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  • 诱导子对三角褐指藻岩藻黄素含量和三角褐指藻ξ-胡萝卜素脱氢酶基因表达的影响

    作者:张燕;龚一富;景丹丹;朱帅旗;王何瑜

    目的 研究甲基茉莉酸(MeJA)、花生四烯酸(AA)、乙酰水杨酸(ASA)对三角褐指藻岩藻黄素含量及三角褐指藻ξ-胡萝卜素脱氢酶基因(PtZDS)表达的影响.方法 采用Illumina HiSeqTM 2000高通量测序方法获得PtZDS的eDNA全长序列,并对其进行生物信息学分析.利用HPLC测定MeJA、AA和ASA处理下,三角褐指藻岩藻黄素含量,RT-PCR检测PtZDS基因的表达.结果 该基因全长1 905 bp,具有一个1 776 bp的开放阅读框,编码591个氨基酸.推导的氨基酸序列分析结果表明,该蛋白具有一个典型的氨基氧化酶结构域(amine oxidase domain)、NAD (P)-binding Rossmann-like结构域和叶绿体转运肽序列.系统进化树结果表明,PtZDS蛋白与假微型海链藻(Thalassiosira pseudonana CCMP1335)的同源性达76%,亲缘关系较近,共处同一进化支上.0.1 mg·L-1 AA、25 mg·L-1 ASA和100 μmol·L-1 MeJA处理下三角褐指藻单位细胞内岩藻黄素的含量达到高.RT-PCR分析结果表明,0.1 mg· L-1AA、50 μmol·L-1MeJA和10 mg·L-1 ASA处理下,PtZDS的表达水平达到高.结论 PtZDS基因的表达可能与三角褐指藻中岩藻黄素的积累存在一定关系.100 μmol·L-1 MeJA处理下,三角褐指藻合成岩藻黄素的能力强.

  • 葡萄糖对三角褐指藻生长、岩藻黄素含量及相关基因表达的影响

    作者:刘浩;杭雨晴;朱帅旗;王何瑜;龚一富

    目的 研究葡萄糖对三角褐指藻细胞生长、岩藻黄素含量和岩藻黄素生物合成相关基因表达的影响.方法 本实验以分光光度法研究葡萄糖对三角褐指藻生长影响,HPLC研究藻细胞岩藻黄素含量,荧光定量聚合酶链式反应(PCR)研究岩藻黄素生物合成相关基因表达.结果 在平台期末,葡萄糖处理组藻细胞密度均比对照组高,说明葡萄糖促进三角褐指藻细胞生长.HPLC结果表明,随着葡萄糖浓度的升高,三角褐指藻细胞中岩藻黄素含量呈逐渐下降的趋势.其中,葡萄糖为50mg·L-1时,岩藻黄素含量低,为0.26mg·g-1干重,比对照组降低了67.5%,说明葡萄糖抑制了三角褐指藻岩藻黄素的生物合成.荧光定量PCR结果表明,10~ 50 mg·L-1葡萄糖处理三角褐指藻时,岩藻黄素生物合成相关基因zep、pys、zds、lcyb、crtiso和pds的表达量均比对照组低.该结果与岩藻黄素含量变化一致.结论 葡萄糖抑制三角褐指藻岩藻黄素的生物合成是通过下调岩藻黄素生物合成相关基因表达来实现的.

  • 岩藻黄素对胰岛素抵抗HepG2细胞葡萄糖消耗的影响

    作者:齐佳;王广策;郑国亚;綦慧敏;崔艳君;史丁一;刘顺梅

    目的 建立胰岛素抵抗细胞模型,探讨岩藻黄素体外改善胰岛素抵抗及降血糖活性.方法 采用高浓度胰岛素诱导HepG2细胞,筛选佳诱导条件建立IR-HepG2细胞模型.用不同浓度岩藻黄素处理模型细胞,用葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)检测岩藻黄素对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗量的影响.结果 10-6 mol/L胰岛素处理细胞24 h为建立IR-HepG2细胞模型的佳条件.5~20 μmol/L的岩藻黄素均可促进IR-HepG2细胞对葡萄糖的利用,10、12.5和15 μmol/L组的糖消耗量显著高于模型组(P<0.01).结论 岩藻黄素可改善体外IR-HepG2细胞的胰岛素抵抗,促进IR-HepG2细胞的葡萄糖消耗,具有改善胰岛素抵抗和降血糖活性.

  • 岩藻黄素的理化与生物学特性、制备技术及其生理活性研究进展

    作者:张文源;高保燕;雷学青;李爱芬;吴洁;张成武

    岩藻黄素,又称岩藻黄质或褐藻黄素,是1种脂溶性色素,为胡萝卜素的含氧衍生物,含有1个多烯烃骨架,属于丙二烯型类胡萝卜素.它主要来源于异鞭藻门的褐藻和硅藻以及定鞭藻门的藻类.本文介绍了岩藻黄素的理化性质、生物学特性及其生物合成途径,并对岩藻黄素经典的与现代绿色的提取方法以及多种分离纯化技术进行了详细介绍.同时对岩藻黄素的各种生理活性,包括抗炎、抗肿瘤、抗肥胖、抗氧化、抗痘、抗糖尿病、抗疟疾和抗血脂等方面的研究进展进行了综述性的报道.

