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生产用Sf9细胞致裸鼠肿瘤性实验报告
对于某些传代细胞系,已证明具有致肿瘤性者,可不必做致肿瘤性检查;而有的细胞系已证明在一定代次内不具有致肿瘤性者,则需要进行致肿瘤性检查.作者采用体内法检查生产用Sf9细胞是否存在致肿瘤性.
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3种传代细胞系对狂犬病病毒CTN-1V株敏感性的比较
目的 比较3种传代细胞系(Vero细胞、BHK-21细胞、MDCK细胞)对狂犬病病毒CTN-1V株的敏感性.方法 采用混种的方法 ,将狂犬病病毒CTN-1V株分别接种于上述3种不同来源的连续传代细胞系,在不同时间观察3种细胞的病变情况,同时应用快速免疫荧光灶抑制试验(RFFIT)和ELISA法检测病毒滴度和抗原含量,分析不同来源细胞对狂犬病病毒CTN-1V株的敏感性.结果 Vero细胞培养的狂犬病病毒滴度在第8天达到高峰,为7.80 LogFFD50/ml,BHK-21细胞病毒滴度在第6天达到高峰,为7.30 LogFFD50/ml,而MDCK细胞在第6天病毒高滴度只有5.55 LogFFD50/ml.BHK-21细胞培养的狂犬病病毒抗原含量(A492)值,在各代次均高于Vero细胞和MDCK细胞.结论 Vero细胞和BHK-21细胞对狂犬病病毒CTN-1V株的敏感性高于MDCK细胞,且BHK-21细胞产毒高峰比Vero细胞提前.
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人生长激素重组载体的构建及其在原代成纤维细胞中的表达
早在1987年,生长激素(GH)基因即被成功克隆,随即开展了基因治疗的有关研究,但其进入临床试验的阻碍主要是缺少一个高效、易操作的基因治疗系统,尤其是靶细胞的问题,尽管传代细胞系易培养,但存在免疫排斥反应和肿瘤形成的危险.本实验以原代小鼠胚胎成纤维细胞为靶细胞,以逆转录病毒为基因表达载体,建立一个可操作的基因治疗系统.
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细粒棘球蚴细胞系细胞代谢抗原检测
体外培养细粒棘球蚴细胞并培育成传代细胞系,将有可能不受限制地提供寄生虫抗原,并用于诊断、免疫预防研究[1,2].本实验对人源细粒棘球蚴细胞系(13G-5)进行特异表达功能检测.
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五种动物传代细胞系对裸鼠的致瘤性
目的观察5种动物传代细胞系对裸鼠是否具有致瘤性. 方法犬肾细胞系(MDCK)、非洲绿猴肾传代细胞系(Vero)、猫肾细胞系(F81)、地鼠肾传代细胞系(BHK21)和恒河猴肾细胞系(MA-104)分别培养后,选择对数生长期的细胞进行消化、离心、计数后,制备细胞悬液,接种裸鼠,定期观察,通过病理组织形态学观察判定结节是否具有肿瘤的特性. 结果 Vero、F81、MA-104接种裸鼠后全部有肿块形成,经病理形态学检查,均为炎性组织,其致瘤率为零. MDCK在30代以内,致瘤率为零,第30～66代致瘤率为10%～40%,BHK21致瘤率为100%. 结论 F81,Vero和MA-104属非致瘤性细胞系,MDCK属低致瘤性细胞系,但经冻融或超声波裂解后对裸鼠无致瘤性,BHK21属致瘤性细胞系,其正常细胞经裂解后仍具有致瘤性,而且具有稳定的重复性.
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四种传代细胞株软琼脂抛锚能力观察
目的观察传代细胞在软琼脂中生长情况. 方法将4种细胞与软琼脂混合均匀,铺于平皿中,置37℃,50～100 mL.L-1 CO2环境中培养. 观察细胞集落形成情况. 结果本实验室的五株非洲绿猴肾细胞Vero-XAYU,Vero-XAYE,Vero-XAH,Vero-XAJN和Vero-XAM,三株猫肾细胞F81-XAJU,F81-XAM和F81-XAK不呈现致瘤性独立抛锚生长;犬肾细胞MDCK-XAYE,MDCK-XAYU,MDCK-XAJN,MDCK-XAJA和MDCK-XAM五株则呈现较低的致瘤性独立抛锚生长;两株金黄地鼠肾细胞BHK21-XAYU和BHK21-XAM及两株非洲绿猴肾细胞Vero-XAYU和Vero-XAK则呈现较高的致瘤性独立抛锚生长.
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Vero细胞作为基质的病毒性疫苗研制进展
使用传代细胞系Vero细胞生产脊髓灰质炎疫苗和狂犬病疫苗已有多年的历史.随着传代细胞系潜在致癌性的相关检测技术不断发展完善,消除了人们对其潜在致癌性的担忧,监管部门正逐步认可使用传代细胞系来生产病毒性疫苗.目前,Vero细胞被越来越多地用于生产病毒类疫苗,并用生物反应器工艺取代转瓶工艺,便于规模化培养.本文就Vero细胞作为基质研制的病毒性疫苗作一综述.
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两种传代细胞系对轮状病毒D36株(P[4]G2)敏感性的比较
目的 探讨轮状病毒D36株在MDCK细胞和Vero细胞上培养的适应性,确定其培养的佳细胞基质及培养条件.方法 将D36株以MOI1.0按不同培养瓶分组接种MDCK细胞和Vero细胞,补充含有不同浓度胰酶的维持液,于不同时间观察两种细胞病变的情况,同时抽样检测病毒滴度,分析两种细胞对D36株的敏感性.结果 D36株病毒感染MDCK细胞后第6天病毒滴度达到高,为(5.00 ～5.50)lgCCID50/mL;而D36株病毒感染Vero细胞后病毒滴度于第8天达高峰,为(4.50 ～4.75)lgCCID50/mL.另外,在两种细胞维持液中加入约0.8μg/mL的胰酶均可提高病毒滴度.结论 两种细胞系在同等条件下感染D36株病毒后,MDCK细胞比Vero细胞出现病变的时间早,每一批MDCK细胞培养物病毒滴度高于同批次试验的Vero细胞培养物.
