1组及PCB1262~32μmol·L－1浓度组荧光相对表达量显著增强( P<0.01)，铜0.9μmol·L－1组、镉2.7和5.4μmol·L－1组、锌12和24μmol·L－1组荧光相对表达量减弱( P<0.05)，随着浓度增加荧光减弱，呈现出量效关系。结论 CYP3A65荧光标记转基因斑马鱼模型可以用来检测铜、镉、锌及PCB126等环境污染物。
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多氯联苯对大鼠肾脏bcl-2及TGFβ1表达影响的研究
目的探讨多氯联苯(polychlorinated biphenyl,PCB)对大鼠肾脏结构及功能的影响.方法用Wistar雄性大鼠40只随机分为4组,Ⅰ组饲喂正常饲料,Ⅱ组饲喂含10-8 mol/L PCB饲料,Ⅲ组饲喂含10-7 mol/L PCB饲料,Ⅳ组饲喂含10-6 mol/L PCB饲料, 饲喂3个月后建立慢性PCB毒性动物模型,用光镜、免疫组化技术研究PCB对大鼠肾脏结构及功能的影响.结果 PCB对大鼠肾脏结构的损伤同PCB剂量呈正相关,高剂量PCB组肾脏组织结构受损严重;PCB能诱导细胞凋亡抑制因子(bcl-2)和转化生长因子β(transforming growth factorβ TGFβ)表达,两者的表达强度同PCB浓度呈正相关;高浓度组bcl-2和TGFβ1的阳性率明显高于对照组和其他组(P<0.05);结论 PCB对大鼠肾脏组织结构及功能产生明显的损伤作用.
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耵聍中多氯联苯的气相色谱-质谱测定法
目的建立人体耵聍中多氯联苯(PCBs)的测定方法.方法样品用正己烷萃取、液-液分配萃取分离、柱层析净化、气相色谱法定量和气相色谱-质谱联用仪定性,并探讨了佳实验条件.结果采用Aroclor1242、1254、1260为标准品,其混合标样的浓度在0.05～0.25μg/ml范围内,色谱峰的峰高与浓度值呈正相关,其r≥0.9990.方法低检出浓度为0.15 μg/g耵脂,平均回收率为92.1%,相对标准偏差为3.0%～4.6%(n=12).结论该方法简易可靠,是一种新颖的生物材料中PCBs的检测方法.
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新生期大鼠化学物暴露对睾丸DNA甲基化及精子生成的影响
目的 通过新生期大鼠暴露DNA甲基转移酶抑制剂(5-Aza-CdR)、镉(Cd)和多氯联苯153(PCB153),探讨化学物新生期暴露对SD大鼠睾丸DNA甲基化变化、细胞凋亡和精子生成的影响.方法 将出生3 d(postnatal day 3,PND3)SD大鼠随机分组,每组24只动物.经口给予溶剂对照5-Aza-CdR(0.025、0.250mg/kg)、PCB153(0.025、0.250、2.500mg/kg)和Cd(1、2、4mg/kg),连续暴露5 d.后1次暴露24 h后,解剖每组的一半动物,剩余动物在无暴露条件下继续喂养至12周龄(成鼠)解剖.检测睾丸细胞凋亡和DNA甲基化水平.结果 与对照组比较,新生期大鼠5-Aza-CdR、PCB153和Cd暴露后,在12周龄时精子计数均呈下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05).新生期化学物暴露后,与对照组相比,基因组整体DNA甲基化水平降低,新生期细胞凋亡上升,差异均有统计学意义(P<0.05). 5-Aza-CdR使p53启动子区BstUI位点甲基化水平下降,p53基因表达上调,提示p53通路可能是DNA甲基化诱导细胞凋亡的通路之一.新生期大鼠Cd暴露可诱导整体DNA甲基化变化,细胞凋亡增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),但p53 mRNA表达及p53启动子区BstUI位点甲基化水平和对照组相比,差异无统计学有意义(P>0.05),提示Cd暴露诱导的细胞凋亡可能是非p53通路依赖的.PCB153的体内暴露未发现基因组整体甲基化和细胞凋亡的明显变化.结论 新生期化学物体内暴露可诱导成年精子形成障碍.DNA甲基化异常和细胞凋亡可能是其中的机制之一.
