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献血者ELISA法检测HBsAg灰区标本的确认结果分析
目的 探讨献血者酶联免疫吸附试验法(ELISA法)检测乙型肝炎表面抗原(HBsAg)为灰区标本采用中和试验确认情况.方法 260例ELISA法检测HBsAg灰区标本(0.7＜S/CO＜1),分为A组97例(0.7＜S/CO＜0.79)、B组90例(0.80＜S/CO＜0.89)、C组73例(0.90＜S/CO＜0.99),采用中和试验对HBsAg灰区标本进行确认.结果 A、B、C组阳性率分别为3.09%、5.56%和13.70%,A组阳性率与B组比较差异无统计学意义(P＞0.05);C组阳性率显著高于A组和B组,差异具有统计学意义(P＜0.05);双试剂灰区确认阳性率高于单试剂灰区,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 ELISA法检测HBsAg存在一定程度的漏检,采用中和试验确认可减少HBsAg的漏检及提高血液安全,避免血液资源的浪费.
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酶联免疫反应加速仪在检测乙肝表面抗原中的作用
我国为世界上乙型肝炎高发区,因此乙型肝炎表面抗原(HBsAg)已作为临床常规检验项目.酶联免疫吸附试验(ELISA)常规操作使用水浴箱孵育,而采用ELISA加速仪可加速反应,提高灰区标本检出率.为探讨ELISA加速仪的应用价值,我们同步检测质控血清和临床标本的HBsAg,并对结果进行对比分析.
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ELlSA法检测抗-HIV实验中灰区设置的探讨
人类免疫缺陷病毒(HIV)感染标志物的检测是采供机构对献血标本进行血液筛查的法定项目之一.在用ELISA方法测定HIV抗体时,是根据临界值(Cut-Off值)来判断是否有反应性,并决定相应的血液是否能用于临床.在计算临界值时,常设置灰区,希望以此提高试剂的敏感度,淘汰处在弱阳性甚至"窗口期"的标本,而灰区设置的范围并没有统一的设置标准,各实验室自行设置.那么设置灰区是否能提高对抗-HIV检测的敏感度?笔者对此进行了探讨,现报告如下.
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ELISA法对抗-HIV灰区标本的再检测分析
ELISA法检测血样时出现灰(色) 带反应是指对同一血样进行检测时,样本OD值在Cut off (CO) 值20 %上下区带的反应,发生灰带反应提示有一定的抗体活性存在.在感染早期(血清转阳期),由于抗体含量尚低,仅出现OD值轻微升高是可能的,感染个体实际上在某一阶段均经过了灰带区.为保证抗-HIV检测结果的可靠性,有效预防AIDS的传播、蔓延,笔者对21例抗-HIV灰区标本进行再检测分析,现报告如下.
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化学发光法检测丙型肝炎病毒抗体灰区标本的假阳性
目的 探讨化学发光法(CLIA)检测丙型肝炎病毒(HCV)抗体阳性灰区标本的假阳性情况,为临床诊疗提供应用参考.方法 收集本院Architect i2000检测抗HCV抗体阳性灰区结果(1≤S/CO≤5)的标本161例.全部标本均进行HISCL 5000检测.以高敏HCV核酸(RNA)定量和重组免疫印迹试验(RIBA)的结果为标准确定真、假阳性.结果 HISCL检测抗HCV抗体结果阳性的标本有23例,阴性的有138例.所有标本的HCV RNA定量检测结果均阴性.RIBA检测13例结果阳性,45例不确定,103例阴性.Architect和HISCL与RIBA的假阳性率分别为92.0%(148/161)和52.2%(12/23).Architect方法检测的标本RIBA阳性组、不确定组和阴性组的平均COI值分别2.8、2.2和2.0,三组间的S/CO值差异有统计学意义(P<0.05);HISCL方法检测的标本RIBA阳性组、不确定组和阴性组的平均COI值分别为3.0、1.0和0.2,三组间的COI值差异有统计学意义(P<0.05).结论 Architect i2000和HISCL 5000检测抗HCV抗体的灰区标本均出现较高假阳性,假阳性原因还需进一步深入研究,迫切需要研发敏感度和特异性更高的抗HCV抗体的实验室筛查方法.
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ELISA检测抗-HCV抗体灰区设置的探讨
由于ELISA法的局限性,在进行相关抗原或抗体检测时会出现假阴性或假阳性,对于血站来说,假阴性的危害远大于假阳性,为大程度减少假阴性的发生,血站血液检测实验室在进行检测时对阈值,即吸光度值/临界值(S/CO)进行设置,对吸光度值虽处于CO值以下但很接近的标本进行阳性剔除,这一范围就是灰区,这种设置就是灰区设置[1].实际运用中有的实验室将这一范围设为CO值的10%以下[2],有的将这一范围设为CO值的20%以下[3],还有的是将CO-2s的范围设为灰区[4].为摸索出适合本站实验室的灰区设置,笔者将本站2007~2010年抗-HCV抗体ELISA检测比值处于CO值30%以内的183例灰区标本进行HCV RNA检测,结果报道如下.
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ELISA方法检测HBsAg设置灰区的必要性探讨
目的 探讨ELISA方法检测无偿献血者HBsAg设置灰区的必要性.方法 采用2个厂家生产的ELISAHBsAg试剂对献血者标本分别进行检测,其检测结果在0.6≤s/co＜1之间的标本再用同种试剂进行双孔复试,双孔中至少有1份结果仍在灰区内的,留取标本分别做电化学发光定量分析、HBV 5项和核酸HBV DNA检测.结果 106例灰区标本中电化学发光法检测出阳性标本12例,核酸检测出HBV DNA阳性标本16例.结论 对HBsAg灰区标本,ELISA检测漏检率很高,应该引起高度重视,并结合实验室室内质控规则,考虑到批内差异和批间差异的存在,结合自己实验室的情况设置合适的灰区,大限度地检出这些可疑标本,并进行重复检验或确认实验,进一步减少HBsAg漏检的可能性,以提高输血安全.