  • 岩藻黄素抗H2O2诱导WI-38细胞早衰的作用研究

    作者:崔艳君;唐娜;牛建峰;朱敏敏;成敏;赵春玲;綦慧敏;刘顺梅

    目的 探讨岩藻黄素是否具有抑制H2O2引起的WI-38细胞早衰的活性.方法 WI-38细胞在添加岩藻黄素的培养基中培养一定时间后经H2O2处理诱导发生早衰,用MTT法检测细胞活力,SA-β-半乳糖苷酶染色法检测细胞内衰老相关的SA-β-半乳糖苷酶活性.结果 300 μmol·L-1H2O2处理WI-38细胞20 min可成功建立早衰细胞模型.与空白对照组相比,H2O2处理组细胞活力明显降低,SA-β-半乳糖苷酶阳性细胞数明显增多.5和10μmol·L-1岩藻黄素组细胞活力明显高于H2O2处理组,SA-β-半乳糖苷酶阳性细胞数较H2O2组明显减少.结论 岩藻黄素能够抑制由H2O2处理引起的细胞早衰,具有一定的抗衰老作用.

  • 岩藻黄素对脑胶质瘤细胞U87增殖及自噬的影响

    作者:刘钰罡;孙移坤;戴宜武

    目的:观察岩藻黄素对脑胶质瘤细胞U87增殖及自噬的影响。方法未经处理的U87细胞作为对照组,不同浓度岩藻黄素处理的U87细胞作为实验组,比较各组细胞生存率、细胞凋亡率及自噬体、自噬溶酶体数目和分布,另比较细胞亚显微结构、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ型/微管相关蛋白1轻链3Ⅰ型( LC3Ⅱ/LC3Ⅰ)、酵母自噬基因6同系物(Beclin1)。结果12.5、25、50、75μmol/L岩藻黄素处理组细胞生存率分别为93.19%±5.88%、73.05%±2.33%、49.95%±1.59%、25.95%±1.40%,对照组为100.00%±1.35%,25、50、75μmol/L岩藻黄素处理组分别与对照组比较, P 均<0.05。25、50μmol/L 岩藻黄素处理组细胞凋亡率分别为12.00%±0.56%、31.97%±1.83%,对照组为2.97%±0.21%,各岩藻黄素处理组分别与对照组比较,P均<0.05。25、50μmol/L岩藻黄素处理组细胞LC3-GFP融合蛋白转移至自噬体膜并呈斑点状分布于细胞质内,且斑点数目随药物浓度的升高而增加;对照组LC3-GFP融合蛋白弥散分布在胞质中。镜下可见对照组正常的细胞器结构;50μmol/L岩藻黄素处理组可见大量的自噬小泡、自噬体及自噬溶酶体,其中可见尚未完全降解线粒体结构。25、50μmol/L岩藻黄素处理组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ分别为0.86±0.05、0.89±0.04,对照组为0.65±0.01,各岩藻黄素处理组分别与对照组比较,P均<0.05;25、50μmol/L岩藻黄素处理组Beclin1相对表达量分别为0.39±0.02、0.59±0.04,对照组为0.23±0.01,各岩藻黄素处理组分别与对照组比较,P均<0.05。结论岩藻黄素可有效抑制U87细胞增殖,并诱导自噬的发生。

  • 超声提取裙带菜中岩藻黄素的工艺研究

    作者:苌钊;徐小琴;李强;范智超

    目的 运用超声提取法对裙带菜Undaria pinnatifida中岩藻黄素的提取工艺进行研究.方法 以HPLC法检测岩藻黄素的量,通过单因素实验考察了提取溶剂、乙醇体积分数、提取时间、提取液料比、提取温度对岩藻黄素提取率的影响;并用正交试验得到超声波法提取岩藻黄素的佳工艺.结果 超声提取的佳工艺是:乙醇体积分数为90%,超声时间为30 min,提取温度为40℃,液料比10∶1.此条件下测得岩藻黄素的提取量为1.362 mg/g.结论 裙带菜中岩藻黄素的含量丰富,超声法提取岩藻黄素操作简单、方便快捷.

  • 海带岩藻黄素对高脂饮食诱导肥胖大鼠的预防作用

    作者:李湛;马晓菊;李文;高寒

    目的:研究盐藻黄素对饮食诱导肥胖大鼠的预防作用.方法:32只3周龄雄性SD大鼠两周适应性喂养后,随机分为正常对照组(Control),肥胖模型对照组(HF),岩藻黄素低剂量组(500mg/kg,L-Fc)和岩藻黄素高剂量组(1000mg/kg,H-Fc),除Control组外均给予高脂饮食.饲养8周后处死动物,并分别监测各项指标.结果:H-Fc组体重、Lee's指数均显著低于HF组(P<0.05);HF组的肾周脂肪湿重显著高于H-Fc和L-Fc组(P<0.05),其附睾脂肪湿重显著高于H-Fc组(P<0.05);L-Fc、H-Fc组大鼠血清的TG水平分别明显与极明显低于HF组(P<0.05,P<0.01),另外H-Fc组血糖浓度显著低于HF组(P<0.05);组织病理分析显示,Fc对高脂饮食诱导的大鼠肝细胞脂肪聚积有一定的改善作用,也能够减少脂肪细胞脂肪累积,抑制脂肪细胞膨大.结论:盐藻黄素可以显著地降低营养性肥胖大鼠体重和脂肪湿重,同时对血脂,肝细胞炎症和脂肪细胞体积均有一定的改善作用,说明其具有比较明显的抗肥胖功效.

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