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TSHR蛋白表达质粒的构建和TSHR蛋白的表达

魏枫;雒文田;吕晓虹;王莉;朱本章;马秀萍

摘要: 目的:为获得足量的TSHR蛋白及建立Graves'病的动物模型.方法:将构建于pCRTM3中的TSHR cDNA经限制性内切酶处理后,重新构建于表达型载体PinPoint X质粒中,经酶切分析和PCR检测,并在E.coli JM109中表达,Western blotting免疫印迹法检测其免疫活性.结果:证明TSHR cDNA基因正确地重组于PinPoint X中,并在E.coli JM109中表达, 12%SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳测定表达产物TSHR蛋白分子量为107 kD,Western blotting免疫印迹法证实其具有免疫活性.结论:已成功地重组了TSHR的表达质粒,并得到了有相应免疫活性的TSHR蛋白.

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  • MMP-9及HIF-1α在鼻NK/T细胞淋巴瘤表达中的作用研究

    作者:韦花媚;刘坤平;罗春英;卢运龙;黄永秩;苏群英;陆海善

    目的:研究鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)的表达情况及其与患者临床病理特征的关系。方法:选取右江民族医学院附属医院经病理检查确诊为鼻NK/T细胞淋巴瘤患者,收集病理组织蜡块标本46例(病例组)、同期内镜检查取鼻甲黏膜组织经病理学证实为黏膜慢性炎症标本20例(对照组),分别采用HE染色法和免疫组织化学法处理两组标本,观察两组标本的病理形态、MMP-9及HIF-1a的表达差异,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果:病例组的HIF-1α表达阳性率67.39%(31/46)、对照组表达阳性率为6.52%(3/20),病例组的HIF-1a表达显著的高于对照组(P<0.05)。病例组的MMP-9表达阳性率71.74%(33/46)、对照组表达阳性率为6.52%(3/20),病例组的MMP-9表达显著的高于对照组(P<0.05)。 HIF-1a、MMP-9在阳性表达在Ann Arbor分期(Ⅲ~Ⅳ期)、发生淋巴结转移、血管浸润鼻NK/T细胞淋巴瘤患者的患者组织中出现高表达( P<0.05)。结论:鼻NK/T细胞淋巴瘤患者组织中HIF-1α、MMP-9呈现高表达,并且与患者发生Ann Arbor分期(Ⅲ~Ⅳ期)、发生淋巴结转移、血管浸润具有一定的关系。

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