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一种新的快速灌注法在心脏移植模型中的应用
豚鼠-大鼠异种心脏移植模型是研究异种移植排斥反应的经典模型之一,但是豚鼠的解剖生理特点给下腔静脉灌注带来一定困难.经过反复实验,我们研制了一种新式的"快速灌注法"(肝上下腔静脉灌注法),效果满意,现介绍如下.
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豚鼠-大鼠颈部异位心脏移植模型的建立
豚鼠-大鼠心脏移植是研究非协调性异种移植排斥反应的良好小动物模型,我院1999年6月~12月成功建立56只豚鼠Ⅲ大鼠颈部心脏移植模型,现将方法介绍如下.
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大鼠腹部心脏移植模型的显微外科技巧
心脏移植是治疗终末期心脏病的有效手段,已应用于临床,但有诸多问题如排斥反应等亟待解决.因此,建立一个稳定的动物模型进行基础研究非常必要.本实验旨在探讨大鼠腹部心脏移植模型的手术技巧,并验证DA和Lewis大鼠品系的纯正性.
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建立大鼠Ono氏心脏异位移植模型的几点改进
目的:建立并改进Ono氏异位心脏移植模型.方法:以Ono氏腹腔异位心脏移植模型为基础,在受体血管的切口、吻合方法及术后补液几方面加以改进.结果:通过改进,简化了手术过程,提高了手术有效率.正式实验51次,成功率为84.3%,整个手术过程为(87.5±3.0)min.结论:改进的方法稳定可靠,提高了手术的成功率.
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一种改进的大鼠腹部心脏移植模型
本文介绍一种建立大鼠腹部心脏移植模型的新术式[1],并与目前应用较广泛的改良Ono术式[2]进行比较,浅述我们的一些体会.
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腹腔内直接视诊和触诊对确定大鼠同种异位心脏移植排斥终点的诊断价值
犬鼠同种异位腹腔内心脏移植模型是实验移植研究工作者所喜爱选用的一种研究模型,但如何准确判断实验大鼠排斥反应的终点,还存在一些问题.目前文献报道的判断意见是:
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小鼠颈部异位心脏移植技术的改进
小鼠心脏移植模型在现代移植免疫研究中具有不可替代的地位.我们对此模型进行了初步探索,某些技术方法进行了改进,效果较好.报道如下:
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阻断CD28/B7和CD134/CD134L共刺激通路对心脏移植排斥反应的影响
CD134-CD134L(也叫OX40-OX40L)通路是活化T细胞进一步增殖、分化为效应细胞和记忆细胞所必需的共刺激信号,是T细胞介导的免疫应答的关键共刺激信号[1].CD134的表达不依赖CD28-B7信号,但是CD28-B7信号可以促进CD134的表达.同时CD28-B7信号和CD134-CD134L信号在时空表达上具有序贯性,分别作用于T细胞活化、增殖、分化的早期和晚期阶段[2,3].我们本文利用排斥反应强烈的不同种系间的心脏移植模型,观察单独和同时阻断CD28-B7和CD134-CD134L信号通路对抗排斥反应的效果.
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血管化小鼠异位心脏移植模型
啮齿动物心脏移植模型在移植免疫研究中广泛应用[1,2].其中,小鼠模型更具优势:近交系小鼠品种丰富;小鼠易于转基因、基因敲除操作;小鼠的分子生物学探针、抗体和工具药品种丰富;小鼠体重轻,对于昂贵、来源稀少的药物,小鼠模型可降低研究成本.但小鼠血管细,凝血机制活跃,容易发生动脉内膜损伤,血栓形成,导致手术失败.本研究旨在探讨小鼠心脏移植成功的影响因素.
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改进的Ono大鼠异位心脏移植模型
我们在制作120例大鼠腹腔心脏移植模型过程中,对受体准备、供心摘取及灌注、血管吻合等方面进行了改进[1].
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小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型的建立
我们在成功建立大鼠腹部、颈部及小鼠颈部心脏移植模型的基础上,建立了小鼠心脏移植急性排斥反应体外模型,现将结果报道如下.