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大鼠新生期暴露2,2',4,4',5,5'-六氯联苯对精子发生的影响
目的 探讨新生期SD大鼠暴露持续性有机污染物2,2',4,4',5,5'-六氯联苯(PCB153)对大鼠精子发生的远期效应.方法 大鼠出生当天(postnatal day O,PNDO),将所有雄性大鼠混合后,重新分为12只,窝.在出生1 d(PND1),按窝别随机分成对照组和处理组,每组24只雄性大鼠.自PND1开始连续7 d经口给予PCB153 0.025、0.250、2.500 mg/kg和等量溶剂对照玉米油.在PND8,每组随机选择16只大鼠称重和测肛殖距离后,经乙醚麻醉并处死,分离和称重睾丸后作组织学检查.剩余大鼠在PND21断奶并饲养至PND90,称重和测肛殖距离后经质量分数为10%的水合氯醛麻醉后解剖,分离并称重睾丸和附睾,其中睾丸用作组织学检查和精子头计数,附睾尾作精子计数.结果 从PND3至PND8,2.500 mg/kg剂量组体重与对照组相比明显下降,差异有统计学意义(P<0.05);在光学显微镜和电子显微镜下观察显示,PND8睾丸组织曲精小管结构疏松,精原细胞体积增大、变性并与管内结构相脱离.随着染毒剂量的增加,PND90睾丸每日精子生成量和附睾尾精子计数与染毒剂量呈剂量-反应关系(r值分别为-0.97和-0.99,P<0.05).0.250和2.500mg/kg剂量组的每日精子生成量分别为30x106/g睾丸和18×106/g睾丸,与对照组(36×106/g睾丸)相比,差异有统计学意义(P<0.05);0.250和2.500 mg/kg剂量组附睾尾精子计数分别为42×107/g附睾尾和18x107/g附睾尾,明显低于对照组(51×107/g附睾尾),差异均有统计学意义(P<0.05).结论 SD大鼠新生期暴露PCB153,可引起成年期睾丸生精功能障碍,导致每日精子生成量和附睾尾精子计数下降.新生期化学物暴露可能引起雄性大鼠生殖功能的远期损害.
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多氯联苯分子遗传毒性和流行病学研究进展
多氯联苯(PCBs)是一类在环境中广泛存在的持久性有机污染物,对生物体具有蓄积毒性.研究表明PCBs表现出的分子遗传毒性能够引起神经系统、内分泌系统、生殖系统等相关基因表达的显著调节.低等动物、模型动物及啮齿类动物被大量应用于研究PCBs对分子和细胞功能相关基因及生理发育功能相关基因的影响.目前,对于PCBs人群流行病学的研究多集中于部分疾病易感基因,如细胞色素P450、癌基因等.对PCBs分子遗传毒性的探讨对于阐释其遗传毒性机制具有深刻的意义,此文就PCBs的分子遗传毒性及流行病学研究进展作一综述.
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多氯联苯高污染地区人群相关基因表达改变的研究
目的 研究多氯联苯暴露人群外周血相关基因表达改变.方法 采集32例电子垃圾拆解地居民和48例对照人群外周血样,分离提取总RNA,用实时荧光定量PCR检测CCDC92、CCL22、GZMK、MTDH、STK38L、TMEM175等6个基因的mRNA表达水平.结果 根据双标准曲线法,拆解地居民CCL22基因的表达水平为(4.51±2.37)％,低于对照组的(6.76±4.82) ％(t=2.451,P ＜0.05).根据2-△△Ct法,两者的表达水平分别为(0.54±0.28)倍和(0.81±0.58)倍(t=2.480,P＜0.05).根据双标准曲线法,GZMK和MTDH基因的表达水平高于对照组(t=-2.036、-2.228,P＜0.05).根据2-△△Ct法,两者的表达水平也高于对照组(t=-2.035、-2.223,P＜0.05).两种定量方法存在较好的相关性(r=1.000,P＜0.01).结论 CCL22、GZMK和MTDH三个基因在多氯联苯暴露人群中表达异常,可用作多氯联苯暴露人群的效应标志物.
