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自主性高功能性甲状腺腺瘤的外科治疗
目的 探讨自主性高功能性甲状腺腺瘤的病因及外科治疗方法方法回顾性分析10例自主性高功能性甲状腺腺瘤患者的临床资料结果10例患者均无喉返神经、喉上神经损伤症状,无甲状腺危象发生结论术式应选择腺叶次全或全切除术
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Graves病动物模型的研究进展
合适的动物模型是研究Graves病(GD)发病机理和防治措施的基础.目前,动物造模的方法包括促甲状腺激素(TSH)受体多肽或核酸免疫动物、TSH受体转染细胞或TSH受体活化T细胞注入试验动物体内,或者采用异体甲状腺组织移植联合外周血单个核细胞、特异性T细胞或自体骨髓细胞输注等.已经建立的准GD动物模型可以产生TSH受体抗体,并具有甲状腺炎的某些特征,但与人类GD的表现仍有较大差异.抗体滴度的维持和生物学活性的诱导是今后努力的方向.
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先天性甲状腺功能减退症TSH受体基因突变研究
目的:研究天津地区先天性甲状腺功能减退症(先天性甲减)患者的TSH受体(thyrotropin receptor,TSHR)基因突变情况.方法:用TKM法提取18例先天性甲减、35例正常对照者外周血DNA,用PCR-SSCP技术分析TSHR基因第1、4、6、10外显子,突变经正反向测序证实.结果:发现1例先天性甲减患儿在TSHR基因第10外显子具有2个位点纯合子突变:450位密码子由CGC置换为CAC,Arg450→His(R450H);727位密码子由GAC置换为GAG,Asp727→Glu(D727E).结论:D727E为TSHR基因多态性,失活性突变纯合子R450H导致该患儿先天性甲减.
关键词： 先天性甲状腺功能减退症 TSH受体 突变 -
TSHR蛋白表达质粒的构建和TSHR蛋白的表达
目的:为获得足量的TSHR蛋白及建立Graves'病的动物模型.方法:将构建于pCRTM3中的TSHR cDNA经限制性内切酶处理后,重新构建于表达型载体PinPoint X质粒中,经酶切分析和PCR检测,并在E.coli JM109中表达,Western blotting免疫印迹法检测其免疫活性.结果:证明TSHR cDNA基因正确地重组于PinPoint X中,并在E.coli JM109中表达, 12%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定表达产物TSHR蛋白分子量为107 kD,Western blotting免疫印迹法证实其具有免疫活性.结论:已成功地重组了TSHR的表达质粒,并得到了有相应免疫活性的TSHR蛋白.
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流式细胞术检测Graves'病患者131 Ⅰ治疗前后辅助性T细胞膜表面CD30和CD195的表达
Graves'病(GD)属于器官特异性自身免疫性疾病,是甲状腺功能亢进症的常见病因,约占全部甲亢的80%～85%[1].目前大多认为本病是由于抑制性T细胞功能缺陷降低了对辅助性T(Th)细胞的抑制,Th细胞协助B细胞产生的大量TSH受体刺激性抗体(TSAb),因此认为GD发病的免疫应答与体液免疫(Th2型反应)有关的.
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131I治疗Graves'甲亢630例的临床分析
近年来,受多种因素影响,甲状腺机能亢进(甲亢)的发病率逐年上升,尤以毒性弥漫性甲状腺肿(Graves'病)为常见[1].Graves'病属于自身免疫性疾病,是甲状腺刺激免疫球蛋白(TSI或TSAb)与甲状腺滤泡细胞上的TSH受体相结合,刺激有应答能力的所有甲状腺组织弥漫性增生和高功能所致的甲亢,我科2003年5月～2007年5月对630例Graves'甲亢患者进行131I治疗,取得了较好的效果,现将结果报告如下.
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人促甲状腺激素受体全长表达载体在真核细胞内的稳定表达
目的 构建pcDNA3.1/人TSH受体(human thyroid-stimulating hormone receptor,hTSHR)基因真核表达载体(已完成),将该真核表达载体在CHO细胞(中国仓鼠卵巢细胞)中表达,并筛选获得稳定表达细胞株.方法 通过脂质体介导,用重组质粒pcDNA3.1-hTSHR转染CHO细胞,以G 418筛选稳定表达细胞株,挑取单克隆,扩大培养并传代;取P5代细胞,抽提基因组DNA及蛋白分别用PCR及Western blot方法鉴定被转染CHO细胞hTSHR的表达情况.结果 得到阳性单克隆5个,传代培养.P5代细胞PCR扩增产物为约530 bp特异性条带,大小与预期相符,未见非特异性条带.Western 印记法结果表明被转染CHO传代细胞有hTSHR蛋白表达.结论 pcDNA3.1-hTSHR真核表达载体可以在CHO细胞中稳定表达,成功构建稳定表达细胞株.为测定自身免疫性甲状腺疾病患者血清TSHR奠定了基础.
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自身免疫性甲状腺病TSH受体基因第一外显子突变的研究
目的探讨自身免疫性甲状腺病发病与TSH受体基因第一外显子突变之间的关系.方法用PCR-SSCP方法对146例Graves病,30例桥本甲状腺炎患者外周血白细胞DNA TSH受体基因第一外显子突变进行筛查.结果经PCR扩增后均出现明晰可辨的带型,SSCP分析176例无1例出现异常泳动.结论 PCR-SSCP分析未发现自身免疫性甲状腺病患者TSH受体基因第一外显子有突变,提示自身免疫性甲状腺病发病可能与TSH受体基因第一外显子突变无关.