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大鼠心脏异位移植模型的建立
目的:为研究移植免疫建立大鼠心脏异位移植模型.方法:采用Ono's方法建立大鼠心脏异位移植模型,用大鼠的升主动脉和肺主动脉分别与大鼠的腹主动脉和下腔静脉作端侧吻合,同时使用两台单道心电图机描记受体双心和移植心脏的心电图.结果:从2001年11月到2003月1月共进行了248例大鼠心脏异位移植,其中179例手术供受体均用SD大鼠;69例手术供体为SD大鼠,受体为Wistar大鼠.开始的56例同种移植手术时间超过3 h,受体均死亡;随后的82例同种移植手术时间在80~150 min,受体存活13例,但移植心脏复跳的只有3例;后手术时间缩短至45~65 min时,手术成功率达到85%.同种移植心脏存活时间为(57±33) d,异种移植心脏存活天数(未使用免疫抑制剂治疗)为(7±1.53) d.结论:缩短手术时间是提高心脏移植成功率的关键.
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环孢嘌呤A影响大鼠心脏移植中fractalkine表达的免疫组化研究
目的研究大鼠心脏移植中fractalkine的表达以及环孢嘌呤A抗免疫排斥的作用,并探讨该作用的可能机制.材料和方法 1.动物:成年雄性SD大鼠和Wistar大鼠, 体重约200克/只.2.大鼠同种异体心脏移植模型:取供者SD大鼠心脏,结扎上腔静脉和肺静脉.打开受者Wistar大鼠腹腔,结扎腰动脉以及下腔静脉的分支.分别将供者主动脉与受者腹主动脉、供者肺动脉与受者下腔静脉做端侧吻合,并于术后分为三组:Ⅰ组(对照组)、Ⅱ组(CsA7.5mg/KgB.W.)和Ⅲ组(CsA 15mg/Kg B.W.).每组样本7例(n=7),分别于1d、3d、7d和11d取移植心脏以及供者主动脉,脱水包埋或液氮冻存.3.H.E染色及排异分析:石蜡切片,常规H.E染色,依据国际心肺移植组织(ISHLT)1990年心脏急性排异反应分级标准进行排异反应分析.4.免疫组织化学染色:石蜡或冰冻切片,常规免疫组化方法检测ICAM-1 的表达:fractalkine一抗(羊抗鼠),二抗(驴抗羊),ABC试剂盒(均为Sa ntaCrus公司产品).先以3%H2O2、柠檬酸钠微波抗原修复后,PBS洗三次,加1.5%驴血清封闭,分别加一抗、生物素化二抗、亲合素-生物素化酶试剂DA B显色.以PBS及fractalkine的同型抗体作阴性对照.结果心脏移植后1和 3天,供者心脏和主动脉出现轻度炎性浸润,排异反应为1A或1B级;11天和12天时出现弥漫性炎性浸润和心肌坏死,并伴明显水肿、出血以及血管炎,排斥级别达3B或4 级.CsA治疗可使移植排异降低1~2.5级.移植后,血管内皮细胞和外膜浸润淋巴细胞的fractalkine表达显著升高,并有血管平滑肌细胞和间质成纤维细胞出现较强阳性反应.CsA治疗可明显抑制移植的心脏及主动脉的fractalkine表达. 该抑制作用在1至3天内,呈CsA剂量依赖性,而在7至11天与剂量无关.结论 Cs A治疗是下调淋巴细胞迁移和浸润、减弱移植排斥反应的有效手段,其机理可能与降低趋化蛋白表达有关.
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大鼠颈部异位心脏移植体会
应用动物模型是现代医学认识生命科学客观规律的实验方法和手段。通过动物模型的研究,进而有意识地改变那些自然条件下不可能或不容易排除的因素,以便更加准确地观察模型的实验结果。器官移植更需要各种脏器的移植模型,以进行移植免疫、免疫耐受、免疫抑制剂应用,移植后病理、病理生理、生化及器官保存方面的研究。在器官移植各种模型中,心脏移植模型以其特有的优越性显示了其既简单又实用的价值。为了开展移植领域的研究工作,我科近年开展大鼠颈部异位心脏移植,现将移植中一些体会报道如下。……